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2019-2020學(xué)年高中生物 第四部分 淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù) 實(shí)驗(yàn)11 植物的組織培養(yǎng)學(xué)案 浙科版選修1

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1、實(shí)驗(yàn)11 植物的組織培養(yǎng) [學(xué)考報(bào)告] 知識(shí)內(nèi)容 考試屬性 考情解讀 植物的組織培養(yǎng) 加試 1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)。 2.嘗試植物激素的應(yīng)用。 3.說明植物組織培養(yǎng)的原理 一、植物組織培養(yǎng) 概念 組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織,如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等,在無菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上,給予一定的溫度和光照,使之產(chǎn)生愈傷組織,或進(jìn)而生根發(fā)芽。 原理 植物細(xì)胞具有全能性,即生物體的細(xì)胞,具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力。 基本過程 外植體愈傷組織胚狀體―→新植物體 培養(yǎng)條件 (1)含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境

2、、適合的pH、適時(shí)光照等。 (2) 二、菊花的組織培養(yǎng) 材料:MS培養(yǎng)基(用于配置發(fā)芽和生根的培養(yǎng)基);萘乙酸用少量0.1 mol/L NaOH溶液溶解;芐基腺嘌呤用少量0.1 mol/L HCl溶解;發(fā)芽培養(yǎng)基(滅菌);生根培養(yǎng)基(滅菌)。 步驟 (1)無菌幼苗進(jìn)行組織培養(yǎng) 取外植體 超凈臺(tái)上將無菌幼苗切段,每段至少1張葉片 生芽培養(yǎng) 生芽培養(yǎng)基中,放入1~3段切段,莖部插入培養(yǎng)基,蓋上封口膜,日光燈下保持18~25 ℃的溫度培養(yǎng),每天光照不少于14.5 h 生根培養(yǎng) 2~3周后,將叢狀苗在無菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng) 適應(yīng)鍛煉 (煉苗)

3、將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度,2~3天后打開降低濕度進(jìn)行鍛煉,直到將罩全部打開處于自然濕度下為止 定植 將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng) (2)自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行組織培養(yǎng) →→→→ 1.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度? 提示:不同植物、不同組織,植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,因此不可貿(mào)然使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度,要探索使用何種激素(合成激素)以及激素的濃度才行。 2.本實(shí)驗(yàn)用人工合成的激素,而不用植物中存在的天然激素,為什么? 提示:植物中存在的天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶,這樣,天然激素在植

4、物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間就較短,而人工合成的激素在植物中沒有相應(yīng)分解它的酶,所以作用和存在的時(shí)間長(zhǎng),作用效果明顯。 3.如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng),你認(rèn)為應(yīng)采取什么措施保證樣本不被污染? 提示:(1)操作環(huán)境潔凈;(2)植物樣本潔凈;(3)操作敏捷迅速。  植物組織培養(yǎng)的基本過程 條件:植物細(xì)胞必須在離體狀態(tài)下,在一定營(yíng)養(yǎng)和植物激素條件下才能表現(xiàn)出全能性。 脫分化:由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。 再分化:愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)又可以重新分化形成根或芽等器官的過程。 愈傷組織的特點(diǎn):細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化、無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。  根尖分生組

5、織和愈傷組織的異同: 組織 類型 細(xì)胞 來源 細(xì)胞 形態(tài) 細(xì)胞 結(jié)構(gòu) 細(xì)胞 排列 細(xì)胞 去向 根尖 分生 組織 受精卵 正方形 無液泡 緊密 分化成 多種細(xì) 胞組織 愈傷 組織 高度分 化細(xì)胞 無定形 高度液 泡化 疏松 再分化 成新個(gè)體 相同 點(diǎn)  都通過有絲分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖 1.下圖為植物組織培養(yǎng)的流程圖。據(jù)圖分析下列說法正確的是(  ) A.將配制好的培養(yǎng)基在滅菌后要及時(shí)分裝避免冷卻凝固 B.圖中三種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素含量方面 C.整個(gè)培養(yǎng)過程中需要適宜的溫度和不間斷的人工光照 D.長(zhǎng)出叢

