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2019-2020學(xué)年高中生物 專題綜合測評2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(含解析)新人教版選修1

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1、專題綜合測評(二)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(滿分:100分時間:90分鐘)一、選擇題(每題2分,共25題,共50分)1有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是()A任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子B碳源和氮源必須具有一定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素C微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外,還受到溫度、pH、氧、滲透壓等的影響D營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好C培養(yǎng)基中碳源和氮源必須具有一定比例,但含量最多的元素不應(yīng)是碳元素,應(yīng)是氧元素。營養(yǎng)物質(zhì)的濃度并不是越高越好,濃度過高會導(dǎo)致培養(yǎng)物細(xì)胞失水。2平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是()A接種時再拿起來方便B在皿底上標(biāo)記日期等方便C正著放置容易破碎D

2、防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染D平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。3微生物(除病毒外)需要從外界吸收營養(yǎng)物質(zhì),并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列有關(guān)微生物營養(yǎng)的說法,正確的是()A纖維素分解菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B在纖維素分解菌生長的培養(yǎng)基中只需碳源、氮源、水、無機(jī)鹽即可正常生長C培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對微生物的生長越有利D生長因子是微生物生長必需的,而微生物本身合成這些物質(zhì)的能力往往不足D纖維素分解菌是異養(yǎng)型微生物,其碳源為有機(jī)物,如纖維素等。硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物,其碳源物質(zhì)為CO2,因此A錯誤;纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需加入維生素做生長因子,才能

3、正常生長,因此B錯誤;培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度過高會導(dǎo)致微生物不能從培養(yǎng)基中吸水,將出現(xiàn)失水過多而死亡的現(xiàn)象,對生長不利,因此C錯誤。4微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù),下列相關(guān)敘述正確的是()A病毒和細(xì)菌的培養(yǎng)基成分相同B平板劃線法中的“線”是連續(xù)的、不分區(qū)域的C微生物培養(yǎng)基中并不是都必須添加碳源或氮源D在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒C病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)才能進(jìn)行生命活動,如可用活雞胚培養(yǎng)病毒;平板劃線法每次劃線前都要灼燒接種環(huán),劃線是分區(qū)域的;微生物種類不同,對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同,應(yīng)根據(jù)所培養(yǎng)微生物的需要確定培養(yǎng)基的成分;對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行滅菌,而

4、不是消毒。5稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D對培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理C只有菌液稀釋到一定程度后,在固體培養(yǎng)基表面才能形成單個的菌落,否則可能會出現(xiàn)兩個或兩個以上的細(xì)菌共同形成一個菌落,或菌落出現(xiàn)重疊。6用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時()可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進(jìn)行接種都需要在火焰旁進(jìn)行接種都可以用來計數(shù)活菌ABCDC平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基;平板劃線法使用接種針進(jìn)行

5、操作,而稀釋涂布平板法使用涂布器進(jìn)行操作;純化時,要進(jìn)行無菌操作,需要在火焰旁接種,避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基;平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)。7將接種后的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入37 恒溫箱的目的是()A對比觀察培養(yǎng)基有沒有被微生物利用B對比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染C沒必要放入未接種的培養(yǎng)基D為了下次接種時再使用B對未接種的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),起到對照作用,可確定培養(yǎng)基是否被雜菌污染。8下面是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列敘述正確的是()A在五個區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B劃線操作時完全打開皿蓋,劃完立即蓋上C接種時不能劃破培養(yǎng)基,否則難以

6、達(dá)到分離單菌落的目的D第1區(qū)和第5區(qū)的劃線最終要連接起來,以便比較前后的菌落數(shù)C在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌;進(jìn)行劃線操作時,左手將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋;注意接種時不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達(dá)到分離單菌落的目的;第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連。9鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中碳源為()ACMCNaB木聚糖C纖維素D裂解酶A分離纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中,加入纖維素粉,而鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中加入的是纖維素鈉(CMCNa)。10固氮菌可以從豆科植物的根瘤中分離出來,有關(guān)說法錯誤的是()A選用大且紅潤的豆科植物根瘤B分離培養(yǎng)固

