微生物基礎(chǔ)知識與衛(wèi)生管理培訓(xùn),2019年8月3日星期六,1,藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范附錄中第二十條 凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設(shè)備維修工）應(yīng)當(dāng)定期培訓(xùn)，使無菌藥品的操作符合要求。培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎(chǔ)知識。未受培訓(xùn)的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產(chǎn)期間需進(jìn)入潔凈區(qū)時，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行特別詳細(xì)的指導(dǎo)和監(jiān)督。 第二十九條 所有人員都應(yīng)當(dāng)接受衛(wèi)生要求的培訓(xùn)，企業(yè)應(yīng)當(dāng)建立人員衛(wèi)生操作規(guī)程，最大限度地降低人員對藥品生產(chǎn)造成污染的風(fēng)險 第三十一條 企業(yè)應(yīng)當(dāng)對人員健康進(jìn)行管理，并建立健康檔案。直接接觸藥品的生產(chǎn)人員上崗前應(yīng)當(dāng)接受健康檢查，以后每年至少進(jìn)行一次健康檢查。 第三十二條 企業(yè)應(yīng)當(dāng)采取適當(dāng)措施，避免體表有傷口、患有傳染病或其他可能污染藥品疾病的人員從事直接接觸藥品的生產(chǎn)。 第三十五條 進(jìn)入潔凈生產(chǎn)區(qū)的人員不得化妝和佩帶飾物。 第三十六條 生產(chǎn)區(qū)、倉儲區(qū)應(yīng)當(dāng)禁止吸煙和飲食，禁止存放食品、飲料、香煙和個人用藥品等非生產(chǎn)用物品。,2019年8月3日星期六,2,微生物的定義,微生物:存在于自然界中的一群體型細(xì)小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見，必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物。 按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性可分為: 原核類:僅有原始核質(zhì)，無核仁或核膜，細(xì)胞器很不完善。如細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體 真核類:細(xì)胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細(xì)胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、 原生動物、藻類 非細(xì)胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒等 按其致病性可分為: 病原性微生物 非病原性微生物,2019年8月3日星期六,3,微生物分布廣泛 江河、湖海、土壤、空氣中都存在種類不一、數(shù)量不等的微生物，人體體表、體內(nèi)亦有多種微生物的存在 土壤中微生物最豐富，1克土壤中可有幾億到幾十億個 大多數(shù)微生物對人類是有益的，而且是必需的 自然界中N、C、S等多種元素要靠微生物的代謝活動來循環(huán) 固氮菌。農(nóng)業(yè)制造菌肥。工業(yè)用于食品發(fā)酵、皮革、石油化工、醫(yī)藥。 正常情況下，寄生在人體的微生物是無害的，有些尚具有拮抗病原微生物的作用，腸道正常菌群，大腸桿菌等提供人體必需的硫胺素、核黃素、氨基酸等。 沒有微生物，植物就不能新陳代謝，人類和動物也難以生存,2019年8月3日星期六,4,微生物學(xué)（microbiology)：研究微生物在一定條件下的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動和規(guī)律、進(jìn)化、分類以及與人類、動物、植物、自然界相互關(guān)系等問題的一門科學(xué) 微生物學(xué)的發(fā)展歷史 （一）經(jīng)驗時期 制酒（公元前兩千年前，制酒） 制醋 （二）實驗微生物學(xué)時期 列文虎克 顯微鏡 巴斯德 有機(jī)物發(fā)酵與腐敗與微生物 防酒發(fā)酵成醋-巴氏消毒,2019年8月3日星期六,5,微生物學(xué)的開山祖列文虎克 1674年荷蘭人列文虎克用自己 制造的能放大 200-300 倍的顯 微鏡觀察了污水、牙垢、腐敗有機(jī)物等， 發(fā)現(xiàn)了許許多多肉眼看不見的微小的生 物，為微生物的存在提供了有力的證據(jù)。,2019年8月3日星期六,6,微生物學(xué)的發(fā)展歷史,微生物學(xué)的奠基人巴斯德：從1862年起法國科學(xué)家巴斯德解決了葡萄酒變酸問題、發(fā)明了巴斯德滅菌法、醫(yī)治了蠶病、炭疽病和瘋狗病而成為偉大的微生物奠基人。 微生物方法學(xué)和醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的奠基人科赫：德國科學(xué)家科赫發(fā)現(xiàn)了炭疽桿菌、結(jié)核桿菌、霍亂弧菌、鼠疫桿菌，并第一次用科學(xué)的方法證明某種特定的微生物是某種特定疾病的病原。于1905年，獲得了諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎，主要是為了表彰他在肺結(jié)核研究方面的貢獻(xiàn)。,2019年8月3日星期六,7,微生物學(xué)的發(fā)展歷史,（三）現(xiàn)代微生物學(xué)時期 隨化學(xué)、物理學(xué)、生化、遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，以及電子顯微鏡、組織化學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)、免疫熒光、免疫酶、同位素標(biāo)記、分子雜交等新技術(shù)的應(yīng)用，微生物學(xué)得到極為迅速的發(fā)展 細(xì)菌細(xì)胞和病毒結(jié)構(gòu)的研究提高到亞超微結(jié)構(gòu)水平 分子遺傳學(xué) 使基因的DNA片段移植到細(xì)菌中去，通過質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)移到大腸桿菌，在大腸桿菌中表達(dá)，制備藥物 克隆技術(shù)的應(yīng)用,2019年8月3日星期六,8,自然界中的主要微生物,真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（濕疹） 細(xì)菌：肺炎球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌 支原體：肺炎支原體 衣原體：沙眼 立克次體：斑疹傷寒 螺旋體：梅毒 病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。,2019年8月3日星期六,9,常見污染微生物,1.葡萄球菌：可引起局部感染 2.大腸桿菌：膽道及尿道感染 3.綠膿桿菌：化膿性感染、中耳炎、肺炎 4.枯草桿菌：結(jié)膜炎 5.酵母菌：使糖分解，藥液產(chǎn)生有機(jī)酸 6.霉菌：使制劑霉壞、酸敗變質(zhì),2019年8月3日星期六,10,1、體積小，面積大,微生物的個體極其微小，必須借助顯微鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數(shù)萬倍才能看清。 