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南京林業(yè)大學 植物組織培養(yǎng) 實驗二

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植物組織培養(yǎng)實驗報告 121001233 周玥實驗二 : 外植體的消毒與接種 一、實驗目的 通過在超凈工作臺上進行無菌操作訓練,掌握外植體消毒和接種的無菌操作技術。二、實驗原理 用于進行組織培養(yǎng)的組織、器官和細胞稱為外植體。在組織培養(yǎng)中,外植體如果是帶菌的,在接種前都必須進行表面消毒,這是取得培養(yǎng)成功的最基本的和重要的前提; 植物細胞具有全能型,其外植體接種在無菌的人工培養(yǎng)基上,能長成完整的無菌植株。三、實驗材料 材料:金葉銀杏的胚、培養(yǎng)基 試劑:無菌水、70%酒精、升汞 儀器設備:超凈工作臺、鑷子、剪刀、燒杯、試管、高壓滅菌鍋、酒精燈、棉球四、實驗步驟1準備工作:打開超凈工作臺,用紫外燈燒2h,關閉紫外燈, 將滅菌溶液,無菌水,大燒杯等放入超凈工作臺,在臺上點燃2個酒精燈。外植體消毒:70%酒精浸泡10-30秒-無菌水清洗-0.1-1%升汞5min-無菌水沖洗2. 滅菌:先洗凈雙手,上工作臺后,用酒精棉球擦拭雙手, 然后擦拭工作臺面;再用酒精棉球擦拭接種工具,將鑷子和剪刀用酒精燈消毒。3.接種:鑷子消毒-從金葉銀杏中取出外植體放入培養(yǎng)皿-鑷子消毒-取出試管,揭開塑料蓋-鑷子消毒-取出培養(yǎng)皿中的外植體-斜插入培養(yǎng)基中-鑷子消毒-蓋上塑料紙,用皮筋綁緊放入試管架。接種時雙手不能離開工作臺,不能說話4用黑筆標上制作人姓名5接種完要清理干凈工作臺

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