7、氮菌的關(guān)鍵是殺死表面雜菌C因材料過大,不能采用平板培養(yǎng)基分離技術(shù)D可以利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行純化C題目中的固氮菌應(yīng)是根瘤菌??梢栽谌钡呐囵B(yǎng)基上選擇培養(yǎng),也可以利用瓊脂平板劃線法進(jìn)行分離。當(dāng)然,殺死根瘤表面雜菌,將內(nèi)部根瘤菌制成菌落是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。11某細(xì)菌培養(yǎng)至對數(shù)期,當(dāng)細(xì)菌數(shù)目為105個/mL時,開始計時,90 min后細(xì)菌數(shù)目為1.6106個/mL。試問再經(jīng)過多久,細(xì)菌數(shù)目會達(dá)到6.4106個/mL()A30 minB45 minC60 minD90 minB按公式NtN02t,則1.61061052t,2t16,t4。即細(xì)菌由105個/mL1.6106個/mL,共繁殖了4代,每個繁殖周期為2

8、2.5 min。仍按此公式可知,由1.6106個/mL6.4106個/mL,繁殖了2代,共需222.545 min。12下列操作需要在火焰旁進(jìn)行的是()土壤取樣稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板微生物的培養(yǎng)ABCDD實(shí)驗(yàn)操作過程要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作,除實(shí)驗(yàn)空間必須消毒外,每個操作步驟都必須在無菌區(qū)進(jìn)行。土壤的稱取、溶液的稀釋、涂布平板都需要在酒精燈火焰旁的無菌區(qū)(或接種箱內(nèi)的酒精燈火焰旁)完成,以防止雜菌污染。13在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時,一同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只篩選出大約50個菌落。該同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有()土樣不同培養(yǎng)基被污染操作失誤沒

9、有設(shè)置對照ABCDA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同,最可能的原因是土樣不同,其次是操作失誤或培養(yǎng)基被污染,而與是否設(shè)置對照沒有關(guān)系。14關(guān)于土壤中細(xì)菌的分離,下列正確的操作步驟是()土壤取樣稱取10 g土壤,加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107倍的稀釋液ABCDC在分離土壤中某種細(xì)菌時,應(yīng)先選取土樣(10 g),然后加無菌水獲得土壤浸出液,并進(jìn)行不同倍數(shù)稀釋,最后將稀釋液涂布到培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng),并分離和計數(shù)。15三個培養(yǎng)皿中分別加入10 mL不同的培養(yǎng)基,然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36 h后,計算菌落數(shù),結(jié)果如下表

10、。下列相關(guān)敘述正確的是 ()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)瓊脂、葡萄糖35瓊脂、葡萄糖、生長因子250瓊脂、生長因子0A該實(shí)驗(yàn)采用的是液體培養(yǎng)基B該實(shí)驗(yàn)采用平板劃線法接種C和對照,說明大腸桿菌的生長不需要生長因子D和對照,說明大腸桿菌的生長需要葡萄糖D該培養(yǎng)基加入了瓊脂,故為固體培養(yǎng)基;對微生物進(jìn)行計數(shù)時宜采用稀釋涂布平板法接種,而不是平板劃線法接種;與中有葡萄糖、生長因子兩種變量,不能得出相應(yīng)結(jié)論;和對照,自變量是有無葡萄糖,說明大腸桿菌的生長需要葡萄糖。16苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了

11、只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用稀釋涂布平板法C若圖中為對照實(shí)驗(yàn),則其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源 D使用平板劃線法可以在上獲得單菌落C用苯酚作為選擇培養(yǎng)基中的碳源,也是微生物的能源物質(zhì),會影響其他微生物生長。測定培養(yǎng)液中細(xì)菌數(shù)目常采用稀釋涂布平板法。若為對照實(shí)驗(yàn),則中應(yīng)含除苯酚外的其他碳源,以苯酚作為唯一碳源。使用稀釋涂布平板法或平板劃線法都可以在上獲得單菌落。17下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A可采用干熱滅菌法對微生物培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌B測定土壤

