《基因工程藥物的研究現(xiàn)狀——乙肝疫苗ppt課件》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《基因工程藥物的研究現(xiàn)狀——乙肝疫苗ppt課件（17頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、基因工程藥物的研究現(xiàn)狀乙肝疫苗 引 言 ： 1953年 Waston和 Crick發(fā) 現(xiàn) 遺 傳 物 質(zhì) DNA的 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) ，給 整 個(gè) 生 物 學(xué) 乃 至 整 個(gè) 人 類(lèi) 社 會(huì) 帶 來(lái) 了 一 場(chǎng) 革 命 。 此 后 ，一 系 列 有 關(guān) 遺 傳 信 息 即 基 因 研 究 的 成 果 很 快 的 向 應(yīng) 用 和 開(kāi)發(fā) 拓 展 。 1972年 ， 美 國(guó) 斯 坦 福 大 學(xué) P.Berg博 士 研 究 小 組 使 用EcorR ,第 一 次 在 體 外 獲 得 了 包 括 SV40DNA和 噬 菌 體 DNA的 重 組 DNA分 子 。 1973年 ， S.Cohen等 將 兩

2、 中 分 別 編 碼 卡 那 霉 素 和 四 環(huán) 素 的抗 性 基 因 相 連 ， 構(gòu) 建 出 重 組 的 DNA分 子 ， 然 后 轉(zhuǎn) 化 大 腸 桿菌 ， 獲 得 了 既 抗 卡 那 霉 素 又 抗 四 環(huán) 素 的 轉(zhuǎn) 化 子 菌 落 ， 這 是第 一 次 成 功 的 基 因 克 隆 實(shí) 驗(yàn) ， 標(biāo) 志 著 基 因 工 程 的 誕 生 。 1977年 Boyer首 次 獲 得 生 長(zhǎng) 激 素 抑 制 因 子 的 克 隆 ， 1982年 第 一 個(gè) 基 因 工 程 重 組 產(chǎn) 品 人 胰 島 素 被 批 準(zhǔn) 應(yīng) 用 ，進(jìn) 入 市 場(chǎng) 。 迄 今 為 止 ， 已 有 50多 種 基 因 工 程

3、 藥 物 上 市 ， 近千 種 處 于 研 發(fā) 狀 態(tài) 。 基 因 工 程 藥 物 已 經(jīng) 形 成 一 個(gè) 巨 大 的 高 新 技 術(shù) 產(chǎn) 業(yè) ， 產(chǎn) 生 了不 可 估 量 的 社 會(huì) 效 益 和 經(jīng) 濟(jì) 效 益 ， 由 于 基 因 藥 物 的 出 現(xiàn) ， 可 以 大 大 改 善 人 類(lèi) 的 生 命 質(zhì) 量 ， 乙型肝炎病毒（hepatitisBvirusHBV），其表面由HBsAg(乙肝表面抗原)構(gòu)成。在HBV攜帶者血液中存在大量的HBsAg。目前，HBV不能再離體組織或細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，無(wú)法用傳統(tǒng)方法制造疫苗。但經(jīng)研究證實(shí)HBV攜帶者血液中HBsAg提純，去除HBV和其他雜質(zhì)所制成的亞單位血源乙

4、型肝炎疫苗可有效預(yù)防HBV的感染。乙肝疫苗的主要有效成分為HBsAg均吸附于佐劑【多為Al（OH）3】上。一 、簡(jiǎn)介 乙 肝 五 項(xiàng) 檢 測(cè) 表面抗原（HBsAg）體內(nèi)是否存在乙肝病毒 表面抗體（抗-HBs）是否有保護(hù)性 e抗原（HBeAg）病毒是否復(fù)制既具有傳染性 e抗體（抗-HBe）病毒復(fù)制是否受到抑制 核心抗體（抗-HBc）是否感染過(guò)乙肝病毒 二 、臨床上應(yīng)用的乙肝疫苗的種類(lèi) 重 組 痘 苗 乙 型 肝 炎 疫 苗重 組 CHO細(xì) 胞 乙 型 肝 炎 疫 苗重 組 釀 酒 酵 母 乙 型 肝 炎 疫 苗血 液 乙 型 肝 炎 疫 苗基 因 工 程 疫 苗 三、什么是重組乙型肝炎疫苗（CH

5、O細(xì)胞） 采用基因工程技術(shù)將無(wú)傳染性的乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的S基因片段克隆到載體，用重組載體轉(zhuǎn)染真核生物CHO細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、增殖、分泌出HBsAg到培養(yǎng)液中，收集分泌液，經(jīng)高速離心、純化、除菌后，加入佐劑吸附（氫氧化鋁）而制成。 CHOCHO(Chinesehamsterovary)【中國(guó)倉(cāng)鼠卵母細(xì)胞】，該細(xì)胞具有不死性，可以傳百代以上。全世界應(yīng)用于人類(lèi)疾病治療或預(yù)防的基因工程產(chǎn)品大部分是由CHO細(xì)胞和大腸桿菌生產(chǎn)的。另外CHO細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞，是一種非分泌性細(xì)胞，本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因此對(duì)目標(biāo)蛋白分離純化工作十分有利。 五、重組CHO細(xì)胞乙肝疫苗的優(yōu)缺點(diǎn)：CHO細(xì)胞表