桿菌的寬度是0.5微米，因此80個桿菌“肩并肩”地排列成橫隊，也只有一根頭發(fā)絲的寬度。桿菌的長度約2微米，故1500個桿菌頭尾銜接起來僅有一顆芝麻長。 物體的表面積和體積之比稱為比表面積。大腸桿菌的比表面積是人的30萬倍。 微生物的數(shù)量和種類是十分驚人的。一滴水，一顆土粒往往都是一個微生物“社會”。其中以土壤內(nèi)的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十億個微生物；貧瘠土壤每克也含有幾百萬到幾千萬個，一只骯臟的蒼蠅，全身能攜帶5億多個細(xì)菌，三對足能粘附700萬至1000萬個細(xì)菌，可見微生物的密集度之大。,2019年8月3日星期六,11,2、吸收多，轉(zhuǎn)化快,微生物的食譜非常廣泛，凡是動植物能利用的營養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動植物不能利用的物質(zhì)，甚至劇毒的物質(zhì)，微生物照樣可以視為美味佳肴。 如大腸桿菌在合適條件下，每小時可以消耗相當(dāng)于自身重量2000倍的糖，而人體則需要40年之久。,2019年8月3日星期六,12,3、生長旺，繁殖快,微生物以驚人的速度“生兒育女”。 例如大腸桿菌在合適的生長條件下，12.520分鐘便可繁殖一代，每小時可分裂3次，由1個變成8個。每晝夜可繁殖72代，由1個細(xì)菌變成重約4722噸，細(xì)菌數(shù)量的翻番只能維持幾個小時，不可能無限制地繁殖。因而在培養(yǎng)液中繁殖細(xì)菌，它們的數(shù)量一般僅能達(dá)到每毫升1-10億個，最多達(dá)到100億。中等大小的細(xì)菌，1000個疊加在一起只有句號那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐敗的牛奶中約有5千萬個細(xì)菌。,2019年8月3日星期六,13,4、適應(yīng)強(qiáng)，易變異,多數(shù)細(xì)菌能耐0196的低溫； 在海洋深處的某些硫細(xì)菌可在250300的高溫條件下正常生長； 一些嗜鹽細(xì)菌甚至能在飽和鹽水中正常生活； 產(chǎn)芽孢細(xì)菌和真菌孢子在干燥條件下能保藏幾十年、幾百年。 由于微生物繁殖快，也可在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量變異的后代。正是由于這個特性，人們才能夠按照自己的要求不斷改良在生產(chǎn)上應(yīng)用的微生物，如青霉素生產(chǎn)菌的發(fā)酵水平由每毫升20單位上升到近10萬單位，利用變異和育種得到如此大幅度的產(chǎn)量提高。,2019年8月3日星期六,14,5、分布廣，種類多,微生物在地球上幾乎無處不有，無孔不入，人的皮膚上，口腔，腸道里都有許多微生物。 微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各種微生物生長繁殖的大本營，約占微生物總量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一個微生物世界，不論數(shù)量或種類均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20億個微生物，即使是貧瘠的土壤，每克土中也含有35億個微生物。 空氣里懸浮著無數(shù)細(xì)小的塵埃和水滴，它們是微生物在空氣中的藏身之地。哪里的塵埃多，哪里的微生物就多。 迄今為止，我們知道的微生物約有10萬種，目前已知的種類只占地球上實際存在的微生物總數(shù)的20%，人類生產(chǎn)和生活中僅開發(fā)利用了已發(fā)現(xiàn)微生物種數(shù)的1%。,2019年8月3日星期六,15,微生物的特點(diǎn),個體小,面積大：小于0.1mm。肉眼不可見。 吸收多，轉(zhuǎn)化快：發(fā)酵乳糖的細(xì)菌在1小時內(nèi)可分解其自重100010000倍的乳糖；產(chǎn)朊假絲酵母合成蛋白質(zhì)的能力比食用公牛強(qiáng)10萬倍 生長旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代 適應(yīng)性強(qiáng)，易變異（耐藥性產(chǎn)生的原因） 分布廣,種類多（10萬多種） ：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等, 土壤中的數(shù)量最多。,2019年8月3日星期六,16,葡萄球菌,酵母菌（芽痕）,棒狀桿菌,大腸桿菌,弧狀菌,鏈球菌,2019年8月3日星期六,17,菌落單位,菌落單位-CFU 由單個菌細(xì)胞或幾個同種菌細(xì)胞在培養(yǎng)基上長成肉眼可見的菌落，每個菌落就是1CFU,2019年8月3日星期六,18,微生物的菌落形態(tài),2019年8月3日星期六,19,微生物的分布,土壤：是微生物生活的最適環(huán)境 水：僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場所 空氣：空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵，這類微生物大多數(shù)是腐生性的，還來源于人和動物，它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。,2019年8月3日星期六,20,人體中的微生物,人自出生后，外界的微生物就逐漸進(jìn)入人體。在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道）等部位，存在著對人體無害的微生物群，包括細(xì)菌、真菌、螺旋體、支原體等，稱為正常菌群。 能使宿主致病的為致病菌或病原菌，不能造成宿主感染的為非致病菌或非病原菌。有些細(xì)菌在正常情況下并不致病，但當(dāng)在某些條件改變的特殊情況下可以致病，這類菌稱為條件致病菌或機(jī)會致病菌,2019年8月3日星期六,21,人體內(nèi)外微生物,人的頭皮上有140萬個/cm2，兩手上約有440萬個，1g指甲污垢有38億個，1g糞便可達(dá)101000億個?？梢哉f微生物是無處不在，無處不有。,2019年8月3日星期六,22,人是最大的污染源？,人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個以上的含菌粒子，女性為750個以上。穿無菌服時，靜止時的發(fā)菌量為10300個/min，一般活動時發(fā)菌量為1501000個/min，行走時發(fā)菌量為9002500個/min?？人砸淮伟l(fā)菌量為70700個/min，噴嚏一次為400060000個/min。所以在潔凈室中，人的數(shù)量和活動應(yīng)有特別嚴(yán)格的限制。,2019年8月3日星期六,23,如何阻斷人體污染源,進(jìn)入潔凈室（區(qū)）的人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸產(chǎn)品。 無菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。