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2022年高三生物第一輪復(fù)習(xí) 6、遺傳和變異1-1-1實(shí)驗(yàn)十一 DNA的粗提取與鑒定教案 新人教版

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1、2022年高三生物第一輪復(fù)習(xí) 6、遺傳和變異1-1-1實(shí)驗(yàn)十一 DNA的粗提取與鑒定教案 新人教版教學(xué)目的1 初步掌握DNA粗提取和鑒定的方法。2 觀察提取出來的DNA物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)原理1 DNA在NaCl溶液中的溶解度是隨NaCl的濃度變化而改變的。DNA在014mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低,據(jù)此可使溶解于NaCl溶液中的DNA析出。2 DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中某些物質(zhì)可以溶于酒精溶液,據(jù)此可提取雜質(zhì)較少的DNA。3 DNA二苯胺藍(lán)色(用于DNA的鑒定)實(shí)驗(yàn)步驟1材料制備0.1G/ml檸檬酸鈉100ml 500ml燒杯玻璃棒攪拌1000r/min離心2min吸去上清液活雞血180

2、ml 即得雞血細(xì)胞液(也可將上述燒杯置于冰箱中,靜置一天使雞血細(xì)胞自行沉淀)2方法步驟 取血細(xì)胞液5-10ml20ml蒸餾水,玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌(1)提取血細(xì)胞核物質(zhì) 紗布過濾,濾液中含DNA和其他核物質(zhì),如蛋白質(zhì) 原理:血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜吸水脹破,玻璃棒快速攪拌機(jī)械加速血細(xì)胞破裂(2)溶解核內(nèi)DNA:濾液2mol/LNaCl溶液40ml,玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中緩緩加入蒸餾水,并輕輕地沿一個(gè)方向攪拌,出現(xiàn)絲狀物,當(dāng)絲狀物不再增加時(shí),停止加水(此時(shí)NaCl溶液相當(dāng)于稀釋到014mol/L)(4)濾取含DNA的粘稠物:用多層紗布過濾,含DNA的粘稠物留

3、在紗布上(5)DNA粘稠物再溶解: 20ml2mol/LNaCl溶液 50ml燒杯, 上述粘稠物 緩慢攪拌3 min(6)過濾含DNA的2mol/LNaCl溶液:用2層紗布過濾,濾液中含DNA(7)提取含雜質(zhì)較少的DNA:上述溶液95%酒精,緩慢攪拌,出現(xiàn)乳白色絲狀物,用玻璃棒將絲裝物卷起。(8)DNA鑒定:實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵: 本實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵是獲取較純凈的DNA,因此應(yīng)注意:1充分?jǐn)嚢桦u血細(xì)胞液。DNA存在于雞血細(xì)胞核中。將雞血細(xì)胞與蒸餾水混合以后,應(yīng)用玻璃棒沿一個(gè)方向快速攪拌,使血細(xì)胞加速破裂,并釋放出DNA2沉淀DNA必須用冷酒精。實(shí)驗(yàn)前必須準(zhǔn)備好大量95%的酒精,并在冰箱中(5以下)至少存放2

4、4小時(shí)。3正確攪拌含有懸浮物的溶液。在第(3)、(5)步驟,玻璃棒不要直插燒杯底部,且攪拌要輕緩,以便獲得較完整的DNA分子。在步驟(7),要將玻璃棒插入燒杯溶液中間,用手緩慢轉(zhuǎn)動5-10min?!就愵}庫】在“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中分別使用2molL、014molL、2molL、0015molL的氯化鈉溶液,其作用分別是(A)A溶解、析出、溶解、溶解 C溶解、溶解、析出、溶解B析出、溶解、析出、溶解 D溶解、析出、溶解、析出下列圖示中能反映DNA溶解度與NaCI溶液濃度之間關(guān)系的是(C)DNA在下列哪種濃度的NaCl溶液中溶解度最低(B)A200mol/L B014 mol/L C0