6、芽和生根的過程中細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會(huì)發(fā)生改變 解析:選B。將配制好的培養(yǎng)基在滅菌前要及時(shí)分裝避免冷卻凝固,A錯(cuò)誤;圖中三種培養(yǎng)基的差異主要表現(xiàn)在植物激素的含量上,B正確;脫分化過程要避光處理,C錯(cuò)誤;長(zhǎng)出叢芽和生根的過程是細(xì)胞分裂和分化的過程,遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生改變,D錯(cuò)誤。 2.辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖。 (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的________和________過程。 (2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時(shí),有利于芽

7、的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采取的滅菌方法是________。 (3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是______。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí),常用的酶是________和纖維素酶。 解析:植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵過程包括脫分化和再分化,由形成的愈傷組織再分化成具根和芽的試管苗。在組織培養(yǎng)過程中,需要無菌無毒條件、一定的營(yíng)養(yǎng)條件、激素條件和適宜的環(huán)境條件等。生長(zhǎng)素含量低于細(xì)胞分裂素時(shí),愈傷組織先分化出芽,反之,則先分化出根。將愈傷組織分離成單個(gè)細(xì)胞時(shí)需要酶解植物細(xì)胞壁,植物細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠,故需用纖維素酶和果膠酶。制作植物組織培養(yǎng)等培養(yǎng)基時(shí),需向培養(yǎng)基中加入瓊脂進(jìn)行凝固,并

8、采用高壓蒸汽法進(jìn)行滅菌;對(duì)植物外植體進(jìn)行消毒,消毒所用的酒精體積分?jǐn)?shù)為70%。 答案:(1)脫分化 再分化 (2)瓊脂 低 高壓蒸汽滅菌 (3)70% 果膠酶  植物組織培養(yǎng)的條件 條件:無菌環(huán)境、一定的溫度、一定的光照、含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、適量空氣、適宜的pH、植物激素(細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素)比例合適、適宜的外植體。 激素使用的先后順序(表一)及其用量比例(表二)對(duì)細(xì)胞分裂和分化的影響 表一 使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先生長(zhǎng)素, 后細(xì)胞分裂素 有利于分裂但不分化 先細(xì)胞分裂 素,后生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 表二 生長(zhǎng)素與

9、細(xì)胞 分裂素比值 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 比值高時(shí) 促進(jìn)根分化,抑制芽形成 比值低時(shí) 促進(jìn)芽分化,抑制根形成 比值適中 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)  (1)整個(gè)操作過程中應(yīng)防止外植體帶菌、保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌、嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作流程。 (2)菊花的組織培養(yǎng),一般選擇未開花植株的莖上部新萌發(fā)的側(cè)枝。 (3)菊花的組織培養(yǎng),一般將溫度控制在18~25 ℃,pH控制在5.8左右,并且每日用日光照射14.5小時(shí)。 1.某同學(xué)在進(jìn)行組織培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)只分裂而不分化出芽和根,可能原因是(  ) A.未見陽光 B.培養(yǎng)時(shí)間不到 C.培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)過多 D.細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比不對(duì) 解析:

10、選D。愈傷組織產(chǎn)生根或芽,取決于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比值,當(dāng)細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值低時(shí),誘導(dǎo)根的分化;兩者比值處于中間水平,愈傷組織只生長(zhǎng)不分化;兩者比值高時(shí),誘導(dǎo)芽的形成。 2.試管苗的光合作用能力較弱,需要逐步適應(yīng)外界環(huán)境才能往大田移栽。研究人員進(jìn)行了“改變植物組織培養(yǎng)條件縮短試管苗適應(yīng)過程”的實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)在適宜溫度下進(jìn)行,圖甲和圖乙表示其中的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 請(qǐng)回答: (1)圖甲的實(shí)驗(yàn)是在大氣CO2濃度下進(jìn)行的。據(jù)圖分析,試管苗在不加蔗糖的培養(yǎng)基中________和________更高。 (2)圖乙是試管苗在密閉、無糖培養(yǎng)基條件下測(cè)得的24 h內(nèi)CO2濃度變化曲線。圖中b~