,2019年8月3日星期六,24,人體中的微生物,部位 常見菌種 皮膚 表皮葡萄球菌、類白喉桿菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等 口腔 鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、 白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏 球菌、類白喉桿菌 胃 正常一般無菌 腸道 類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球 菌、 葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破 傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌等 鼻咽腔 甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈 球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等 眼結(jié)膜 皮表葡萄球菌、結(jié)膜干燥桿菌、類白喉桿菌等,2019年8月3日星期六,25,防范措施：,1.建立個人健康檔案 新員工入廠全面體檢，直接接觸藥品的生產(chǎn)人員每年至少體檢一次， 如發(fā)現(xiàn)有傳染疾病應(yīng)立即隔離。 2.清潔的個人衛(wèi)生 勤洗澡、理發(fā)、剪指甲 正確的洗手、更衣流程及防護(hù)方式 3.潔凈區(qū)內(nèi)的自我約束 不佩帶首飾，不化妝 進(jìn)出次數(shù)應(yīng)可能地少，在操作過程中應(yīng)減小動作幅度 規(guī)范各類操作及避免違規(guī)行為,2019年8月3日星期六,26,防范措施：,一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對 而言，腳底是最臟的部分。 脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。 一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微 生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。 二更 帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內(nèi)不能脫 下口罩。 帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整 的包裹頭發(fā)。 穿連體服：阻斷體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內(nèi)不能解開 連體服。 手消毒：再次消除手部的細(xì)菌和微生物。75%的酒精能殺滅 手部95%以上的微生物。,2019年8月3日星期六,27,設(shè)備的衛(wèi)生應(yīng)從設(shè)備的設(shè)計開始，要求產(chǎn)塵少、脫落粒 子少、易清洗、消毒和滅菌。設(shè)備與物料的接觸面不得與物 料反應(yīng)，不得吸附物料，設(shè)備的內(nèi)表面材質(zhì)要平整、光滑， 凹凸不平的區(qū)域不僅不易清洗，而且易存留殘液等，它將成 為微生物繁殖滋生的場所。管道的安裝要避免批與批之間的 交叉污染，管道要能定期清洗消毒。 防范措施： 建立相應(yīng)的設(shè)備清潔保養(yǎng)制度及規(guī)程 保持一貫的清潔狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)污漬、污水、殘余物等應(yīng)立即清除 機(jī)修人員在線維修設(shè)備時，應(yīng)注意操作盡量減少對藥品產(chǎn)生污染 對直接接觸藥品的設(shè)備進(jìn)行清潔驗證,設(shè)備與微生物,2019年8月3日星期六,28,物料與微生物,對于物料衛(wèi)生的問題，從供應(yīng)商的審計、物料進(jìn)廠后的檢 驗、使用全過程，均要嚴(yán)格按照GMP規(guī)定的衛(wèi)生要求進(jìn)行。 物料主要包括：原輔料、玻瓶、工藝用水。 防范措施： 正確的原輔料的脫包、消毒、運(yùn)送(容器)及投加操作。 正確的膠塞清洗流程。 對精洗殘余水、清洗水及工藝用水的定期監(jiān)測。 原輔料使用前的抽檢。,2019年8月3日星期六,29,操作方法與微生物,潔凈區(qū)人員的操作是否規(guī)范，影響藥品滅菌前的微生物 負(fù)荷，最終將影響產(chǎn)品的無菌保證值(SAL)。 F06D121+D121lgN0 F0 :標(biāo)準(zhǔn)滅菌時間; N0：產(chǎn)品滅菌前的帶菌量； D121：在121下殺滅90%微生物所需時間。 防范措施： 制定日常操作的規(guī)范并嚴(yán)格執(zhí)行。 直接與藥品有接觸的操作應(yīng)帶無菌手套并頻繁沖洗，操作過程中動作不宜過大。 加強(qiáng)對微生物知識的了解，增強(qiáng)無菌操作意識。,2019年8月3日星期六,30,環(huán)境與微生物,環(huán)境中的微生物種類繁多，主要有附著于塵埃上的從 地面飛起的球菌屬（包括八疊球菌屬在內(nèi)的好氧菌）；形 成孢子的好氧性桿菌（如枯草芽孢桿菌）；青霉等霉菌的 孢子等。微生物的存在嚴(yán)重影響著藥品生產(chǎn)的安全，依次 必須加以嚴(yán)格控制。,新版GMP對潔凈區(qū)微生物的動態(tài)要求,2019年8月3日星期六,31,防范措施：,1.合理的廠房布局及高效的空氣過濾系統(tǒng) 2.完善的潔凈區(qū)日常衛(wèi)生管理 3.每天進(jìn)行空氣消毒(臭氧、甲醛、過氧化氫熏蒸) 4.定期對潔凈環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測,2019年8月3日星期六,32,微生物的作用及危害,1. 微生物的作用 絕大多數(shù)微生物對人和動物是有益的，已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用。例如與我們?nèi)粘Ｉ蠲芮邢嚓P(guān)的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及動、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染病（感冒、傷寒、痢疾、結(jié)核、脊髄灰質(zhì)炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 從藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生學(xué)而言，微生物對藥品的原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格的重要因素。,2019年8月3日星期六,33,微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu),一、細(xì)菌 細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。 細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) （1） 球菌 多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。 （2） 桿菌 形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。 （3） 螺形菌 菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。 細(xì)菌雖小，仍具有一定的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核質(zhì)等各種細(xì)菌都有，是細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)。