5、015 mol/L D010 mol/L在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品的濃度和名稱分別是(B)01 g/ml的檸檬酸鈉溶液 200mol/L的NaCl溶液 014 mol/L的NaCl溶液 體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液 0015 mol/L的NaCl溶液 004 mol/L的NaCl溶液A B C D與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的是(C)A操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度B在操作A時(shí),用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子完整C加蒸餾水可同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí),此時(shí)NaCl的濃度約為0.14mol/L

6、.(多選)下列有關(guān)“DNA粗提取”的操作中,正確的是(ABCD)A在雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水B在“析出DNA粘稠物”時(shí),要緩緩加入蒸餾水,直至溶液中粘稠物不再增多C在用酒精凝集DNA時(shí),要使用冷酒精D用玻璃棒攪拌時(shí)要沿一個(gè)方向“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中有三次過濾:(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液。(2)過濾含粘稠物的0.14mol/L NaCl .(3)過濾溶解有DNA的2mol/L NaCl.以上三次過濾分別為了獲得(A)A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的粘稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA粘稠物、紗布中DNAD含較純的DNA

7、濾液、紗布上粘稠物、含DNA的濾液為獲取較純凈的DNA,采集來的血樣可用蛋白酶處理,然后用有機(jī)溶劑除去蛋白質(zhì)。下列有關(guān)敘述,正確的是(D)A除去血漿中的蛋白質(zhì) B除去染色體上的蛋白質(zhì)C除去血細(xì)胞表面的蛋白質(zhì) D除去血細(xì)胞中所有的蛋白質(zhì)在“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中,和“使用蛋白酶從染色體中提取DNA”中的蛋白酶具有相似作用的物質(zhì)是(D)ANaCl溶液 B蒸餾水 C檸檬酸鈉 D冷卻的酒精DNA不溶于下列何種溶液(D)ANaCl溶液 BKCl溶液 CMgCl溶液 D酒精溶液下列不同濃度的NaCl溶液中,使DNA析出最徹底和溶解度最高的是(A)0.14mol/L 2mol/L 0.25mol/L

8、0.015 mol/LA和 B和 C和 D和下列操作中,對DNA的提取量影響較小的是(B)A使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質(zhì)B攪拌時(shí),要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動C在析出DNA粘稠物時(shí),要緩緩加入蒸餾水,直至溶液中粘稠物不再增多D在用酒精沉淀DNA時(shí),要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻E在DNA的溶解和再溶解時(shí),要充分?jǐn)嚢柙凇癉NA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中:(1)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水,第一次目的是 ,第二次目的是 。(2)說明不同濃度的NaCl溶液的作用:2mol/L NaCl的作用 ;0.14mol/L NaCl的作用 ;0.015 mol/L NaCl的作用 ;(3)

9、提純DNA的原理是 ,所用試劑為 。攪拌要 ,目的 。(4)能否用哺乳動物血液代替?簡述理由。 。 (1)使血細(xì)胞吸水破裂,溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA;降低NaCl溶液的濃度,降低DNA分子在NaCl溶液中的溶解度析出DNA分子(2)溶解含DNA的核物質(zhì);使含DNA的絲狀粘稠物析出DNA分子;進(jìn)行DNA鑒定(3)DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中某些鹽類蛋白質(zhì)可溶于酒精溶液;95%的冷卻酒精;輕緩、同方向;保持DNA分子的完整性(4)不能,成熟的哺乳動物紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核此實(shí)驗(yàn)中有幾次用玻璃棒攪拌,每次攪拌的方向是一致的;但每次攪拌的強(qiáng)度不同,請就此予以說明。(1)提取雞血細(xì)胞核內(nèi)物質(zhì)時(shí),應(yīng) 攪拌,目的是