6、達(dá)的重組HepB是高等真核細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物，其天然結(jié)構(gòu)較低等的真核細(xì)胞酵母表達(dá)的HBsAg蛋白更適合人體吸收，生產(chǎn)工程中不同于酵母使用硫氰酸鹽處理，安全性好。產(chǎn)生一些副作用，例如紅腫、疼痛、發(fā)癢、手臂酸重等癥狀，或者是產(chǎn)生低熱、乏力、惡心、食欲不振等與一般疫苗相似的輕微反應(yīng)。 五、疫苗使用方法1. 一般易感者使用10g/支，每次注射一支，1個(gè)月及6個(gè)月時(shí)注射第2、3支。2. 全程注射3次。新生兒使用20g/支，第一針在出生后24小時(shí)內(nèi)注射，其余兩針同上。3. 高危人群，可用20g/支。4. 注射部位為上臂三角肌肌內(nèi)。 有血清病、支氣管哮喘、過(guò)敏性蕁麻疹及對(duì)青霉素、磺胺等一些藥物過(guò)敏者禁用。低體重、

7、早產(chǎn)、剖腹產(chǎn)等非正常出生的新生兒，暫時(shí)不宜接種乙肝疫苗。雖然乙肝疫苗對(duì)這部分新生兒并無(wú)害處，但因其自身的體質(zhì)狀況易發(fā)生偶合事件，因此最好推遲接種時(shí)間。 六、現(xiàn)有疫苗的發(fā)展史及存在的問(wèn)題 現(xiàn)有疫苗存在的問(wèn)題 什么是成纖維細(xì)胞？ 定 義 ： 普 遍 存 在 于 結(jié) 締 組 織 中 的 一 種 中 胚 層 來(lái) 源 的 細(xì) 胞 。分 泌 前 膠 原 、 纖 連 蛋 白 和 膠 原 酶 等 細(xì) 胞 外 基 質(zhì) 成 分 ， 傷 口愈 合 過(guò) 程 中 可 遷 移 到 傷 口 進(jìn) 行 增 殖 。 成 纖 維 細(xì) 胞 是 疏 松 結(jié) 締 組 織 的 主 要 細(xì) 胞 成 分 ，細(xì) 胞 呈 梭 形 或 扁 的 星

8、狀 ， 具 有 突 起 。 根 據(jù) 不 同 的 功 能 活 動(dòng)狀 態(tài) ， 將 細(xì) 胞 分 為 成 纖 維 細(xì) 胞 和 纖 維 細(xì) 胞 二 型 ： 成 纖 維 細(xì)胞 乃 是 功 能 活 動(dòng) 旺 盛 的 細(xì) 胞 ， 細(xì) 胞 和 細(xì) 胞 核 較 大 ， 輪 廓 清楚 ， 核 仁 大 而 明 顯 ， 細(xì) 胞 質(zhì) 弱 嗜 堿 性 ， 具 明 顯 的 蛋 白 質(zhì) 合成 和 分 泌 活 動(dòng) ； 纖 維 細(xì) 胞 功 能 活 動(dòng) 不 活 躍 ， 細(xì) 胞 輪 廓 不 明顯 ， 核 小 著 色 深 ， 核 仁 不 明 顯 ， 細(xì) 胞 質(zhì) 少 。 此 二 型 細(xì) 胞 可互 相 轉(zhuǎn) 化 。 作 用 原 理 : 成 纖

9、維 細(xì) 胞 攝 取 所 需 的 氨 基 酸 ， 如 脯 氨 酸和 賴(lài) 氨 酸 等 ， 在 粗 面 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng) 的 核 蛋 白 體 上 合 成 前 多 肽 鏈（ proalpha polypeptide chain） ， 多 肽 鏈 輸 送 到 高 爾 基復(fù) 合 體 后 ， 組 成 前 膠 原 分 子 。 前 膠 原 分 子 由 分 泌 囊 泡 帶 到 細(xì) 胞 表 面 ， 然 后 通 過(guò) 胞 吐 作 用 釋 放 到 細(xì) 胞 外 。 在 前 膠 原 肽酶 催 化 下 ， 將 每 一 前 多 肽 鏈 的 尾 段 除 去 ， 成 為 原 膠 原 分子 。 許 多 原 膠 原 分 子 成 行 平 行 排 列 ， 結(jié) 合 成 具 有 周 期 性 橫紋 的 膠 原 原 纖 維 。 由 膠 原 原 纖 維 互 相 結(jié) 合 形 成 膠 原 纖 維 。