,2019年8月3日星期六,34,球菌(coccus),腦膜炎奈瑟菌,雙球菌(diplococcus),2019年8月3日星期六,35,鏈球菌(streptococcus),球菌(coccus),2019年8月3日星期六,36,球菌(coccus),葡萄球菌(streptococcus),2019年8月3日星期六,37,球菌(coccus),四聯(lián)球菌(tetrad),2019年8月3日星期六,38,球菌(coccus),八疊球菌(sarcina),2019年8月3日星期六,39,桿菌(bacillus),不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致。,2019年8月3日星期六,40,桿菌的形態(tài)多樣,桿菌(bacillus),2019年8月3日星期六,41,桿菌(bacillus),桿菌的形態(tài)多樣,分枝桿菌,雙歧桿菌,2019年8月3日星期六,42,螺形菌(spiral bacterium),2019年8月3日星期六,43,2、細(xì)菌的繁殖,細(xì)菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計算，細(xì)菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實上由于細(xì)菌繁殖中營養(yǎng)物質(zhì)的逐漸消耗，有害代謝產(chǎn)物的逐漸積累，細(xì)菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時間后，細(xì)菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。,2019年8月3日星期六,44,微生物的生長規(guī)律,微生物整個生長過程可以分為4個階段： 延滯期：細(xì)胞變大，細(xì)胞內(nèi)RNA含量增高，培養(yǎng)基不豐富 時延滯期較長。 對數(shù)期：細(xì)胞分裂最快，代謝旺盛，生長速率由營養(yǎng)成分決定。 穩(wěn)定期：總體數(shù)量保持不變，開始產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或開始形成芽孢。 衰亡期：由于代謝毒素的積累，死亡數(shù)超過新生數(shù)。,最易處理期,2019年8月3日星期六,45,細(xì)菌：是一類細(xì)胞細(xì)而短、直徑一般為0.55.0m，結(jié) 構(gòu)簡單、細(xì)胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物， 分布廣泛。生長最適溫度為3035，主要去除方法有紫外殺 菌法、濾膜過濾法及高溫殺滅法等。 個別細(xì)菌如：嗜熱脂肪芽孢桿菌，能在121條件，可耐受 45min。,滅菌柜驗證中作為生物指示劑 最適合生長條件為5560,2019年8月3日星期六,46,二、真菌,真菌是一類有細(xì)胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細(xì)胞，多數(shù)為多細(xì)胞，能進(jìn)行無性或有性繁殖的一類真核細(xì)胞型微生物。 真菌包括單細(xì)胞與多細(xì)胞兩類。單細(xì)胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細(xì)胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團(tuán)，稱絲狀菌或霉菌。 真菌生長的最適的溫度為2228，最適的pH值為46。其繁殖能力強(qiáng)，但生長速度比細(xì)菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對熱的抵抗力不強(qiáng)，一般加熱6070 1小時即被殺死，但對干燥、日光、紫外線和一些化學(xué)消毒劑有抵抗力，但對2.5碘酒、10甲醛則較敏感。,2019年8月3日星期六,47,三、病毒,病毒屬非細(xì)胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動物、植物、真菌和細(xì)菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結(jié)構(gòu)最簡單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質(zhì)。病毒必須在宿主活細(xì)胞內(nèi)寄生，依靠細(xì)胞提供的能量、營養(yǎng)物質(zhì)及生物大分子合成機(jī)制，完成病毒的復(fù)制過程。 病毒與人類的關(guān)系極為密切，人類的傳染病約75是由病毒引起的。有些病毒傳染性強(qiáng)，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。,2019年8月3日星期六,48,病毒豬流感病毒 豬流感(Swine influenza，SI)是由A型流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病。 H1N1亞型流感病毒 流感病毒屬于正黏病毒科。 A型流感病毒可以感染多種動物，包括許多禽類和哺乳動物。 禽流感病毒亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7 豬流感癥狀 人感染豬流感后的癥狀與感冒類似，患者會出現(xiàn)發(fā)燒、咳嗽、疲勞、食欲不振等。,豬流感病毒,病毒是最常見的致病微生物，人類傳染病中大約75%是由病毒引起的。乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒,2019年8月3日星期六,49,肝炎病毒,病毒性肝炎是危害人類健康的最嚴(yán)重的疾病之一。主要分為 甲型、乙型、丙型、丁型。其中甲型肝炎病毒由消化道傳 播，引起急性肝炎，不轉(zhuǎn)為慢性肝炎或慢性攜帶者。乙型與 丙型肝炎病毒均由輸血、血制品或注射器污染而傳播，除急 性肝炎外，可致慢性肝炎，并與肝硬化以及肝癌有關(guān)，故危 害性極為嚴(yán)重。丁型肝炎病毒必須在乙型肝炎病毒等輔助下 方能復(fù)制，故其傳播途徑與乙型肝炎病毒相同。,2019年8月3日星期六,50,1.甲型肝炎病毒（HAV）在體外抵抗力較強(qiáng)， 在-20條件下保存數(shù)年，其傳染性不變，能 耐受5630分鐘的溫度及PH3的酸度。 甲型肝炎病毒引起甲型肝炎，這種肝炎的 傳染源主要是病人。其病毒通常由病人糞便 排出體外，通過被污染的手、水、食物、食 具等傳染，嚴(yán)重時會引起甲型肝炎流行。如 1988年1月，上海市出現(xiàn)了較大規(guī)模的流行性 甲型肝炎，主要原因是人們食用了被甲肝病 毒污染的毛蚶。,甲型肝炎病毒圖,2019年8月3日星期六,51,乙型肝炎病毒,2.乙型肝炎病毒（HBV）HBV在體外抵 抗力很強(qiáng)，紫外線照射，加熱604 小時及一般濃度的化學(xué)消毒劑(如苯 酚，硫柳汞等)均不能使之滅活，在 干燥或冰凍環(huán)境下能生存數(shù)月到數(shù) 年，加熱60持續(xù)10小時，煮沸 (100)20分鐘，高壓蒸汽12210分 鐘或過氧乙酸(05%)7.5分鐘以上則 可以滅活。 傳播途徑主要為：血液、血制品傳 播，母嬰傳播。,2019年8月3日星期六,52,.肝炎病毒常用的家庭消毒方法 肝炎病毒常用的家庭消毒方法有物理消毒法與藥物消毒法兩種。 物理消毒法： 1）高壓蒸汽消毒法：通常采用98.066千帕壓力與121-126C溫度10- 15分鐘，可殺滅各型肝炎病毒；采用蒸籠蒸煮或家用高壓鍋，待冒氣蓋 閥后20分鐘，即可達(dá)到消毒效果 2）煮沸消毒法：在100C的溫度下煮1分鐘，就能使乙、丙、丁、戊 型及甲型肝炎病毒失去活力和傳染性；煮沸15-20分鐘以上，可將各型肝 炎病毒殺滅。 