11、c段CO2濃度升高緩慢是因?yàn)開_____________________________________________________, c~d段CO2濃度急劇下降是因?yàn)樵嚬苊鏮_________________________________________ ________________________________________________________________________。 若d點(diǎn)時(shí)打開培養(yǎng)瓶,試管苗的光合速率________________________________________________________________________。

12、 (3)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果推知,采用無糖培養(yǎng)基、________和________可縮短試管苗的適應(yīng)過程。 解析:甲曲線上反映出的信息有兩方面:光合速率和光飽和點(diǎn),所以(1)應(yīng)該填寫光合速率和光飽和點(diǎn)。b~c段上升緩慢的原因是凌晨溫度較低,呼吸速率較慢所致;c~d段急劇下降是因?yàn)楣夂献饔孟拇罅緾O2所致,d點(diǎn)時(shí)大氣CO2比瓶?jī)?nèi)高,所以此時(shí)打開培養(yǎng)瓶有利于提高光合速率。 答案:(1)光合速率 光飽和點(diǎn) (2)溫度較低,細(xì)胞呼吸較弱,產(chǎn)生的CO2較少 隨光照的增強(qiáng),消耗CO2進(jìn)行光合作用 升高 (3)延長(zhǎng)光照時(shí)間 增加光照強(qiáng)度  植物組織培養(yǎng)過程中無菌操作要求 無菌操作的必要性

13、 培養(yǎng)材料一旦被微生物(如細(xì)菌)污染,因微生物分裂快、生長(zhǎng)迅速,會(huì)爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng),還會(huì)產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。 無菌操作 (1)培養(yǎng)材料消毒 ①消毒劑:一般用70%的酒精和5%的次氯酸鈉溶液。 ②既要考慮消毒效果也要考慮材料的耐受力。 (2)培養(yǎng)基、所用操作器材均應(yīng)進(jìn)行滅菌處理。培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌,操作器材可采取干熱滅菌。 (3)操作室、工作臺(tái)要進(jìn)行消毒,一般使用紫外線或消毒藥品消毒。 (4)接種操作應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行,接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng)。 (5)操作人員要消毒、戴口罩、穿工作服等,操作時(shí)禁止說話。 1.外植體接種前,需要將接種

14、室、接種箱滅菌和對(duì)外植體消毒,某同學(xué)依次進(jìn)行了如下操作: ①接種前一天,將接種室的四個(gè)角用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。 ②將接種室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌。 ③接種前,操作者用肥皂清洗雙手,擦干,再用酒精棉球擦拭雙手。 ④接種前1小時(shí),在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來蘇水;桌椅也用來蘇水擦拭;接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。 ⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。 你認(rèn)為合理的操作步驟依次是(  ) A.①④②③⑤ B.①②④③⑤ C.①④③②⑤ D.①②③④⑤ 解析:選A。在組織培養(yǎng)過程中,要進(jìn)行無菌操作,方法的選擇既要考慮消毒效果也要考慮材料的耐受力。無菌操作過程中,要選擇適當(dāng)?shù)南緶缇?/p>

15、方法,消毒順序是接種室→接種箱→操作者→外植體。 2.某植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的愈傷組織被真菌嚴(yán)重感染,為查找污染原因設(shè)計(jì)了4個(gè)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)條件除圖示以外其他均相同。下列各圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果,據(jù)圖可得出的初步結(jié)論是(  ) A.污染主要是由培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)短造成的 B.污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織 C.調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH能解決污染問題 D.調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度能解決污染問題 解析:選B。通過4個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出培養(yǎng)基滅菌時(shí)間、培養(yǎng)基pH、培養(yǎng)溫度對(duì)污染率沒有太大的影響,由離體組織滅菌時(shí)間越長(zhǎng)污染率越低可知,污染主要來源于組織培養(yǎng)所用的離體組織。 一、選擇題 目前,觀賞植物、園藝作物、