12、樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法C分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細(xì)菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源A培養(yǎng)基滅菌通常用的是高壓蒸汽滅菌法,而干熱滅菌法通常適用于玻璃器皿、金屬用具等耐高溫且不適合其他方法的物品;分離能分解尿素的細(xì)菌,用的選擇培養(yǎng)基里尿素是唯一的氮源,這樣才能分離出分解尿素的細(xì)菌。18下列有關(guān)分解纖維素的微生物分離的敘述,不正確的是()A在加入剛果紅的培養(yǎng)基中,當(dāng)纖維素被纖維素分解菌釋放的纖維素酶分解后會出現(xiàn)透明圈B在用剛果紅染色時只能先培養(yǎng)微生物再加入剛果紅,不能在倒平板時加入C纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵法和固體發(fā)酵法D纖維素酶的測定方法,一般是

13、對所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定B剛果紅染色有兩種方法,一種是先培養(yǎng)微生物再加入剛果紅,另一種是在倒平板時就將剛果紅染液加入培養(yǎng)基中,然后再培養(yǎng)微生物,兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),但都可以應(yīng)用。19下列關(guān)于纖維素分解菌分離實(shí)驗(yàn)的說法,不正確的是()A通常采用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌B從土壤中分離含量較多的微生物時,選擇培養(yǎng)可以省略C該實(shí)驗(yàn)用到選擇和鑒別培養(yǎng)基D在用剛果紅染色法中,若將微生物培養(yǎng)在事先加入剛果紅的培養(yǎng)基上,出現(xiàn)透明圈的菌落肯定為所需菌種D剛果紅能鑒別纖維素,可采用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌;從土壤中分離含量較多的微生物時,選擇培養(yǎng)可以省略,但需要進(jìn)行鑒別培養(yǎng);有些微生物具有降解色素的

14、能力,它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈,故出現(xiàn)透明圈的菌落不一定為所需菌種。20加工橘子罐頭時采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))會產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物,不能產(chǎn)生所用酶的是()A生長在麥麩上的黑曲霉B生長在酸奶中的乳酸菌C生長在棉籽殼上的平菇D生長在木屑上的木霉 B根據(jù)題目分析可知需要的酶為纖維素酶,黑曲霉、平菇、木霉分別以分解麥麩、棉籽殼、木屑為生,故能產(chǎn)生纖維素酶,生長在酸奶中的乳酸菌不能合成纖維素酶。21通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長,在培養(yǎng)基中加

15、入青霉素可抑制細(xì)菌和放線菌的生長,在培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分離出()A大腸桿菌B霉菌C放線菌D固氮細(xì)菌A固氮微生物的生長不需要從培養(yǎng)基上獲得氮源,可在缺乏氮源的培養(yǎng)基上正常生長;加入青霉素的培養(yǎng)基上不能生長細(xì)菌和放線菌,則可收獲霉菌;加入酚的培養(yǎng)基使細(xì)菌和霉菌不能正常生長,而放線菌卻能利用酚作原料合成自身產(chǎn)物。22在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng),可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開,對培養(yǎng)基的要求是()加抗生素不加抗生素加氮素不加氮素加葡萄糖不加葡萄糖37 恒溫箱中培養(yǎng)2830 溫度下培養(yǎng)ABC

16、DC自生固氮菌有固氮功能,因此培養(yǎng)基中不需要加氮素;細(xì)菌對抗生素敏感,因此,不能加抗生素;自生固氮菌是異養(yǎng)型的,應(yīng)加葡萄糖;其生長繁殖的適宜溫度是2830 。23某學(xué)者欲研究被石油污染過的土壤中的細(xì)菌數(shù)并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列有關(guān)操作錯誤的是()A利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)B利用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選能分解石油的細(xì)菌C采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱取土壤和稀釋土壤溶液時應(yīng)在火焰旁A平板劃線法能對細(xì)菌分離純化但不能計數(shù),通常將被石油污染過的土壤浸出液稀釋后,采用稀釋涂布平板法分離分解石油的細(xì)菌菌種,并對菌種進(jìn)行計數(shù);篩選能分解石油的細(xì)菌只能利用以石油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基;稱取