10、 。(2)向含核物質(zhì)的2mol/L NaCl 溶液滴加蒸餾水析出DNA粘稠物時(shí),應(yīng) 攪拌,目的是 。(3)DNA粘稠物再溶解于2mol/L NaCl 溶液時(shí),應(yīng) 攪拌,目的是 。(4)用95%的冷卻酒精提取含雜質(zhì)較少的DNA時(shí),應(yīng) 攪拌,目的是 。(1)快速;加速血細(xì)胞破裂(2)輕緩;盡量保持DNA分子的完整性(3)輕緩;盡量保持DNA分子的完整性(4)輕緩;保持DNA分子的完整性以下是有關(guān)DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)的閱讀材料: a核酸極不穩(wěn)定,在較為劇烈的化學(xué)、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制備DNA時(shí)要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制劑檸檬酸鈉,以除去Mg,防止DNA酶的激活。b核酸中的D

11、NA和RNA在生物體內(nèi)均以核蛋白(由核酸和蛋白質(zhì)組成)的形式存在,DNA核蛋白在1 mol/L NaCl 溶液中溶解度很大,但在0.14mol/L NaCl 溶液中溶解度很低;而RNA核蛋白溶于0.14mol/L NaCl 溶液。c用苯酚處理,可使蛋白質(zhì)變性,且留在苯酚層內(nèi);在DNA溶液中加入25倍體積,濃度為95%的酒精,可將DNA分離出來。此時(shí)DNA十分粘稠,可用玻璃棒攪成團(tuán)取出。dDNA在強(qiáng)酸性環(huán)境下,水解產(chǎn)生脫氧核糖等小分子物質(zhì),它與二苯胺酸性溶液反應(yīng),能生成藍(lán)色化合物。e實(shí)驗(yàn)材料與器械:檸檬酸鈉溶液、石英砂、0.14mol/L NaCl 溶液、1 mol/L NaCl 溶液、苯酚、9

12、5%的酒精、二苯胺試劑、濃硫酸、花椰菜、研缽、燒杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉網(wǎng)、酒精燈、吸管、試管等。以下是DNA粗提取實(shí)驗(yàn)的步驟,請根據(jù)以上閱讀材料回答有關(guān)問題:(1)研磨:取10克花椰菜加適量的 、 和石英砂,研磨成勻漿。(2)過濾。(3)將濾液稀釋6倍,其目的是: 。(4)離心處理,產(chǎn)生沉淀。(5)取沉淀物,置于2毫升1 mol/L NaCl 溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2毫升苯酚充分震蕩后靜止,待其分層后棄其上層苯酚。這一步的目的是除去 。(6)如何將剩余溶液中的DNA提取出來? 。(7)如何證明提取物質(zhì)確實(shí)是DNA分子? 。其實(shí)驗(yàn)過程的要點(diǎn)是向放有DNA的試管中加入適量該試劑

13、,混合均勻后,將試管置于 中5min,待試管 后,觀察試管中的顏色變化。這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說明DNA耐 溫,前次溫度有利于 ,后次溫度則有利于DNA 。(1)檸檬酸鈉溶液、1 mol/L NaCl 溶液(3)使DNA核蛋白溶解度降低而析出(5)(DNA核蛋白中的)蛋白質(zhì)(6)向下層溶液中加25倍體積,濃度為95%的酒精,此時(shí)用玻璃棒攪動,玻璃棒上成團(tuán)的物質(zhì)即是DNA(7)用適量濃硫酸處理提取物,再滴加二苯胺酸性溶液數(shù)滴,如有藍(lán)色物質(zhì)出現(xiàn)即可證明提取物為DNA。沸水??;冷卻;高;加快染色反應(yīng)的速度;析出?!癉NA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中,A、B、C、D、E五個(gè)小組除下表中所列處理方法不同外,其他操作步驟均

14、相同,而且正確,但實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻不同。組別實(shí)驗(yàn)材料提取核物質(zhì)時(shí)加入的溶液去除雜質(zhì)時(shí)加入的溶液DNA鑒定時(shí)加入的試劑A雞血蒸餾水95的酒精(25C)二苯胺B菜花蒸餾水95的酒精(冷卻)雙縮脲 ,C人血漿蒸餾水95的酒精(冷卻)二苯胺D人血細(xì)胞2molL的氯化鈉014molL的氯化鈉雙縮脲E雞血蒸餾水95的酒精(冷卻)二苯胺(1)實(shí)驗(yàn)材料選擇錯(cuò)誤的組別是 。其原因是 。(2)實(shí)驗(yàn)步驟(不包括實(shí)驗(yàn)材料)均正確,但得不到DNA的組別是 。(3)沸水浴中試管顏色變藍(lán)的組別是 ;藍(lán)色較淡的是 ,其原因是 。(4)B組實(shí)驗(yàn)不成功的最主要原因是 。(1)C、D 人的血漿中沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,選