本法適合于食具、護(hù)理用具及棉織品的消毒。至于塑料制品、合成纖 維及皮毛制品則不適合。新潔爾滅、氯已定（洗必泰）不能肯定，度米 芬、來蘇、石炭酸、米醋、熏醋對乙型肝炎病毒無作用。此外，肝炎患 者的剩飯剩莫須有最好也要煮沸消毒后再棄去。 3）陽光曝灑法：凡不能蒸煮的物品，則宜采用本法，一般曝曬6小時 以上。 4）焚燒法：患者污染并丟棄的雜物、一次性醫(yī)護(hù)用品、垃圾（包括月 經(jīng)紙、手紙）等均應(yīng)焚燒掉，以達(dá)徹底消毒之目的。,2019年8月3日星期六,53,HIV,1.傳染源和傳播途徑 HIV感染者是傳染源，曾從血液、精液、陰道分泌液、 眼淚、乳汁等分離得HIV。 傳播途徑有： 性傳播：通過男性同性戀之間及異性間的性接觸感染。 血液傳播：通過輸血、血液制品或沒有消毒好的注射器傳 播，靜脈嗜毒者共用不經(jīng)消毒的注射器和針頭造成嚴(yán)重感 染，據(jù)我國云南邊境靜脈嗜毒者感染率達(dá)60%。 母嬰傳播：包括經(jīng)胎盤、產(chǎn)道和哺乳方式傳播。,2019年8月3日星期六,54,病毒 呼吸道病毒、腸道病毒、肝炎病毒 蟲媒病毒、皰疹病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒,HIV病毒,腺病毒,2019年8月3日星期六,55,熱原與內(nèi)毒素,許多細(xì)菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能產(chǎn)生熱原。熱原是微量即可引起恒溫動物體溫異常升高的物質(zhì)的總稱。主要物質(zhì)為細(xì)菌內(nèi)毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗體復(fù)合物、半抗體原物質(zhì)和某些藥物（類固醇）等。 1、細(xì)菌內(nèi)毒素一般指革蘭陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)成分，主要是脂多糖。 2、細(xì)菌內(nèi)毒素生物學(xué)活性可分為兩類：一是致病作用，一是保護(hù)性反應(yīng)。 3、其他理化特性耐熱性：120加熱4h，可破壞98%。180加熱2h或250加熱30min，才可徹底破壞。濾過性：其體積小，約在15nm之間，故能通過濾器進(jìn)入濾液中。具有水溶性及不揮發(fā)性。能被強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和氧化劑破壞,2019年8月3日星期六,56,熱原與內(nèi)毒素,4、熱原引入的途徑 從溶劑中帶進(jìn) 從原料中帶進(jìn) 從容器、用具、管道和裝置等帶進(jìn) 制備過程中的污染 從輸液器帶入,2019年8月3日星期六,57,內(nèi)毒素大量進(jìn)入血液就會引起發(fā)熱反應(yīng)“熱原反應(yīng)”。內(nèi)毒素大量進(jìn)入、集聚于血液中，超過機(jī)體各自衛(wèi)系統(tǒng)的清除能力，則可導(dǎo)致不同程度的內(nèi)毒素血癥。對于易于引入內(nèi)毒素的藥品醫(yī)療器械等必須通過內(nèi)毒素檢測。內(nèi)毒素的檢測常用家兔熱原法和鱟試驗法。中國藥典收錄的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法包括2種方法：凝膠法和光度法，使用鱟試劑來定性或定量檢測內(nèi)毒素。,2019年8月3日星期六,58,熱原與內(nèi)毒素,5、消除細(xì)菌內(nèi)毒素的方法 高溫破壞法：可用180干烤34h或250干烤30min。 吸附法：一般選用活性炭。 蒸餾法：此法僅限于制備蒸餾水。 化學(xué)酸堿和氧化法。 離子交換法。 反滲透法。 凝膠過濾法。 超濾法,2019年8月3日星期六,59,藥品的微生物污染,藥品微生物污染：微生物的產(chǎn)生、附著而給藥品及生產(chǎn)環(huán)境帶來不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。 污染藥品的細(xì)菌：常見污染藥物制劑的細(xì)菌是一些生命力較強(qiáng)的細(xì)菌，如：葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌，抵抗力弱的細(xì)菌一般不易造成污染。 藥品的微生物污染源：空氣、水、廠房與設(shè)備、藥品生產(chǎn)用原輔料、包裝材料、昆蟲和其它嚙齒動物、生產(chǎn)操作人員,2019年8月3日星期六,60,消毒與滅菌,下列術(shù)語常用于表示物理或化學(xué)方法對微生物的殺滅程度 消毒：殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細(xì)菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。 滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)菌芽孢在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。 抑菌：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細(xì)菌的繁殖。 防腐：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法，細(xì)菌一般不死亡。同一種化學(xué)藥品在高濃度時為消毒劑，低濃度時常為防腐劑。 無菌：不存在活的細(xì)菌。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)，為無菌操作。,2019年8月3日星期六,61,化學(xué)指示物 chemical indicator:利用某些化學(xué)物質(zhì)對某一殺菌因子的敏感性，使其發(fā)生顏色或形態(tài)改變, 以指示殺菌因子的強(qiáng)度(或濃度)和作用時間是否符合消毒或滅菌處理的要求 生物指示物 biological indicator:將適當(dāng)載體染以一定量的特定微生物, 用于指示消毒或滅菌效果的制品。,2019年8月3日星期六,62,消毒與滅菌的一般原理 作用于微生物的蛋白，破壞微生物的膜蛋白結(jié)構(gòu) 作用于微生物的核酸，不能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、復(fù)制及蛋白合成 干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝 同時作用于微生物蛋白和核酸,2019年8月3日星期六,63,芽胞,芽胞是細(xì)菌的休眠體，在適宜的條件下可以重新轉(zhuǎn)變成為營養(yǎng)態(tài)細(xì)胞； 一般的芽胞在普通的條件下可保存幾年至幾十年的生活力；世界上最古老的芽孢：2.5億年； 其對熱力、干燥、輻射、化學(xué)消毒等理化因素有強(qiáng)大的抵抗力； 殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。,2019年8月3日星期六,64,消毒與滅菌,一、物理滅菌方法 熱力滅菌法 輻射殺菌法 濾過除菌法 超聲波殺菌法 干燥與低溫抑菌法,2019年8月3日星期六,65,消毒與滅菌,熱力滅菌法：使蛋白質(zhì)、酶及核酸永久性破環(huán)，細(xì)胞膜溶解，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的死亡。 