(全國通用版)2022年高考生物一輪復習 選考部分 生物技術實踐 課時檢測(三十九)微生物的培養(yǎng)和利用
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1、(全國通用版)2022年高考生物一輪復習 選考部分 生物技術實踐 課時檢測(三十九)微生物的培養(yǎng)和利用 一、選擇題 1.下列有關微生物培養(yǎng)與應用的說法,正確的是( ) A.天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基 B.接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理 C.大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段 D.分離分解尿素的細菌時,尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源 解析:選C 天然培養(yǎng)基是指用天然物質制成的培養(yǎng)基,但也需要加工;實驗操作者的雙手應消毒,不能滅菌;分離分解尿素的細菌時,尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源,不是碳源,需加入不含
2、氮元素的有機物(如葡萄糖)作為碳源。 2.平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法,下列敘述正確的是( ) A.都要將菌液進行一系列的梯度稀釋 B.平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面 C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng) D.都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 解析:選D 平板劃線法不需要進行梯度稀釋,稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。 3.某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是(
3、) A.利用平板劃線法對細菌進行計數(shù) B.用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選 C.采用稀釋涂布平板法分離菌種 D.稱取和稀釋土壤樣品時應在火焰旁 解析:選A 分離細菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,但平板劃線法不能對細菌進行計數(shù);篩選能分解石油的細菌,要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源;篩選細菌的整個操作過程都需要在無菌條件下進行,所以應在火焰旁進行。 4.下列關于大腸桿菌的培養(yǎng)敘述錯誤的是( ) A.在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件 B.在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行消毒 C.若用稀釋涂布平板法計數(shù)大
4、腸桿菌活菌的個數(shù),要想使所得估計值更接近實際值,除應嚴格操作、多次重復外,還應保證待測樣品稀釋的稀釋度合適 D.使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄 解析:選B 培養(yǎng)過程中,除營養(yǎng)條件要滿足需要外,還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件是否適宜;滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物,所以,應對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌而不是消毒;使用稀釋涂布平板法時要保證樣品稀釋比例合適,這樣才會有更科學的數(shù)據(jù);有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素,并可能導致腸管出現(xiàn)嚴重癥狀,所以使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。 5.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進行抑菌
5、實驗,在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無菌濾紙片,d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結果如圖所示。以下判斷錯誤的是( ) A.a(chǎn)處抑菌效果小于b處 B.b處的濾紙片沒有瀝干 C.c處抗生素無效 D.d為對照 解析:選A 培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,說明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈并不小于b處;b處不是圓形的透明圈,可能是濾紙片沒有瀝干,抗生素流出濾紙片;c處無透明圈,說明c處抗生素對大腸桿菌無效;d為空白對照。 二、非選擇題 6.(2014·江蘇高考節(jié)選)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。
6、請回答下列問題: (1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是________________________________;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應該________________________________________________________________________。 (2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是 ________________________________________________________________________。 (3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是________
7、____。 (填序號) ①安全閥、放氣閥、壓力表 ②放氣閥、安全閥、壓力表 ③安全閥、放氣閥、溫度表 ④放氣閥、安全閥、溫度表 (4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是______________________________________。 解析:(1)實驗室常用的滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌),在實驗前應用牛皮紙或干凈的報紙包扎器皿。(2)酵母菌是真菌,對青霉素具有抵抗能力,青霉素主要抑制細菌、放線菌的生長。(3)圖中甲為安全閥,乙為放氣閥,丙為壓力表。(4)接種的平板上未見菌落生
