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1、活性污泥中微生物分離及生長量檢測,實驗性質(zhì)：綜合 實驗類別：本科基礎實驗 實驗學時：4 實驗教師：,一、實驗目的,（1）通過對活性污泥中微生物（主要是細菌） 生長量的檢測實驗，對微生物菌落形態(tài)特征、細菌生長曲線特點及測定原理有所了解。 （2）夠熟練使用分光光度計，掌握培養(yǎng)基制備及無菌操作方法、微生物純種分離，學會用比濁法測定細菌的生長曲線。,二、儀器與材料,實驗儀器：高壓滅菌鍋 721分光光度計 比色杯 恒溫搖床 實驗材料：活性污泥 肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（固體和液體） 無菌水,三、實驗原理,采用涂布法將菌液（活性污泥）分散在平板培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后獲得單菌落。 由于細菌菌懸液的濃度與光密度（OD值

2、）成正比，本實驗采用比濁法，利用分光光度計測定菌懸液的光密度來推知菌液的濃度，并將所測的OD值與其對應的培養(yǎng)時間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線，從而了解各菌的生長規(guī)律。,四、實驗內(nèi)容,（1）細菌培養(yǎng)基（固體和液體）的制備及滅菌； （2）細菌純種分離； （3）細菌菌落形態(tài)觀察； （4）分光光度計的使用及細菌生長（比濁法）的測定。,五、實驗步驟,LB培養(yǎng)基（固體和液體）的制備及滅菌。 活性污泥中微生物分離,活性污泥梯度稀釋,制作平板,滅菌,分裝,包扎,稱量藥品,調(diào)pH,溶化,細菌菌落形態(tài)觀察,37恒溫培養(yǎng)24小時,涂平板,五、實驗步驟,活性污泥生長量檢測,接入,10mL活性污泥,繪制生長曲線,每隔2h測定培養(yǎng)液OD值,37振蕩培養(yǎng),100mL液體培養(yǎng)基,六、實驗報告,實驗結果 細菌生長量的測定： 細菌生長曲線繪制： 以細菌培養(yǎng)時間為橫坐標，以所測得的細菌培養(yǎng)液OD（吸光度）值為縱坐標繪制細菌生長曲線。 分析與討論 對實驗結果與存在的問題進行總結與簡要分析。,