16、經(jīng)濟(jì)林木等無性繁殖作物等部分或大部分都用離體快速繁殖提供苗木,試管苗已出現(xiàn)在國(guó)際市場(chǎng)上并形成產(chǎn)業(yè)化。下列屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是(  ) A.將幼苗放入營(yíng)養(yǎng)液中培養(yǎng) B.將馬鈴薯塊莖種在土中培養(yǎng) C.將花藥放在培養(yǎng)基中培養(yǎng) D.將γ射線照射過的種子進(jìn)行播種培養(yǎng) 解析:選C。植物組織培養(yǎng)技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行的,利用的原理是植物細(xì)胞的全能性,自然狀態(tài)下的生殖與培養(yǎng)不是組織培養(yǎng)技術(shù)。 下列發(fā)生了細(xì)胞分化且能體現(xiàn)體細(xì)胞全能性的生物學(xué)過程是(  ) A.玉米種子萌發(fā)長(zhǎng)成新植株 B.小鼠骨髓造血干細(xì)胞形成各種血細(xì)胞 C.小麥花粉經(jīng)離體培養(yǎng)發(fā)育為單倍體植株 D.胡蘿卜根韌皮部細(xì)胞經(jīng)組

17、織培養(yǎng)發(fā)育成新植株 解析:選D。上述各過程均發(fā)生了細(xì)胞分化,玉米種子萌發(fā)長(zhǎng)成新植株、小鼠骨髓造血干細(xì)胞形成各種血細(xì)胞均未體現(xiàn)體細(xì)胞的全能性,小麥花粉經(jīng)離體培養(yǎng)發(fā)育為單倍體植株體現(xiàn)的是生殖細(xì)胞的全能性。 植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是(  ) A.給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件 B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因 C.脫離母體后,給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和外界條件 D.將成熟篩管的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi) 解析:選C。植物組織培養(yǎng)需要的條件有:離體(完整細(xì)胞)、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、無菌等其他的外界條件。 植物組織培養(yǎng)的過程是(  ) ①離體的植物器官、組織或細(xì)胞?、谟鷤M織 ③形成根、芽?、苊?/p>

18、分化?、菰俜只、拗参矬w A.①②③④⑤⑥ B.①④②⑤③⑥ C.①③④⑤②⑥ D.①④⑤②③⑥ 解析:選B。植物組織培養(yǎng)的過程是離體的植物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再分化形成根、芽,進(jìn)一步發(fā)育成植株。 在植物組織培養(yǎng)中,切取胡蘿卜的外植體時(shí)一般選擇(  ) A.具有木質(zhì)部的部分 B.具有韌皮部的部分 C.具有形成層的部分 D.具有髓的部分 解析:選C。在植物組織培養(yǎng)中,用具有分裂能力的細(xì)胞作為外植體容易成功。 影響植物組織培養(yǎng)的因素包括以下哪些(  ) A.培養(yǎng)植物 B.培養(yǎng)基組成部分 C.激素和環(huán)境因素 D.以上全部 解析:選D。不同的植物組織

19、培養(yǎng)的難易程度差別很大,同一種植物,幼嫩的材料容易培養(yǎng),植物激素的種類、濃度、使用先后順序、培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH、溫度、光照等條件對(duì)植物的組織培養(yǎng)都有影響。 菊花的花粉經(jīng)組織培養(yǎng)可發(fā)育成一株幼苗,這一過程不涉及下列哪一項(xiàng)(  ) A.有絲分裂、細(xì)胞分化、組織器官的形成 B.呼吸作用、光合作用、相關(guān)激素的調(diào)控 C.DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的生物合成 D.等位基因的分離、非等位基因的自由組合 解析:選D。等位基因的分離、非等位基因的自由組合發(fā)生在減數(shù)第一次分裂的過程中,菊花的花粉經(jīng)組織培養(yǎng)發(fā)育成幼苗的分裂方式中只進(jìn)行有絲分裂。 下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中滅菌操作的敘述,錯(cuò)誤的是( 