17、土壤和稀釋土壤溶液過程中的每一步都要在火焰旁操作。24現(xiàn)有兩種固體培養(yǎng)基,已知其配制時所加的成分和含量如下表,用這兩種培養(yǎng)基分別去分離土壤中的兩種微生物,你認(rèn)為它們適于分離()成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖純淀粉甲培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培養(yǎng)基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌B甲培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型自生固氮菌;乙培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型自生固氮菌C甲培養(yǎng)基適于分離酵母菌;乙培養(yǎng)基適于分離真菌D甲培養(yǎng)基適于分離自養(yǎng)型共生細(xì)菌;乙

18、培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型共生固氮菌B固氮菌中能獨(dú)立生存的是自生固氮菌,需和其他生物結(jié)合在一起才能生存的是共生固氮菌,甲培養(yǎng)基中含有的葡萄糖和淀粉是有機(jī)物,由此推出該培養(yǎng)基適于分離異養(yǎng)型的自生固氮菌;乙培養(yǎng)基中不含有機(jī)碳源,所以可用來分離培養(yǎng)自養(yǎng)型的自生固氮菌。25下表資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長情況,(S、C、M)為簡單培養(yǎng)基,U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì),問哪一種物質(zhì)細(xì)菌不能合成()培養(yǎng)基S、C、MVZUYZXVYUXYZ生長狀態(tài)注:表中“”表示能生長,“”表示不能生長。AUBVCYDZC從表中可以看出,凡是能生長的均有Y,而不能生長的均無Y。因此,Y是細(xì)菌不能合成的物質(zhì)。二、

19、非選擇題(共4個小題,共50分)26(10分)細(xì)菌莢膜的觀察是微生物形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的基本內(nèi)容之一。硅酸鹽細(xì)菌在無氮培養(yǎng)基、鉀細(xì)菌培養(yǎng)基及硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基上均能生長,形成較厚的莢膜。下表1為無氮培養(yǎng)基的配方,表2是每種培養(yǎng)基上每個稀釋度的菌落數(shù)及菌落直徑情況。請回答下列問題:表1無氮培養(yǎng)基的配方葡萄糖10.0 gK2SO40.2 gK2HPO40.2 gCaCO35.0 gMgSO47H2O0.2 g瓊脂20.0 gNaCl0.2 g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容至1 000 mL表2各稀釋度平板上菌落數(shù)及菌落直徑培養(yǎng)基種類各稀釋度對應(yīng)的平均菌落數(shù)菌落直徑(mm)103104105106無氮培養(yǎng)基

20、323201.02.0鉀細(xì)菌培養(yǎng)基36640.6多數(shù)小于1.5硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基50851.2多數(shù)大于2.0(1)根據(jù)無氮培養(yǎng)基的配方可知,從物理性質(zhì)上看該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基;從功能上看,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基,理由是_。(2)硅酸鹽細(xì)菌能在無氮培養(yǎng)基中生長,推測該細(xì)菌具有_功能。(3)為統(tǒng)計硅酸鹽細(xì)菌的數(shù)目,應(yīng)采用_法進(jìn)行接種,該方法的所有操作都應(yīng)在_附近進(jìn)行。(4)進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)的同時也設(shè)置了空白對照,空白對照的培養(yǎng)基中_,說明培養(yǎng)基滅菌合格。根據(jù)表2中的數(shù)據(jù)可以得出,用_培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細(xì)菌的效果最好。解析(1)培養(yǎng)基中添加了一定的瓊脂,且該培養(yǎng)基是用來觀察菌落與測定菌落直徑的,因此該培養(yǎng)基為