8、長,說明接種不成功,原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻,使菌株因溫度過高而被殺死。 答案:(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌) 用牛皮紙(報紙)包扎器皿 (2)抑制細菌(放線菌)生長 (3)① (4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死 7.如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法,請回答相關問題: (1)圖甲是利用__________法進行微生物接種,圖乙是利用____________________法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________;對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。 (2)接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進
9、行? ________________________________________________________________________。 (3)接種后,在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)?________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,其接種方法是________(填“圖
10、甲”或“圖乙”)。 解析:圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法,這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無菌區(qū)域,因此接種常在火焰附近進行。在微生物培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生水,對微生物的生長造成影響,故需要倒置培養(yǎng)。 答案:(1)平板劃線 稀釋涂布平板 接種環(huán) 涂布器 灼燒滅菌 (2)火焰附近存在著無菌區(qū)域 (3)避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 (4)圖乙 8.(2018·江西贛中南五校聯(lián)考)如表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方,請根據(jù)表格和所學知識回答下列相關問題: 成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示劑
11、瓊脂 含量(g) 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0 將上述物質溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL (1)從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看,大腸桿菌屬于______________________________。 (2)若根據(jù)用途劃分,該培養(yǎng)基屬于________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來篩選出土壤中的尿素分解菌,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分必需怎樣更改?________________,并用________作為指示劑。 (3)在微生物培養(yǎng)的過程中,為防止雜菌污染,需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行________;操作者的雙手需要進行清洗和_______
12、_。 (4)圖1和圖2是培養(yǎng)某細菌的結果圖,其對應的接種方法分別是:____________和____________,這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個細胞繁殖所形成的________。圖1所用的接種方法可用來對活菌進行計數(shù)。此外,測定微生物數(shù)目的另一種方法是________________________________________________________________________。 (5)以下過程中所利用的主要微生物的細胞結構與大腸桿菌較相似的有________。 A.制作果酒 B.由果酒制作果醋 C.制作泡菜 D.制作腐乳 解析:(1)大腸
13、桿菌只能從環(huán)境中攝取有機物,不能自己合成有機物,屬于分解者。(2)該培養(yǎng)基中含有指示劑,屬于鑒別培養(yǎng)基。尿素分解菌可以分解尿素,而其他微生物不能,因此可將培養(yǎng)基中的蛋白胨改為尿素,用于篩選土壤中的尿素分解菌,并用酚紅作為指示劑。(3)培養(yǎng)微生物時,培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要滅菌,操作者雙手需要進行消毒。(4)圖1采用的是稀釋涂布平板法,圖2采用的是平板劃線法。單個微生物細胞繁殖所形成的細胞群叫菌落。(5)A、B、C、D中所利用的主要微生物是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉,醋酸菌、大腸桿菌和乳酸菌都是原核細胞,結構相似。 答案:(1)分解者 (2)鑒別 將蛋白胨改成尿素 酚紅 (3)滅菌 消毒 (4)稀
14、釋涂布平板法 平板劃線法 菌落 顯微鏡直接計數(shù)法 (5)BC 9.臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}: (1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用________________________________________________________________________ 法或________________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。 (2)取該單菌落適當稀釋,用______________法接種于固體培養(yǎng)基表面,在
15、37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。 (3)為了檢測該致病菌對抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A________;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B________;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明______________________________________________;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的________。 (4)根
