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1、Central Laboratory of Biology 玻璃器皿的包扎及滅菌 微生物學(xué)實(shí)驗 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 課前預(yù)習(xí)與目的要求 【 課前預(yù)習(xí) 】 1. 高壓蒸汽滅菌原理。 2. 上海申安 LDZX-50KBS滅菌鍋的使用方 法。 【 目的要求 】 1. 學(xué)習(xí)并掌握玻璃器皿的包扎方法。 2. 掌握高壓蒸汽滅菌的基本原理及操作方 法。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hub

2、ei Normal University 基本原理 微生物學(xué)實(shí)驗所用的器皿，大多數(shù)要進(jìn)行 消毒、滅菌，才能用來培養(yǎng)微生物。 玻璃器皿的包裝方法正確合理，在使用過 程中才能有效防止雜菌的污染。 玻璃器皿包裝好后，一般用高壓蒸氣滅菌 法進(jìn)行滅菌。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 基本原理 高壓蒸氣滅菌是將待滅菌的物品放在一個 密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌 鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸氣。 待水蒸氣急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥 中驅(qū)盡，關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由 于蒸

3、氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓 力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于 100 的溫 度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌 的目的。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 實(shí)驗用品 棉花，試管，培養(yǎng)皿，紗布，三角瓶，橡 皮筋，量筒，牛皮紙（或舊報紙）， LDZX- 50KBS立式高壓蒸氣滅菌鍋等。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 方法步驟 1. 熟悉微生物

4、學(xué)實(shí)驗的結(jié)構(gòu)與功能。 2. 清洗試管、三角瓶，培養(yǎng)皿等玻璃器具， 烘干。 3. 制作試管棉塞及三角瓶棉塞（參照微生物 學(xué)實(shí)驗基本操作技術(shù)）。 4. 用量筒或吸管取適量自來水于三角瓶和試 管中，包裝好以制備無菌水。 5. 包裝空培養(yǎng)皿，移液管。 6. 滅菌（參照 ）。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 玻璃器皿清洗方法 玻璃器皿在使用過程中確保干凈，用過的 器皿應(yīng)及時清洗。 器皿一般可以用去污粉、肥皂或洗潔凈清 洗。 瓊脂培養(yǎng)基的器皿應(yīng)先將培養(yǎng)基刮去。 瓊脂和固體物不能丟

5、棄到水池中，以免堵 塞管道。 清洗方法詳見 。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 棉塞的制作 棉塞的作用有二：一是防止雜菌污染，二 是保證通氣良好。 形狀，大小，松緊適度。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 培養(yǎng)皿的包裝 培養(yǎng)皿常用舊報紙緊緊包裹，一包 7 10套 ，包好后干熱或濕熱滅菌。 也可用金屬筒包裝。 Central Laboratory

6、 of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 移液管的包裝 作用：以免使用時將雜菌吹入其中，或不 慎將微生物吸出管外。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 試管和三角瓶的包裝 試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞； 用二層報紙包扎好（如有牛皮紙，效果更 好），進(jìn)行干熱或濕熱滅菌。 試管較多時，一般 7個或 10個一組，再用雙 層報紙包扎。 Central Laboratory of Biology

7、 College of Life Sciences, Hubei Normal University 上海申安 LDZX-50KBS滅菌鍋的使用 1）打開電源與開關(guān)，檢 查水位顯示燈； 2）加滅菌物品； 3）蓋緊； 4）設(shè)定溫度和時間； 5）查看排氣（水）閥旋 至排氣處； 6）排氣； 7）結(jié)束后取物。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 實(shí)驗結(jié)果 記錄自己制作的實(shí)驗用品（含無菌水）名 稱的規(guī)格與數(shù)量。 Central Laboratory of Biology Colle

8、ge of Life Sciences, Hubei Normal University 注意事項 1. 實(shí)驗前，熟悉實(shí)驗室平面布局圖，了解實(shí) 驗儀器用品擺放規(guī)律及用途。 2. 制備無菌水時，試管裝水量要超過試管高 度的 1/5，三角瓶裝水量不要超過規(guī)格容量 的 1/2（裝量過多，滅菌過程中易噴出或潤 濕棉塞）； 3. 滅菌鍋的操作安全。 Central Laboratory of Biology College of Life Sciences, Hubei Normal University 思考題 1. 高壓蒸氣滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi) 冷空氣排盡滅菌完畢后，為什么待壓力降 低“ 0”時才能打開排氣閥，開蓋取物。 2. 在使用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌時，怎樣杜絕 一切不安全的因素。 3. 滅菌在微生物實(shí)驗操作中有何重要意義。 生物學(xué)實(shí)驗教學(xué)中心