1、干熱滅菌法采用灼燒或干熱空氣滅菌 ，使用方便，適用于玻璃器皿和瓷器等耐高溫的固體物的滅菌 。 2、濕熱滅菌法利用熱蒸汽殺死微生物。 高壓蒸汽滅菌：利用高溫高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法 ，蒸汽的穿透力較熱空氣強(qiáng)可以殺死一切微生物，包括細(xì)菌的芽孢，真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個體 。最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。,2019年8月3日星期六,66,消毒與滅菌,輻射滅菌法 1、紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺 菌作用。穿透物質(zhì)的能力很差，一般要求紫外燈距離照射物不超過1.0米為宜 2、電離輻射 高速電子、X射線、射線 3、微波 波長1mm1m,2019年8月3日星期六,67,消毒與滅菌,濾過除菌法 用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的。 濾菌器含有微細(xì)小孔0.22微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過 。 適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。,2019年8月3日星期六,68,消毒與滅菌,二、化學(xué)滅菌方法 許多化學(xué)藥物能影響微生物的化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和生理活性，從而發(fā)揮防腐、消毒及滅菌的作用。 潔凈室(區(qū))應(yīng)定期消毒，使用的消毒劑不得對設(shè)備、物料和成品產(chǎn)生污染。消毒劑品種應(yīng)定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。,2019年8月3日星期六,69,甲醛、環(huán)氧乙烷及戊二醛化消毒劑發(fā)展的三個里程碑 一、 醇類 去除細(xì)菌胞膜中的脂類，并使菌體蛋白質(zhì)變性 乙醇、異丙醇 7075乙醇?xì)⒕ψ顝?qiáng)，高濃度乙醇?xì)⒕芰Ψ炊档?95-100%的乙醇具有很強(qiáng)的脫水作用, 能使菌體表面蛋白質(zhì)迅速凝固，當(dāng)遇到微生物細(xì)胞時, 細(xì)胞表面很快脫水形成一層保護(hù)膜,乙醇分子再不易滲透保護(hù)膜起到殺菌作用。對細(xì)菌芽胞無殺滅能力，對微生物消滅作用較差。其消毒滅菌作用受蛋白質(zhì)影響較大。異丙醇的殺菌作用比乙醇強(qiáng)，且揮發(fā)性低，但毒性較高。 二、酚類 低濃度時破壞菌細(xì)胞膜，使胞質(zhì)內(nèi)容物漏出；高濃度時使菌體蛋白質(zhì)凝固。也有抑制細(xì)菌脫氫酶、氧化酶等作用。 石炭酸、來蘇爾、洗必泰等,化學(xué)消毒滅菌法,2019年8月3日星期六,70,三、烷化劑 對細(xì)菌蛋白質(zhì)和核酸的烷化作用 （一）醛類 甲醛 通過對微生物蛋白質(zhì)分子上的氨基、羥基、巰基以及對核酸等的烷化作用, 破壞其生命的基本結(jié)構(gòu), 使之滅活。甲醛氣體的殺菌能力是與其濃度成正相關(guān)關(guān)系。由于甲醛氣體穿透力極差,不能穿透管壁進(jìn)入管腔, 只能通過擴(kuò)散作用進(jìn)入腔內(nèi)。在狹窄的管腔內(nèi)的甲醛氣體, 難以達(dá)到有效濃度。由于甲醛氣體穿透力差, 為保證器械和物品的消毒效果, 熏蒸消毒時物品應(yīng)攤開, 分層擺放或懸掛, 避免重疊擺放以及打包裝盒等, 確保物品表面充分接觸甲醛氣體, 以達(dá)到預(yù)期的消毒效果 戊二醛 殺菌機(jī)理主要是其活性基團(tuán)能與細(xì)菌蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合，使蛋白質(zhì)變性。戊二醛消毒液有廣譜、高效、快速和持久的殺菌效果, 隨溫度升高, 溶液的活性增強(qiáng), 對芽胞殺滅作用強(qiáng), 7 小時可殺滅芽胞。殺菌譜廣，效果好，性質(zhì)穩(wěn)定，殺菌速度快，使用濃度低，無毒性，比甲醛強(qiáng)2-10倍，在PH7.5-8.5時殺菌力最強(qiáng)，對人的刺激比甲醛小。 （二）環(huán)氧乙烷 廣譜高效殺菌劑 沸點(diǎn)較低，可用水浴使其揮發(fā)，不宜超過60度。但易燃易爆，有中等毒性，對人體有毒滅菌機(jī)理是由于它的烷基的取代性質(zhì)。對細(xì)菌、芽胞、真菌、微生物等各種微生物都有殺滅作用，消毒后殘留量較大，需置通風(fēng)處1時后才能使用。用于工業(yè)中一次性醫(yī)療器械用品的滅菌和皮毛工業(yè)的消毒。,2019年8月3日星期六,71,四、 氧化劑 與酶蛋白中的-SH基結(jié)合，導(dǎo)致酶活性喪失 （一）含氯消毒劑 能溶解于水產(chǎn)生次氯酸，并分解放出具有強(qiáng)氯化作用的新生態(tài)氯起殺菌作用。作用機(jī)理是由于氧化作用和抑制細(xì)菌的某些含巰基酶使細(xì)菌的生長繁殖發(fā)生障礙。有脫色能力，無毒性。不足之處是穿透力較差，同時有腐蝕和漂白作用。 殺菌力強(qiáng)，能殺滅細(xì)菌繁殖體、芽胞 漂白粉、金星消毒液、“84”消毒液、氯代異氰尿酸、二氧化氯 （二）含碘化合物 碘酊、碘伏 氧化細(xì)菌原漿蛋白的活性基團(tuán)，并與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合而使其變性 主要缺點(diǎn)是有機(jī)物干擾大,2019年8月3日星期六,72,（三）過氧化物類消毒劑 過氧乙酸、過氧化氫 在水中可形成氧化能力很強(qiáng)的自由羥基，破壞蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 殺菌作用強(qiáng)，應(yīng)用廣泛，但穩(wěn)定性差 （四）高錳酸鉀 強(qiáng)氧化劑 1:1000與1:1250的濃度都具有殺菌作用。0.5-1%的高錳酸鉀水溶液于分鐘內(nèi)可殺死大多數(shù)細(xì)菌；水溶液于小時內(nèi)可殺死細(xì)菌芽孢。在酸性溶液中殺菌作用增高。對霉菌殺傷效果很差。 （五）臭氧 強(qiáng)氧化劑，不穩(wěn)定； 殺菌迅速，無殘留 用于空氣、飲用水、生活用水等的消毒,2019年8月3日星期六,73,五、表面活性劑 減低液體的表面張力，使物品表面油脂乳化易于除去，有清潔作用 能吸附于細(xì)菌表面，改變胞壁通透性，使菌體內(nèi)的酶、輔酶、代謝中間產(chǎn)物逸出，呈現(xiàn)殺菌作用 表面活性劑有陽離子型、陰離子型和非離子型三類。因細(xì)菌帶陰電，故陽離子型殺菌作用較強(qiáng)。非離子型對細(xì)菌無毒性，有些反而有利于細(xì)菌的生長。 新潔爾滅 可殺死細(xì)菌繁殖體，但對結(jié)核桿菌與真菌的效果不好 S/D法（有機(jī)溶劑/表面活性劑法） 六、重金屬鹽類 與帶陰電荷的菌體蛋白質(zhì)結(jié)合，使之發(fā)生變性或沉淀 硫柳汞、二氯化汞（升汞）,2019年8月3日星期六,74,消毒與滅菌 常用消毒劑種類和用途,2019年8月3日星期六,75,常用化學(xué)殺菌劑應(yīng)用范圍和常用濃度表,2019年8月3日星期六,76,消毒滅菌的效果受環(huán)境、微生物種類及消毒劑本身等多種因素的影響 消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時間 微生物的種類與數(shù)量 溫度 酸堿度 有機(jī)物,影響消毒滅菌效果的因素,2019年8月3日星期六,77,衛(wèi)生管理,1.