20、 ) A.外植體可以用酒精消毒 B.鑷子等器械需酒精滅菌 C.操作前操作者的手需酒精消毒 D.培養(yǎng)基需高壓蒸汽滅菌 解析:選B。植物組織培養(yǎng)需嚴(yán)格的無菌操作,包括:培養(yǎng)基需高壓蒸汽滅菌;操作者的手需酒精消毒;外植體應(yīng)浸泡在酒精中消毒;整個(gè)操作過程在酒精燈火焰旁進(jìn)行,同時(shí)對(duì)鑷子等器械灼燒滅菌。 用菊花的莖尖組織培養(yǎng)可培育出試管苗。下面關(guān)于這一過程的說法正確的是(  ) A.進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),一次性加足營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以防止污染 B.整個(gè)培養(yǎng)過程應(yīng)在光下進(jìn)行,有利于長(zhǎng)葉 C.要根據(jù)培養(yǎng)過程的實(shí)際情況,更換培養(yǎng)基 D.整個(gè)培養(yǎng)過程都應(yīng)在密閉條件下進(jìn)行,以免雜菌的污染 解析:選C。一般來說,從

21、接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織時(shí),由于培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分已接近耗盡,必須更換培養(yǎng)基。脫分化培養(yǎng)時(shí)不必見光,因?yàn)樵跓o光條件下愈傷組織長(zhǎng)得更快。再分化時(shí)可見光,試管苗應(yīng)該進(jìn)行見光培養(yǎng)。 植物組織培養(yǎng)過程中的再分化是指(  ) A.植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新的細(xì)胞 B.愈傷組織重新分化成根或芽等器官的過程 C.植物的器官、組織或細(xì)胞,通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程 D.取下植物的枝芽培育成一株植物的過程 解析:選B。再分化指脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官的過程。 下列關(guān)于愈傷組織的說法中不正確的是(  ) A.愈傷組織的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂 B.用

22、葉培養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞能夠進(jìn)行光合作用 C.培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)養(yǎng)料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質(zhì) 解析:選B。愈傷組織沒有發(fā)生分化,只是一團(tuán)薄壁細(xì)胞,因此不能進(jìn)行光合作用。 下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的說法中錯(cuò)誤的是(  ) A.植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)需要無機(jī)養(yǎng)料 B.植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)不需要有機(jī)養(yǎng)料 C.離體的植物組織細(xì)胞的脫分化和再分化主要受激素的影響 D.溫度、培養(yǎng)基的滲透壓等也影響植物組織培養(yǎng) 解析:選B。植物組織培養(yǎng)過程中,離體的植物組織和細(xì)胞,對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件要求相對(duì)特殊,除需要無機(jī)養(yǎng)料和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)外,還需要有機(jī)養(yǎng)料,如蔗糖等,并且需要一

23、定的外界條件。 在植物組織培養(yǎng)過程中,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列說法正確的是(  ) A.兩種激素用量的比例影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 B.兩種激素使用的先后順序影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 C.兩種激素使用時(shí)的濃度影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果 D.以上說法全部正確 解析:選D。生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí),有利于根的分化,抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化,抑制根的形成;比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)。先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既分裂也分化;同時(shí)使用兩種激素,分化頻率提高。 在菊花的組織培養(yǎng)操作完成了3~4天后,觀察同一溫室中

24、的外植體,發(fā)現(xiàn)有的瓶?jī)?nèi)外植體正常生長(zhǎng),有的瓶?jī)?nèi)外植體死亡,你認(rèn)為外植體死亡的原因不可能是(  ) A.培養(yǎng)條件,比如pH、溫度等不適宜 B.接種時(shí)外植體未消毒 C.接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體 D.將外植體倒插入培養(yǎng)基中 解析:選A。一般來講,進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)條件應(yīng)是相同的,但接種過程是否嚴(yán)格在無菌條件下進(jìn)行,外植體是否倒置等因素都會(huì)影響外植體的生長(zhǎng)。 美國(guó)科學(xué)家斯圖爾德應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù),將二倍體胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),最終發(fā)育成完整的新植株(如圖)。關(guān)于這一科學(xué)事實(shí),下列敘述中錯(cuò)誤的是(  ) ①該實(shí)驗(yàn)證明了植物細(xì)胞具有全能性 ②此種生殖產(chǎn)生