16、據(jù)上述實驗結果,為達到抗菌目的,最好應選用抗生素________。 解析:(1)實驗室中對微生物純化培養(yǎng)時,常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖,常用稀釋涂布平板法。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌,在該抗生素存在的范圍內,越不易生存,形成的透明圈就越大。如果在透明圈中還有菌落生存,則說明這個菌落的細菌耐藥性很強。(4)通過(3)可知,在應用時,要想殺死某致病菌,就得選擇能使該致病菌大量死亡,即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。 答案:(1)平板劃線 稀釋涂布平板 (2)稀釋涂布平板 (3)敏感 不敏感 該致病菌對C的敏感性比對A的
17、弱 耐藥菌 (4)A 10.某市衛(wèi)生計生委發(fā)布的衛(wèi)生監(jiān)測信息顯示一些美容美發(fā)場所的毛巾、理發(fā)(美容)用具大腸桿菌嚴重超標。如圖甲為大腸桿菌含量檢測操作簡圖,圖乙為伊紅美藍培養(yǎng)基配方?;卮鹣铝邢嚓P問題: (1)圖甲中濾膜的孔徑應________(填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā),對某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌?________________。 (2)配制圖乙中的基礎培養(yǎng)基時,除了水分、無機鹽以外,還應加入________(一種營養(yǎng)成分),以及____________。待各成分都溶化后和分裝前,要進行的是____________和滅菌,對培養(yǎng)基進行滅菌的常用器具是______
18、________。倒平板時要待平板冷凝后,將平板倒置,其主要目的是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色,從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌,操作時,接種環(huán)通過灼燒滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線的目的是____
19、____________________________________________________________________。 要檢測樣液中的大腸桿菌含量,取25 cm2毛巾樣本,加5 mL蒸餾水,浸潤半小時,然后在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL樣液;在37 ℃的培養(yǎng)箱中放置48小時,3個平板上的黑色菌落數(shù)分別為49、48和47。據(jù)此可得出25 cm2毛巾樣液中的活菌數(shù)為________。 解析:(1)圖甲中濾膜的孔徑應小于大腸桿菌,濾膜過濾才能獲得大腸桿菌,對不耐高溫的試劑除菌時無法用高壓蒸汽滅菌法,可以用濾膜過濾達到除菌目的。(2)配制圖乙中的基礎培養(yǎng)基時,除了水分
20、、無機鹽以外,還應加入氮源以及瓊脂。配制的培養(yǎng)基在溶化后和分裝前需要先調整pH和滅菌,高壓蒸汽滅菌法常用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基等進行滅菌。倒平板后將平板倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。從功能上劃分,伊紅美藍培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)接種環(huán)灼燒滅菌后,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線,目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。在伊紅美藍培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈深紫色,據(jù)題意可知,25 cm2毛巾樣本中的活菌數(shù)為(49+48+47)÷3÷0.1×5=2.4×103。 答案:(1)小于 用濾膜過濾除菌 (2)氮源 瓊脂 調整pH 高壓蒸汽滅菌鍋 防止
21、培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染 鑒別 (3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 2.4×103 11.(2018·惠州模擬)日前微博傳言手機細菌比馬桶多。如圖,央視和北京衛(wèi)視通過實驗展示調查結果?;卮鹣铝邢嚓P問題: (1)該實驗需制備培養(yǎng)基,培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、________________等。 (2)據(jù)圖,兩電視臺均采用__________________法接種,該方法需要________(多選)。 A.接種環(huán) B.酒精燈 C.移液管 D.涂布器 E.無菌水 (3)通過觀察菌落的__________________,可知手機屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電
22、視臺實驗操作均正確且完全一致,但報道結果截然不同,你認為原因是: ________________________________________________________________________。 (4)按圖操作取樣面積,實驗員測定某手機屏幕的細菌數(shù)量,將10 mL菌懸液進行梯度稀釋,分別取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計菌落數(shù)分別為48、50、52,則該手機屏幕的細菌數(shù)為____________個/平方厘米。該實驗對照組該如何設置? _______________________________________________
23、_________________________。 解析:(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機鹽。(2)據(jù)圖分析可知,該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法,該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無菌水等。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同,圖示兩個電視臺調查的手機屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落,即存在多種微生物。兩電視臺實驗操作均正確且完全一致,但報道結果截然不同,可能是因為手機的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據(jù)提供的數(shù)據(jù)進行計算,某手機屏幕的細菌數(shù)=(48+50+52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)=2×104(個/平方厘米)。 答案:(1)氮源和無機鹽 (2)稀釋涂布平板 BCDE (3)形態(tài)、大小 手機的取樣和馬桶的取樣都不相同 (4)2×104 取培養(yǎng)基涂布0.1 mL無菌水進行培養(yǎng)
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