了解污染源 對藥品生產(chǎn)全過程可能造成污染的來源，進(jìn)行深入的了解研究，從而設(shè)計一個完好的生產(chǎn)工藝，制定規(guī)章制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，從各個環(huán)節(jié)采取消毒和衛(wèi)生措施來防止微生物污染，使產(chǎn)品達(dá)到所要求的衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量，包括穩(wěn)定性及各種微生物參數(shù)。 2.進(jìn)行微生物監(jiān)測 在藥品生產(chǎn)過程中，應(yīng)按GMP要求不斷進(jìn)行各項微生物衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測。例如：對潔凈室空氣中的浮游菌、沉降菌的監(jiān)測；對無菌設(shè)備清潔滅菌的驗證；對非無菌藥品進(jìn)行細(xì)菌和活菌數(shù)測定和病原菌的限制性檢查等。,2019年8月3日星期六,78,衛(wèi)生管理,3.定期進(jìn)行環(huán)境衛(wèi)生清潔 嚴(yán)格按照“管理規(guī)程、衛(wèi)生管理規(guī)定”對生產(chǎn)科各個區(qū)域進(jìn)行清潔衛(wèi)生，確保生產(chǎn)區(qū)域符合GMP衛(wèi)生管理要求。 4.做好生產(chǎn)人員衛(wèi)生管理 新進(jìn)人員的健康檢查：藥品生產(chǎn)企業(yè)在招收新職工時，一定要對新職工進(jìn)行全面的健康檢查，要確保新員工不患有急性或慢性傳染病。 建立生產(chǎn)人員健康檔案：藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)對職工建立個人健康檔案，直接接觸藥品的生產(chǎn)人員至少每年體檢一次；患有傳染病或體表有傷口者不得進(jìn)入潔凈室。 培養(yǎng)藥品生產(chǎn)人員良好的個人衛(wèi)生習(xí)慣 潔凈區(qū)生產(chǎn)人員要求：進(jìn)入潔凈室必須更換潔凈服；并按照規(guī)定程序進(jìn)出潔凈室；在潔凈區(qū)生產(chǎn)操作動作要準(zhǔn)、穩(wěn)、輕、少，減少不必要的談話和活動；生產(chǎn)人員應(yīng)定期進(jìn)行微生物基礎(chǔ)知識培訓(xùn)和衛(wèi)生教育。,2019年8月3日星期六,79,關(guān)于污染的基本知識 1藥品常見的污染形式 塵粒污染 藥廠中可能存在的一些微粒。 微生物污染 2藥廠傳播污染的主要媒介 空氣； 清洗用水； 物料及其包裝容器表面； 人：人是最常見的污染源 人的頭發(fā)和皮膚咳嗽或噴嚏排出物衣服 化妝品和手飾生產(chǎn)過程中人群混雜所帶來的微生物。,2019年8月3日星期六,80,環(huán)境衛(wèi)生 （1）外環(huán)境（潔凈廠房外部環(huán)境） 總體布局合理，生產(chǎn)、生活、行政、輔助系統(tǒng)分區(qū)，不得相互妨礙； 規(guī)劃考慮風(fēng)向，嚴(yán)重空氣污染源應(yīng)處于主導(dǎo)風(fēng)向的下風(fēng)側(cè)，減少交叉污染； 廠區(qū)內(nèi)人流、物流道路分開； 生產(chǎn)區(qū)內(nèi)及周圍無露土地面，廠區(qū)內(nèi)道路硬化； 潔凈廠房離主干道距離大于50米； （2）內(nèi)環(huán)境（潔凈廠房） 按生產(chǎn)工藝流程及所要求的空氣潔凈級別合理布局 潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面平整光滑、無裂縫、接口嚴(yán)密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形，弧度應(yīng)50mm，以減少灰塵積聚和便于清潔 潔凈室(區(qū))的窗戶、天棚及進(jìn)入室內(nèi)的管道、風(fēng)口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應(yīng)密封 門窗造型簡單、不易積塵、清潔方便、與內(nèi)墻面平，無窗臺，無外走廊潔凈室的外窗采用雙層玻璃窗。,2019年8月3日星期六,81,2 設(shè)備衛(wèi)生 設(shè)備、容器、工具按定置管理要求放置，不得隨意亂放，保持清潔 。管道、管線排列整齊，并包扎光潔，無跑、冒、滴、漏。潔凈區(qū)設(shè)備容器采用相應(yīng)的消毒措施后才可使用。 各部門應(yīng)根據(jù)本部門的實際情況，制定該部門所使用的設(shè)備、容器、生產(chǎn)工具、照明器具、搬運(yùn)工具的清潔、保養(yǎng)方法。操作人員必須按相關(guān)SOP要求，對這些器具清洗至符合標(biāo)準(zhǔn)，作好記錄后，才能使用。 更換產(chǎn)品或換批時，應(yīng)嚴(yán)格清場，設(shè)備、工用具、容器應(yīng)徹底清洗干凈。,2019年8月3日星期六,82,3人員衛(wèi)生 手的衛(wèi)生 指甲修剪，手上無傷口； 不戴手表、戒指和其他飾物，不用指甲油； 生產(chǎn)操作前、后，接觸污物后，要洗手消毒。 不得裸手直接接觸藥品 頭部、面部、體表衛(wèi)生 經(jīng)常洗澡、理發(fā)、勤換衣服，保持個人清潔，戴帽不露頭發(fā)，戴口罩不露鼻、口。 不蓄胡須，不化妝，不佩戴項鏈、耳環(huán)等飾品，眼鏡應(yīng)消毒。,2019年8月3日星期六,83,（3）健康要求 患有傳染病、隱性傳染病、精神病患者、皮膚?。ㄈ缙ぐ_、灰指甲等）、體表有傷口者及藥物過敏者，不得從事藥品生產(chǎn)工作。 生產(chǎn)人員至少每年體檢一次并建立健康檔案。 （4）人員行為要求 進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)域需穿戴規(guī)定的工作服（包括工作衣、帽、鞋），按規(guī)定的程序進(jìn)入。工作服不得穿出本區(qū)域以外的地方。 進(jìn)入一般生產(chǎn)區(qū)的人員在生產(chǎn)場所不得吸煙，不得吃食物，不得存放非生產(chǎn)物料與私人雜物。工作服按規(guī)程要求洗滌，必要時增加洗滌次數(shù)。 潔凈區(qū)工作服應(yīng)按要求換洗，經(jīng)常保持清潔干凈。 生產(chǎn)車間操作人員的動作要穩(wěn)、輕、準(zhǔn)，減少不必要的談話和走動 生產(chǎn)人員應(yīng)定期接受生產(chǎn)車間進(jìn)行的藥品生產(chǎn)的衛(wèi)生教育，自覺強(qiáng)化生產(chǎn)藥品必備的衛(wèi)生知識。,2019年8月3日星期六,84,潔凈室（區(qū)）物料衛(wèi)生要求： 進(jìn)入生產(chǎn)的原輔料必須符合標(biāo)準(zhǔn)，不洗即用的內(nèi)包裝材料、容器，其生產(chǎn)環(huán)境的空氣潔凈級別必須與藥品生產(chǎn)相一致。對可以重復(fù)使用的盛裝容器，應(yīng)按SOP要求清洗干凈。 直接與藥品（中間產(chǎn)品）接觸的設(shè)備、工具、容器、內(nèi)包裝容器最后一次沖洗用水應(yīng)與生產(chǎn)用水一致。 物料凈化用室包括物料清潔室、消毒室、氣閘室或傳遞柜（窗）、備料室、（棄廢）物料出口的專用傳遞設(shè)施等。 物料應(yīng)經(jīng)凈化或消毒滅菌后通過物流通道進(jìn)入。 物流通道不能作為通路 生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢棄物出口不能與物料進(jìn)口合用同一氣閘或傳遞柜（窗），宜單獨(dú)設(shè)置專用傳遞設(shè)施。