25、的后代有廣泛的變異 ③韌皮部細(xì)胞通過減數(shù)分裂增加數(shù)目 ④此種生殖產(chǎn)生的后代能保持親本的性狀 A.②    B.②③ C.②④ D.③④ 解析:選B。植物組織培養(yǎng)是一種無性生殖方式,能保持親本的性狀,不會(huì)產(chǎn)生廣泛的變異;該過程中細(xì)胞分裂方式是有絲分裂。 下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素,說法正確的是(  ) A.不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同 B.植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的關(guān)系是拮抗作用 C.植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用是互相獨(dú)立的 D.pH、溫度、光照條件等對(duì)植物組織培養(yǎng)也特別重要 解析:選D。在植物組織培養(yǎng)中,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

26、之間的關(guān)系是協(xié)同,溫度、光照條件及pH等對(duì)植物組織培養(yǎng)都有影響。 下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)中植物激素使用的說法中,不正確的是(  ) A.植物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素 B.先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素,有利于細(xì)胞分裂和分化 C.先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既分裂也分化 D.同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向 解析:選B。植物組織培養(yǎng)過程中,植物激素的使用順序和配比都會(huì)影響培養(yǎng)過程,先使用生長(zhǎng)素后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化。 將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,應(yīng)

27、出現(xiàn)的現(xiàn)象是(  ) 解析:選B。幼苗雖然沒根,但能產(chǎn)生一定的生長(zhǎng)素,能生根,故選B。 植物學(xué)家將胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞分離出來,將單個(gè)細(xì)胞放入特定培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得了許多完整的植株,最重要的原因是(  ) A.細(xì)胞分裂 B.細(xì)胞特化 C.細(xì)胞分化 D.細(xì)胞增殖 解析:選C。胡蘿卜韌皮部細(xì)胞屬于已分化的植物體細(xì)胞,利用韌皮部細(xì)胞通過組織培養(yǎng)的方法來獲得完整的植株,關(guān)鍵是誘導(dǎo)細(xì)胞的脫分化和進(jìn)行再分化。 關(guān)于植物組織培養(yǎng)的接種過程中應(yīng)注意的事項(xiàng)全部正確的是(  ) ①接種室要消毒 ②無菌操作 ③接種時(shí)可以談話 ④外植體如莖段、莖尖可隨機(jī)放入培養(yǎng)基 ⑤接種時(shí)要防止交叉污染 ⑥

28、接種完立刻蓋好瓶口 A.①②③④ B.①②③④⑤⑥ C.③④⑤⑥ D.①②⑤⑥ 解析:選D。在植物組織培養(yǎng)過程中,整個(gè)接種過程必須在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行,不能談話,防止呼吸產(chǎn)生的污染。接種的外植體放入培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意從下端插入,而且分布均勻,不能隨機(jī)放入,以保證必要的營(yíng)養(yǎng)面積和光照條件。 二、非選擇題 科學(xué)家將分離得到的成熟的胡蘿卜韌皮部細(xì)胞進(jìn)行如下處理,最終由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育成了完整的新植株。請(qǐng)回答下列問題: (1)科學(xué)家所用的這種生物技術(shù)叫做________。該項(xiàng)技術(shù)表明,當(dāng)植物細(xì)胞處于________狀態(tài)時(shí),在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、________和其他外界條件的作用下,可能表現(xiàn)

29、出全能性,發(fā)育成完整植株。 (2)圖中B過程稱為________,通過B過程產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞與根韌皮部細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不同,其根本原因是__________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以將單個(gè)的離體植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整的個(gè)體,這說明了離體的植物細(xì)胞可以在適宜條件下表現(xiàn)全能性;由離體植物細(xì)胞培養(yǎng)成愈傷組織時(shí),需先使細(xì)胞脫分化;細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)不同,是細(xì)

