《泛發(fā)性膿皰型銀屑病與HLA課件》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《泛發(fā)性膿皰型銀屑病與HLA課件（57頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、泛泛發(fā)性性膿皰型皰型銀屑病與屑病與HLA-DQBHLA-DQB11等位基因的相關(guān)性研究等位基因的相關(guān)性研究 研究生研究生研究生研究生 付洪軍付洪軍付洪軍付洪軍 導(dǎo)導(dǎo)導(dǎo)導(dǎo) 師師師師 張福仁張福仁張福仁張福仁泛發(fā)性膿皰型銀屑病與HLA-DQB1等位1 1 前前 言言q定義與分型v在最近新版的Rook教科書(shū)中，泛發(fā)性膿皰型銀屑病(GPP)被定義為銀屑病的一種不尋常變型，并以急性、亞急性、偶而慢性的損害上發(fā)生無(wú)菌性膿皰為中心特征。前言定義與分型2 2q依據(jù)臨床表現(xiàn)把GPP分為5個(gè)亞型。即：v(1)急性泛發(fā)型(VonZumbusch型)v(2)妊娠期GPP(IP)v(3)兒童型GPPv(4)環(huán)型GPPv

2、(5)局限型GPP(不包括手足)依據(jù)臨床表現(xiàn)把GPP分為5個(gè)亞型。即：3 3q對(duì)這種分類中的IP仍有爭(zhēng)議:不支持觀點(diǎn)：病史、誘因、某些化驗(yàn)室 檢查、處理等不同。支持觀點(diǎn)：病理表現(xiàn)相似、妊娠可誘發(fā) GPP、都具有HLA-B27 抗原。對(duì)這種分類中的IP仍有爭(zhēng)議:不支持觀點(diǎn)：病史、誘因、某些化4 4q尋常型銀屑病(PSV)與 GPP的關(guān)系可概括為:v臨床表現(xiàn)的包容性，即：二者皮損可共存、轉(zhuǎn)化。v免疫異常的相似形，即：二者皮損處都有CD4+、CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn),IL-6、IL-8高水平表達(dá),白細(xì)胞聚集形成微膿腫。v遺傳背景的明顯差異性(后述)。尋常型銀屑病(PSV)與GPP的關(guān)系可概括為:5 5q

3、兩種臨床異質(zhì)、遺傳異質(zhì)GPP亞型:v有PsV病史的GPP與無(wú)PsV病史的GPP。vPsV陽(yáng)性GPP發(fā)病年齡偏晚，誘發(fā)因素常是先前的糖皮質(zhì)激素治療或不規(guī)則撤退。vPsV陰性GPP發(fā)病年齡偏早，誘發(fā)因素多為上呼吸道感染。v遺傳異質(zhì)性后述。兩種臨床異質(zhì)、遺傳異質(zhì)GPP亞型:6 6qHLA復(fù)合系統(tǒng)vHLA位與人6上,全長(zhǎng)3600Kb,只占整個(gè)人類基因組的1/3000,是人類基因組中最復(fù)雜的遺傳系統(tǒng)。v目前已鑒定出224個(gè)基因座位,128個(gè)有功能性產(chǎn)物表達(dá),其中39.8%基因產(chǎn)物直接參與免疫應(yīng)答及調(diào)節(jié)。因而HLA系統(tǒng)多與免疫性疾病有關(guān)。v與疾病關(guān)聯(lián)最密切的一區(qū)域，現(xiàn)已肯定50多種疾病與HLA基因明顯關(guān)聯(lián)

4、，即 HLA復(fù)合體與疾病關(guān)聯(lián)程度超過(guò)人類基因組任何一個(gè)區(qū)域。HLA復(fù)合系統(tǒng)7 7vHLA-DQB1位于HLA-II類基因DQ亞區(qū)，目前已鑒定的DQB1等位基因達(dá)25個(gè)，對(duì)應(yīng)的血清特異性抗原只有9種，即25個(gè)等位基因編碼的抗原只有9種特異性。vDQB1與DQA1分別編碼DQ分子的鏈和鏈。已發(fā)現(xiàn)DQB1等位基因與多種疾病關(guān)聯(lián)。最典型的例子是與IDDM的關(guān)聯(lián)。如果DQ鏈第57位氨基酸是D，則對(duì)IDDM呈抗性；若為D以外的其它氨基酸，則表現(xiàn)為易感性。HLA-DQB1位于HLA-II類基因DQ亞區(qū)，目前已鑒定8 8q研究HLA與疾病相關(guān)，實(shí)質(zhì)上是研究疾病發(fā)生發(fā)展的遺傳傾向，因而屬于病因?qū)W研究。q研究方法

5、通常有關(guān)聯(lián)分析和連鎖分析。研究HLA與疾病相關(guān)，實(shí)質(zhì)上是研究疾病發(fā)生發(fā)展的遺傳傾向，因9 9v關(guān)聯(lián)分析是比較來(lái)自同一群體中無(wú)親緣關(guān)系的患病個(gè)體與非患病個(gè)體(對(duì)照)在某一遺傳標(biāo)記位點(diǎn)(marker locus)上的特定等位基因(如HLA等位基因)與疾病性狀的相關(guān)程度。一般通過(guò)患病人群和健康人群作HLA分型后，用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法(通常用2-tesf)進(jìn)行判別，故屬于病例對(duì)照研究，又稱群體相關(guān)研究（population association studies）。關(guān)聯(lián)分析是比較來(lái)自同一群體中無(wú)親緣關(guān)系的患病個(gè)體與非患病個(gè)體1010v若發(fā)現(xiàn)標(biāo)記位點(diǎn)的特定等位基因頻率在患病組與對(duì)照組之間有顯著性差異，則表明該特

