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1、2013年高考生物：微生物的應(yīng)用考點(diǎn)匯總1（2012北京理綜5,6分）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn) 行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是 ( ) A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中 B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上 C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上 D將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上2（2012山東基本能力55.1分）除了高溫加熱以外，其它滅菌 方法還有 ( ) A紫外線照射 B真空包裝 C用保鮮膜密閉 D添加防腐劑 (1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn) 色環(huán)帶。 (2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方

2、法是_滅菌。 A高壓蒸汽 B紫外燈照射C.70%酒精浸泡 D過(guò)濾 (3)步驟X表示 。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋，然后將菌液 一到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。 (4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。 (5)臨床上用“C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將“C標(biāo)記的 分解為NH3和“CO2。42012上海單科（四）10分回答下列關(guān)于微生物和酶的 問(wèn)題。(1)過(guò)程稱為_，過(guò)程是為了_。(2)I號(hào)培養(yǎng)基稱為_（按功能分）；該培養(yǎng)基 中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分 -O A瓊脂 B葡萄糖 C硝酸銨 D碳酸氫鈉(3)-般對(duì)

3、配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了 。 在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是-0A40 - 50 B50 - 60 C60 - 70 D70 一80 (5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_。 A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B曲線35數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80時(shí)測(cè)得的C曲線表明80 是該酶活性最高的溫度D曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降5（

4、2011課標(biāo)，39 ,15分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原 油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤巾篩 選出能高效降解原油的菌株?；卮饐?wèn)題： (1)在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。 (2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即 和 。 (3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力 。 (4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、 和 。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。6（2010山東理綜，34

5、,8分）生物柴油是一種可再生的清潔能 源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對(duì)化石燃料的消耗。 科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇 反應(yīng)能夠合成生物柴油（如下圖）。(1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用 、方法從油料作物中提取。(2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供_，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是_ 法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用 法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)_，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。(4)若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的一技術(shù)。7（200

6、9寧夏理綜40 ,15分）(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考 慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、一 和滲透壓等條 件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、 _ _、_ _等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn) 材料。 (2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行 （消毒、滅菌）；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和 ；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能 。 (3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。 (4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征

7、對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的 一。 (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。 對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_-O (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò) 處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案：1C本題主要考查幾種常見生物學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)無(wú)菌操作的要求。生產(chǎn)果 酒和腐乳時(shí)對(duì)無(wú)菌的要求不是很高，接種不需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操 作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出 液中特定微生物時(shí)，不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；植物 組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無(wú)菌條件，若接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作 將可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，故C項(xiàng)符合題意。2A此題考查滅菌的方法。滅菌是使用

8、強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi) 外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。本題中真空包裝、添加防腐劑、 用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性， 核酸受破壞，是滅菌方法。3答案(1)脲酶紅 (2)D (3)接種涂布單 (4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落 (5)尿素 解析此題考查微生物的分離與培養(yǎng)知識(shí)。(1)幽門螺桿菌(Hp) 含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培 養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH，能使培養(yǎng)基中 的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿 素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用C6玻璃砂漏斗過(guò)濾。 (3)微生物的分

9、離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基一滅菌、倒平板一接種 一培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋，然后將菌液涂 布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在 恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌 能將“C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14 CO：，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn) 檢測(cè)人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。4答案(1)稀釋單個(gè)菌落的篩選（或篩選） (2)選擇培養(yǎng)基C (3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢 (4)C (5)A 霉解析本題主要考查微生物培養(yǎng)及酶的相關(guān)知識(shí)。欲培養(yǎng)和分離 嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板法；為稀釋過(guò)程，為篩選過(guò) 程；I號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝

10、酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素； 高溫滅菌的目的是殺死包括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知， 工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為60qC -70C。5霉答案(1)原油選擇 (2)平板劃線法稀釋涂布平板法 (3)強(qiáng) (4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 霉解析(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株， 使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，通過(guò)控制碳源這 種營(yíng)養(yǎng)成分，來(lái)促進(jìn)能高效降解原油的菌株的生長(zhǎng)，抑制其他微生物 的生長(zhǎng)。(2)菌種純化培養(yǎng)時(shí)，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法 接種。(3)當(dāng)固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出單菌落后，可通過(guò)比較菌落周圍分解 圈的大小，來(lái)判斷菌株降解原油能力的大小。一般來(lái)

11、說(shuō)，分解圈越大 說(shuō)明該菌株的降解能力越強(qiáng)，反之則越弱。(4)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的 過(guò)程中，常用灼燒滅菌法對(duì)接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進(jìn)行滅菌； 用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基、試管等進(jìn)行滅菌；用于熱滅菌法對(duì)玻璃 器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 火焰旁進(jìn)行，因?yàn)榫凭珶艋鹧媾钥尚纬梢粋€(gè)無(wú)菌環(huán)境，可防止微生物 的污染。6裙答案(1)壓榨萃?。ㄗⅲ簝煽枕樞驘o(wú)先后） (2)碳源高壓蒸汽滅菌 (3)顯微鏡直接計(jì)數(shù)酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化細(xì) 胞） (4) PCR（或：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 醵解析(1)因?yàn)橹参镉筒灰讚]發(fā)，不能選用蒸餾法，可以用壓榨法、 萃

12、取法從油料作物中提取。(2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和 無(wú)機(jī)鹽等，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供碳源。分析 灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的特點(diǎn)可 知，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液 中微生物的數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)。提取的脂肪酶 在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)之前，要先檢測(cè)其活性，以確定其應(yīng)用價(jià)值。固 定化酶技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成本。(4)在應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)，DNA合成（延伸）時(shí)溫度要控制在72aC， 需要具有較強(qiáng)的耐熱性的DNA聚合酶催化。7露答案(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短 (2)滅菌

13、消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu) (3)比例合適 (4)鑒定（或分類） (5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基 上是否有菌落產(chǎn)生 (6)滅菌 罐解析(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易 培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮 溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物 體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒是用較 為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害 的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變 性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列 的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的 表而，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。(4)對(duì)獲得的純菌種 還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。 （5、培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固 體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放 置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因?yàn)橛械拇竽c桿 菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的 培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的 擴(kuò)散。