30、胞分化的結(jié)果,根本原因在于細(xì)胞中的基因執(zhí)行功能的區(qū)別,即基因的選擇性表達(dá)。 答案:(1)植物組織培養(yǎng) 離體 植物激素 (2)脫分化 基因的選擇性表達(dá) 為了探究6-BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6-BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表。 培養(yǎng)基 編號(hào) 濃度/mg·L-1 m/% n/個(gè) 6-BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0

31、.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 回答下列問題: (1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為________和________兩類。上述培養(yǎng)基中,6-BA屬于________類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。 (2)在該實(shí)驗(yàn)中,自變量是________,因變量是__________________________________ ________________________________________________________________________, 自變量的取值范圍是________。 (3)從實(shí)驗(yàn)

32、結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是________號(hào)培養(yǎng)基。 (4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6-BA”或“IAA”)。 解析:(1)根據(jù)植物的需求量,元素可以分為大量元素和微量元素,6-BA屬于細(xì)胞分裂素類的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。 (2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)結(jié)果中的數(shù)據(jù),可以看出IAA的濃度是自變量,菊花再生叢芽外植體的比率和外植體上的叢芽平均數(shù)是因變量;由圖表數(shù)據(jù)可以看出IAA的濃度范圍是0~0.5 mg·L-1。 (3)再生叢芽的外植體數(shù)乘以外植體上叢芽平均數(shù)即為叢芽總數(shù),所以最少的是1號(hào)培養(yǎng)基。 (4)誘導(dǎo)試管苗生根需要生長(zhǎng)素用量和細(xì)胞分裂素用量

33、的比值比較高,所以培養(yǎng)基中不需要加6-BA。 答案:(1)大量元素 微量元素 細(xì)胞分裂素 (2)IAA的濃度 菊花再生叢芽外植體的比率和外植體上的叢芽平均數(shù) 0~0.5 mg·L-1 (3)1 (4)6-BA 草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代,導(dǎo)致產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下: 外植體愈傷組織芽、根―→植株 請(qǐng)回答: (1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時(shí),一般選取________作為外植體,其依據(jù)是_________________________________________________________

34、_______________。 (2)在過程①中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和________,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加________,有利于外植體啟動(dòng)細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2~5 d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是________________________________________________________________________。 (3)在過程②中,愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_____________________________________________________

35、___________________ ________________________________________________________________________。 解析:(1)在培養(yǎng)無病毒植株時(shí)常選用根尖或莖尖為實(shí)驗(yàn)材料,這是由于根尖和莖尖細(xì)胞代謝旺盛,抗性強(qiáng),所含病毒少甚至不含有病毒。(2)在配制MS培養(yǎng)基時(shí),除加入大量元素、微量元素外,還需要加入有機(jī)物、蔗糖等。在配制好的MS培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素。在培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染的原因可能是外植體的消毒不徹底。(3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比會(huì)影響根的分化和芽的形成,當(dāng)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比

36、值低時(shí),有利于芽的分化,抑制根的形成。 答案:(1)莖尖(或根尖) 莖尖(或根尖)病毒極少,甚至無病毒 (2)有機(jī)物 植物激素 外植體消毒不徹底 (3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)用量與細(xì)胞分裂類物質(zhì)用量的比值偏低 回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題: (1)植物組織和細(xì)胞只有處于________狀態(tài)才能表達(dá)其全能性。 (2)組織培養(yǎng)中的細(xì)胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為________。 (3)在再分化階段所用的培養(yǎng)基中,含有植物激素X和植物激素Y,逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比,未分化細(xì)胞群的變化情況如下圖所示,據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系:

37、 ①當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時(shí),________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ②________________________________________________________________________。 ③_________________________________________________

38、_______________________。 (4)若植物激素Y是生長(zhǎng)素,在植物組織培養(yǎng)中其主要作用是________________________________________________________________________; 則植物激素X的名稱是________。 (5)生產(chǎn)上用試管苗保留植物的優(yōu)良性狀,其原因是_____________________________ ________________________________________________________________________。 解析:(1)植物組織和細(xì)胞要表達(dá)全能性必