,2019年8月3日星期六,85,清潔規(guī)程 清潔規(guī)程內(nèi)容 1清潔范圍、對象； 2清潔方法和程序； 3清潔工具； 4清潔頻次； 5使用的清潔劑、消毒劑配制方法及使用注意事項； 6清潔劑更換周期； 7清潔工具的清潔方法和存放地點(diǎn)； 8清潔衛(wèi)生檢查及評價。 制定范圍 1設(shè)備； 2器具、容器（包括運(yùn)輸工具）； 3生產(chǎn)區(qū)內(nèi)的運(yùn)輸工具； 4墻面、天花板、地面、臺面、門窗； 5管道；風(fēng)道、過濾器； 6下水道、地漏； 7衛(wèi)生間； 8水系統(tǒng)； 9工作服。,2019年8月3日星期六,86, 清潔劑與消毒劑 1要求： 對設(shè)備、容器、物料及產(chǎn)品不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，不污染； 安全、無毒；無腐蝕性； 不帶有顆粒性物質(zhì)（洗衣粉就有顆粒性物質(zhì)，不宜選用）； 2常用的消毒劑及用途：,2019年8月3日星期六,87,清潔工具 生產(chǎn)用清潔用具管理規(guī)定 1要求： 不易脫落纖維和顆粒； 不同區(qū)域的清潔工具有明顯區(qū)別，不混用； 不選用易滋生微生物的材料，如：木、棉； 使用后及時清洗。 2潔凈區(qū)內(nèi)清潔用抹布有紅、藍(lán)、黃、白四種顏色，紅色用于抹設(shè)備及工器具表面，藍(lán)色用于抹墻壁，黃色用于抹地面，白色用于抹設(shè)備內(nèi)壁及容器（如物料周轉(zhuǎn)桶）內(nèi)表面。 3存放 存放間按不同區(qū)域設(shè)置，規(guī)定位置存放； 存放間應(yīng)通風(fēng)； 不同潔凈級別的清潔工具不能存放在一起。,2019年8月3日星期六,88,清場管理規(guī)定 1 清場的定義：清場是指同一崗位上，本批生產(chǎn)結(jié)束后所進(jìn)行的一系列有關(guān)設(shè)備、容器公用器具、操作間的清潔及物料、生產(chǎn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的清理活動。 2 清場實施的條件：每批產(chǎn)品生產(chǎn)結(jié)束后；更換產(chǎn)品品種、規(guī)格、批號時；生產(chǎn)中發(fā)生意外污染，經(jīng)QA確認(rèn)需要進(jìn)行清場時 3 清場的內(nèi)容：清除生產(chǎn)場所的剩余物料、中間產(chǎn)品；清除生產(chǎn)場所的容器及工用器具；技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的清理；設(shè)備、管道的清潔；生產(chǎn)環(huán)境的清潔。 4 清場實施的程序： 物料的清除容器及工用器具的清潔技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)的清理設(shè)備、管道的清潔生產(chǎn)環(huán)境的清潔 5 清場有效期。,2019年8月3日星期六,89,狀態(tài)標(biāo)志管理規(guī)定 1狀態(tài)標(biāo)志分為六類：物料狀態(tài)標(biāo)志、設(shè)備狀態(tài)標(biāo)志、管道狀態(tài)標(biāo)志、容器狀態(tài)標(biāo)志、生產(chǎn)操作間狀態(tài)標(biāo)志、計量器具狀態(tài)標(biāo)志。 2物料狀態(tài)標(biāo)志： 物料狀態(tài)卡：標(biāo)明品名、規(guī)格、批號、數(shù)量、質(zhì)量、操作人、生產(chǎn)日期。 質(zhì)量：分為合格、不合格、待檢三種。分別用綠、紅、黃牌表示 3設(shè)備狀態(tài)標(biāo)志： 已清潔：表示設(shè)備處于清潔完好等待使用狀態(tài)， 運(yùn)行：表示設(shè)備正處于開啟運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。 檢修：表示設(shè)備處于等待檢修或正在檢修狀態(tài)。 待清洗：表示已清洗過效期或設(shè)備使用檢修后清潔之前所處的狀態(tài)。 清洗：表示設(shè)備處于正在清潔狀態(tài)。,2019年8月3日星期六,90,4.管道狀態(tài)標(biāo)志：與設(shè)備連接的主要固定管道及生產(chǎn)區(qū)內(nèi)主要管道由設(shè)備部標(biāo)明管內(nèi)介質(zhì)名稱、流向，主要固定管道按以下規(guī)定作色標(biāo)： 粉紅色表示“蒸汽”；綠色表示“飲用水”“純化水”； 藍(lán)色表示“壓縮空氣”；白色表示“真空”；黃色表示“物料”； 5.容器狀態(tài)標(biāo)志： 已清潔：表示容器已經(jīng)清潔、干燥、消毒，已清潔容器必須存放于器具間內(nèi)。 使用：表示容器處于正在使用的狀態(tài)。該類容器只能出現(xiàn)在生產(chǎn)操作間、中間站及器具清洗間內(nèi)。 6.生產(chǎn)操作間狀態(tài)標(biāo)志： 崗位狀態(tài)標(biāo)牌：標(biāo)明工序名稱、生產(chǎn)品名、規(guī)格、批號、批量、工序負(fù)責(zé)人、生產(chǎn)日期。表示該崗位正在進(jìn)行生產(chǎn)操作的有關(guān)情況。 清場合格證：表示該生產(chǎn)操作間清場合格，QA檢查員核準(zhǔn)的允許下次生產(chǎn)的憑證。 7計量器具狀態(tài)標(biāo)志： 校驗合格證：表示該計量器具經(jīng)校驗合格可在規(guī)定的期限內(nèi)使用。,2019年8月3日星期六,91,空調(diào)凈化系統(tǒng)管理制度 潔凈區(qū)及空調(diào)系統(tǒng)消毒滅菌 1當(dāng)空調(diào)系統(tǒng)停運(yùn)后再重新開工前，質(zhì)保部檢測合格后，再自凈1小時后方可進(jìn)入潔凈區(qū)；檢測潔凈度不合格時，應(yīng)進(jìn)行重新消毒。 2. 高效過濾器在下列情況下應(yīng)予更換，并做好記錄：氣流速度降到最低限度，即使更換初中效過濾器仍不能增大時；高效空氣過濾器風(fēng)量為原風(fēng)量70%時；高效空氣過濾器出現(xiàn)無法修補(bǔ)的滲漏時。 3. 檢查周期：潔凈區(qū)懸浮粒子、沉降菌、浮游菌、風(fēng)速檢測， 并計算各房間的換氣次數(shù)。微生物限度檢測室：沉降菌，懸浮粒子。高效過濾器調(diào)換或修理后需再檢測。 4. 潔凈區(qū)空氣消毒滅菌頻率：每天一次。,2019年8月3日星期六,92,純化水系統(tǒng)清洗消毒標(biāo) 1消毒劑：蒸汽。 2清潔消毒頻率：每周一次。 3消毒時間：30分鐘。 4純化水的儲存周期。 5純化水儲罐的清洗：打開純化水儲罐的人孔蓋，罐內(nèi)加入適量飲用水，用帶有絲光毛巾的不銹鋼擦棒，按從上至下的順序擦洗罐內(nèi)壁，將罐內(nèi)水放盡。關(guān)閉排水閥，加入純化水適量，將罐內(nèi)壁清洗干凈。 6純化水各用水點(diǎn)的卡盤式閥門每周由使用部門清洗一次。每次使用純化水前，先打開U型管排水閥放水沖洗；停產(chǎn)停止循環(huán)后，應(yīng)放掉U型管內(nèi)余水。,2019年8月3日星期六,93,常用的滅菌方法 消毒、滅菌、無菌的區(qū)別 微生物的特點(diǎn) 影響微生物的營養(yǎng)物質(zhì)、生長繁殖條件？ 哪些措施可控制人傳播微生物污染 （人機(jī)料法環(huán)五方面）,2019年8月3日星期六,94,填空50分 選擇5題10分 簡答25-30分,2019年8月3日星期六,95,