21、固體培養(yǎng)基。無氮培養(yǎng)基里不含氮源,故從功能上看,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)硅酸鹽細(xì)菌能在無氮培養(yǎng)基中生長,推測該細(xì)菌具有固氮功能。(3)從“稀釋度”以及“菌落數(shù)”等信息可以分析出,硅酸鹽細(xì)菌的接種方法應(yīng)是稀釋涂布平板法,所有操作都應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。(4)為檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格,需設(shè)置空白對照:空白對照的培養(yǎng)基中無菌落長出,說明培養(yǎng)基滅菌合格。從“平均菌落數(shù)”以及“菌落直徑”可以看出,硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基篩選硅酸鹽細(xì)菌的效果最好。答案(1)固體選擇配制的培養(yǎng)基中無氮源(2)固定空氣中氮?dú)獾?或固氮)(3)稀釋涂布平板酒精燈火焰(4)無菌落長出硅酸鹽細(xì)菌27(13分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀

22、況,某研究小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是_;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌,操作時,接種環(huán)通過_滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是_。(3)示意圖A和B中,_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(

23、4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)的利用率。解析(1)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格,可在涂布接種前,隨機(jī)取滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間。0.1 mL稀釋液中平均有(393837)/338個活菌,則每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為38/0.1380,則稀釋前每毫升水樣中活菌數(shù)目為3801003.8104,則每升水樣中活菌數(shù)目為3.81041 0003.8107。(2)接種環(huán)、接種針等金屬用具可直接在酒精燈火焰

24、的充分燃燒層灼燒,以達(dá)到迅速徹底滅菌的目的。在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。(3)比較圖A和圖B可以看出:A培養(yǎng)基中細(xì)菌的分布呈線性,是用平板劃線法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果;B培養(yǎng)基中細(xì)菌均勻分布,是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)振蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量,還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高了營養(yǎng)物質(zhì)的利用率,因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)28(12分)臨床使用抗生素前

25、,有時需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A_;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B_;含

26、C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明 _;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的 _。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素 _。解析(1)實(shí)驗(yàn)室中對微生物純化培養(yǎng)時,常用的接種方法有劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖,常用涂布器把稀釋的菌液均勻涂滿整個平板。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌,在該抗生素存在的范圍內(nèi),越不易生存,形成的透明圈就越大。但是,如果在透明圈中還有菌落生存,則說明這個菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(3)可知,在應(yīng)用時,要想殺死某致

27、病菌,就得選擇能使該致病菌大量死亡,即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。答案(1)劃線稀釋涂布平板(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A29(15分)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)化合物)在土壤中不易降解,長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤,可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)。(1)制備土壤浸出液時,為避免菌體濃度過高,需將浸出液進(jìn)行_處理。(2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌,從物理性質(zhì)、用途方面來看,上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是_。(3)在劃線培養(yǎng)時,只有很少菌落出現(xiàn)

28、,大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是_或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長。(4)在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中,無透明帶菌落利用的氮源主要是_,有透明帶菌落利用的氮源主要是_,據(jù)此可篩選出目的菌。(5)科研人員用放射線處理該細(xì)菌獲得兩個突變株A和B,然后對突變株A和B進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果如下表所示:接種的菌種一般培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果A不生長添加營養(yǎng)物質(zhì)甲,能生長B不生長添加營養(yǎng)物質(zhì)乙,能生長AB能生長不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙就能生長突變株A不能在一般培養(yǎng)基上生長的原因是_。突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是_。解析(1)制備土壤浸出液時,為避免菌體濃度過高,需將浸出液進(jìn)行稀釋處

29、理。(2)從物理性質(zhì)來看,題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基;從用途方面來看,該培養(yǎng)基是以含氮除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。(3)在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上,不能降解該除草劑的細(xì)菌(除具有固氮能力的細(xì)菌外)是不能生長的。(4)含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明,菌落周圍形成透明帶是由于該除草劑被某些細(xì)菌降解導(dǎo)致的。(5)突變株A的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)甲,突變株B的生長依賴于營養(yǎng)物質(zhì)乙。不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲和乙,二者混合培養(yǎng)時都能生長,最可能的原因是突變株A為突變株B提供了營養(yǎng)物質(zhì)乙,突變株B為突變株A提供了營養(yǎng)物質(zhì)甲。答案(1)稀釋(2)以該除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基(3)培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源(4)氮?dú)庠摮輨?5)突變株A缺乏合成營養(yǎng)物質(zhì)甲所需要的酶突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲,突變株B可以提供;突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙,突變株A可以提供- 11 -

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