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2022年高考生物 復習考點四 DNA的粗提取與鑒定 新人教版選修1

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1、2022年高考生物 復習考點四 DNA的粗提取與鑒定 新人教版選修1 1. 基本原理 2. 操作過程 材料的選取:選用DNA含量相對較高的生物組織   去除雜質:利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的    不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質   DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,沸水     中加熱5 min,溶液變成藍色 易錯警示 (1)本實驗不能用哺乳動物成熟紅細胞作實驗材料,原因是哺乳動物成熟紅細胞無細胞核。可選用雞血細胞作材料。(2)實驗中兩次使用蒸餾水,第一次的目的是使成熟的雞血細胞漲破釋放出DNA,第二次的目的是稀釋NaC

2、l溶液,使DNA從溶液中析出。 2. 下圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題: (1)步驟一中,向雞血細胞液中加入____________并攪拌,可使雞血細胞破裂。 (2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的____________。 (3)步驟三、四的操作原理是________________________________________________ ________________________________________________________________________; 步驟四中,通過向溶液中加入____

3、________調節(jié)NaCl溶液的物質的量濃度至____________mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質。 (4)步驟七:向步驟六過濾后的____________中加入等體積的冷卻的____________,靜置2~3 min,溶液中會出現(xiàn)________色絲狀物,這就是粗提取的DNA。 (5)步驟七:DNA遇____________試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈______色。 答案 (1)蒸餾水 (2)濾液 (3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質 蒸餾水 0.14 (4)濾液 酒精 白 (5)二苯胺 藍 解析 破

4、碎紅細胞應用蒸餾水,使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出??赏ㄟ^加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精,遇二苯胺加熱呈藍色。 1. DNA與蛋白質在NaCl溶液中溶解度比較 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 溶解規(guī)律 DNA 溶解 析出 蛋白質 部分發(fā)生鹽析沉淀 溶解 NaCl溶液從2 mol/L降低過程中,溶解度逐漸增大 2. DNA粗提取與鑒定中

5、不同試劑的用途及原理比較 試劑 濃度 用途 原理(“△”為實驗的主要原理) NaCl溶液 2 mol/L 溶解DNA DNA在NaCl溶液中的溶解度隨溶液濃度的變化而改變,溶解度在2 mol/L時最大、在0.14 mol/L時最小 △ 0.14 mol/L 析出DNA 2 mol/L 鑒定時的溶劑 酒精 95%(體積分數(shù)) 除去雜質以提純DNA DNA不溶于酒精,但是細胞中的某些物質可以溶于酒精 △ 二苯胺 鑒定劑 DNA遇二苯胺(沸水浴)會變藍色 △ 檸檬酸鈉 0.03 g/mL 抗凝劑 除去血液中的鈣離子,防止血液凝固 3. DNA粗提取實驗材料和方法的選擇 (1)不同生物的組織中DNA含量不同 在選取材料時,應本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。 (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物組織:取材→研磨→過濾→沉淀。 ②雞血:制備雞血細胞液→提取核DNA→溶解細胞核內DNA→析出并濾取DNA→DNA再溶解→提取較純凈的DNA。

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