15、用這些材料得不到DNA或得到的DNA很少 (2)C (3)A、E A 冷卻的酒精對DNA的凝集效果較佳,該組使用的是25的酒精 (4)菜花細(xì)胞在蒸餾水中不能被破壞,得不到DNA(應(yīng)采用研磨的方法)在“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中,有同學(xué)按書本知識和自己的思路,試做了如下實(shí)驗(yàn),請你判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(1)他把與檸檬酸鈉混合的新鮮血液放在幾層紗布上過濾,紗布上最主要的結(jié)構(gòu)是 。(2)他在含有DNA、RNA及蛋白質(zhì)等的混合物中加入大量的物質(zhì)的量濃度為20mol/L的氯化鈉溶液后,通過攪拌后,放在幾層紗布上過濾,他得到的濾液中一定含有實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹行枰崛〉某煞质?。(3)他在上述濾液中加入冷酒精(體積分?jǐn)?shù)

16、為95),并用玻璃棒向個(gè)方向攪拌,溶液中的絲狀物的主要成分是 。(4)他把含有DNA、RNA、蛋白質(zhì)與氯化鈉的混合溶液稀釋成物質(zhì)的量濃度為014mol/L的氯化鈉溶液后,放在幾層紗布上過濾,他得到的濾液中含量最多的成分是 。血細(xì)胞 DNA DNA 水請利用如下實(shí)驗(yàn)材料做相關(guān)實(shí)驗(yàn),再選擇其中的一種實(shí)驗(yàn)材料,設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),以展示你的科學(xué)素養(yǎng)和創(chuàng)新才能。(1)如用上述材料做觀察植物細(xì)胞的有絲分裂、葉綠體中色素的提取和分離、觀察植物的向性運(yùn)動等實(shí)驗(yàn)。你選擇的最佳材料依次是(填圖中序號即可) 。(2)如用紫色洋蔥表皮做完細(xì)胞的質(zhì)壁分離及復(fù)原實(shí)驗(yàn)后,又用此裝片觀察細(xì)胞分裂,結(jié)果未觀察到處于分裂期的細(xì)胞。請

17、解釋原因 。(3)創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案實(shí)驗(yàn)課題:探究鎳為植物生活所必需的礦質(zhì)元素材料用具:完全營養(yǎng)液甲、缺鎳的完全營養(yǎng)液乙、適當(dāng)?shù)娜萜骱凸潭ú牧稀㈤L勢相似的玉米幼苗,含鎳的無機(jī)鹽。方法步驟: ; ; 。實(shí)驗(yàn)預(yù)期: 。為進(jìn)一步驗(yàn)證鎳元素一定是必需元素還應(yīng)增加的實(shí)驗(yàn)步驟及結(jié)果是: 。(1)(2)高度分化的細(xì)胞一般不能繼續(xù)分裂(3)取長勢相似的等量玉米幼苗,編為甲、乙兩組;甲組用營養(yǎng)液甲培養(yǎng),乙組用營養(yǎng)液乙培養(yǎng),其余條件均相同且適宜;定期觀察并記錄兩組幼苗的生長情況。 實(shí)驗(yàn)預(yù)期:若兩組長勢相似,則鎳不是玉米生活所必需的營養(yǎng)元素;若甲組生長正常,乙組生長不良,則鎳是玉米生活所必需的營養(yǎng)元素。 在乙組缺鎳的培養(yǎng)液中加入適量含鎳的無機(jī)鹽,若癥狀在不久后消失,則鎳一定是玉米生活所必需的營養(yǎng)元素。

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