39、須具備的條件之一是處于離體狀態(tài);(2)植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再分化,脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài),再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài);(3)仔細(xì)分析所給示意圖,可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時(shí),利于愈傷組織的形成,大于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出芽,小于1時(shí)利于細(xì)胞群分化出根;(4)生長(zhǎng)素在植物組織培養(yǎng)中主要作用是促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、分裂和分化,植物組織培養(yǎng)過程中除需要生長(zhǎng)素外還必需細(xì)胞分裂素,二者共同起作用;(5)植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術(shù),利于保持親本的優(yōu)良性狀。 答案:(1)離體 (2)脫分化 (3)①未分化細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織 ②當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于

40、1時(shí),未分化細(xì)胞群分化形成芽 ③當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時(shí),未分化細(xì)胞群分化形成根 (4)促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)(伸長(zhǎng))、分裂和分化 細(xì)胞分裂素 (5)組織培養(yǎng)形成試管苗的過程屬于無性生殖,后代不發(fā)生性狀分離 請(qǐng)回答下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的問題: (1)植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的________,繁殖種苗的速度________。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng),最終能夠形成完整的植株,說明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部________。 (2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí),需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行,其原因是避免________的污染。 (3)微型繁

41、殖過程中,適宜濃度的生長(zhǎng)素單獨(dú)使用可誘導(dǎo)試管苗________,而與________配比適宜時(shí)可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長(zhǎng),促使愈傷組織產(chǎn)生和生長(zhǎng),需要使用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是________(填“脫落酸”或“2,4-D”)。 (4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時(shí)間后,單株鮮重和光合作用強(qiáng)度的變化如圖。據(jù)圖分析,隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加,光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是________,單株鮮重的變化趨勢(shì)是________。據(jù)圖判斷,培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí),試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量________(填“能”或“不能”)滿足自身最佳生長(zhǎng)的需要。 (5)據(jù)圖推測(cè),若要在誘

42、導(dǎo)試管苗生根的過程中提高其光合作用能力,應(yīng)________(填“降低”或“增加”)培養(yǎng)基中蔗糖濃度,以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。 解析:(1)植物的組織培養(yǎng)屬于無性繁殖,可以保持親本的遺傳特性,而微型繁殖技術(shù)需要的材料少,有利于快速大量繁殖;葉肉細(xì)胞具有該植物的全套遺傳信息,在適宜條件下培養(yǎng),一個(gè)葉肉細(xì)胞即可發(fā)育成完整植株。(2)組織培養(yǎng)過程中應(yīng)避免微生物的污染,以防止造成組織塊的腐爛。(3)在微型繁殖過程中,單獨(dú)使用一定濃度的生長(zhǎng)素可以誘導(dǎo)生根,而與細(xì)胞分裂素以一定的配比混合使用時(shí)能促進(jìn)生芽。(4)分析圖解曲線可以看出,試管苗光合作用強(qiáng)度隨培養(yǎng)基蔗糖濃度的增加而逐漸減弱,單株鮮重先增加而后下降;圖解曲線顯示試管苗的單株鮮重在一定范圍內(nèi)隨培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加而增大,說明試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物不能滿足自身最佳生長(zhǎng)的需要。(5)圖解曲線顯示,試管苗的光合作用強(qiáng)度隨培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增大而減弱,因此適當(dāng)降低培養(yǎng)基中蔗糖濃度,可以增強(qiáng)光合作用強(qiáng)度,以提高其自養(yǎng)能力。 答案:(1)遺傳特性 快 遺傳信息 (2)微生物 (3)生根 細(xì)胞分裂素 2,4-D (4)逐漸減小 先增加后下降 不能 (5)降低 實(shí)驗(yàn)12 乳酸脫氫酶同工酶的分離(略) 實(shí)驗(yàn)13 DNA片段的PCR擴(kuò)增(略) 17

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