6、定等位基因與所研究的疾病性狀相關(guān)聯(lián)，提示標(biāo)記位點(diǎn)可能含有一個(gè)疾病易感基因或與易感基因緊密連鎖。關(guān)聯(lián)程度通過(guò)計(jì)算相對(duì)危險(xiǎn)度(relative risk,RR)來(lái)估計(jì)。若發(fā)現(xiàn)標(biāo)記位點(diǎn)的特定等位基因頻率在患病組與對(duì)照組之間有顯著性1111q關(guān)聯(lián)分析結(jié)果的判定v發(fā)現(xiàn)某種HLA等位基因或抗原與某種疾病關(guān)聯(lián)(有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)并不意味著攜帶該基因就一定患病，關(guān)聯(lián)結(jié)果有兩種可能的解釋。v一種可能：關(guān)聯(lián)成分與疾病易感性有關(guān)(原發(fā)關(guān)聯(lián))。v另一種可能：關(guān)聯(lián)成分與疾病易感性無(wú)關(guān)，而僅僅是遺傳標(biāo)記，但由于該基因位點(diǎn)存在與HLA連鎖不平衡的其他未知基因，可能也造成機(jī)體對(duì)疾病易感。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果的判定1212v如HLA-DQ

7、B1*0405在IDDM發(fā)病中起關(guān)作用，但此基因又與HLA-DRB1*0901及HLA-B*4601呈連鎖不平衡，使人誤認(rèn)為HLA-DRB1*0901或HLA-B*4601與疾病關(guān)聯(lián)，實(shí)際上只有HLA-DQB1*0405屬于該病的原發(fā)關(guān)聯(lián)成分，其它2個(gè)等位基因?qū)儆诖渭?jí)關(guān)聯(lián)。如HLA-DQB1*0405在IDDM發(fā)病中起關(guān)作用，但此基1313q關(guān)聯(lián)分析的實(shí)際意義v關(guān)聯(lián)分析可提示相關(guān)位點(diǎn)或特定的等位基因的傳遞方式及效應(yīng)性質(zhì)。如正相關(guān)，促發(fā)??；負(fù)相關(guān)，保護(hù)不發(fā)病。并可由亞型分析發(fā)現(xiàn)其遺傳異質(zhì)性(如I型與II型銀屑病)。v關(guān)聯(lián)分析雖只能將致病基因粗略地定位于某個(gè)位置，卻能為以后的基因精確定位、克隆等研

8、究提供重要依據(jù)和線索。關(guān)聯(lián)分析的實(shí)際意義1414qHLA的分型技術(shù)v血清學(xué)方法：只能檢測(cè)HLA基因產(chǎn)物即HLA抗原寬特異性，不能檢測(cè)HLA基因本身的多態(tài)性。v 細(xì)胞學(xué)方法：由于分型細(xì)胞來(lái)源困難，且只能檢少數(shù)HLA-DW、HLA-DPW抗原，現(xiàn)已基本不用。HLA的分型技術(shù)1515v分子生物學(xué)技術(shù)：即DNA水平的HLA分型技術(shù)?？蓹z出HLA多態(tài)性，可識(shí)別同一位點(diǎn)的不同等位基因，隨著PCR技術(shù)方法的改進(jìn)和發(fā)展，其精度和分辨水平越來(lái)越細(xì)，有助于深入研究HLA基因的結(jié)構(gòu)和功能。v常用的方法：包括PCR-RFLP(限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性)、PCR-SSO(序列特異寡核苷酸探針)、PCR-SSP(序列特異性引

9、物)及PCR-SBT(序列直接分型)等。分子生物學(xué)技術(shù)：即DNA水平的HLA分型技術(shù)?？蓹z出HLA多1616vPCR-SSP基本原理：PCR反應(yīng)的特異性取決于擴(kuò)增引物與模板DNA的精確匹配。應(yīng)用SSP引物使HLA分型特異性轉(zhuǎn)化為由PCR反應(yīng)特異性來(lái)決定，因?yàn)镾SP引物序列與特異性等位基因的核苷酸序列完全匹配，只要控制好PCR反應(yīng)條件，就使每對(duì)SSP僅能擴(kuò)增某一特異性HLA等位基因，擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)瓊脂糖電泳或熒光檢測(cè)，便可測(cè)定其特異性，從而達(dá)到對(duì)HLA等位基因分型的目的；同時(shí)反應(yīng)體系中加入了參照引物，擴(kuò)增HLA區(qū)域內(nèi)一段保守序列，又可避免假陰性結(jié)果。PCR-SSP基本原理：PCR反應(yīng)的特異性取決于

10、擴(kuò)增引物與模1717vHLA與銀屑病的相關(guān)性研究vRussell(1972)首次報(bào)道了HLA-B17與銀屑病明顯相關(guān)。v銀屑病與HLA的相關(guān)已明確，即至少有一個(gè)銀屑病基因位于HLA位點(diǎn)或在附近。v比較一致的意見(jiàn)認(rèn)為:PsV與HLA-A1、B13、B17、Cw6、DR7等相關(guān)。HLA與銀屑病的相關(guān)性研究1818vI型銀屑病(40歲以前發(fā)病)主要表達(dá)HLA-Cw6、HLA-B57、HLA-DR7；vII型銀屑病(40歲以后發(fā)病)則高度表達(dá)HLA-Cw2。v最近翟寧等發(fā)現(xiàn)HLA-DQB1*0602與東北漢人PsV關(guān)。劉濤峰等則發(fā)現(xiàn)皖漢人PsV與HLA-DQA1*0201明顯相關(guān)。I型銀屑病(40歲以

11、前發(fā)病)主要表達(dá)HLA-Cw6、HLA-1919vDausset等(1977)首次報(bào)道了GPP與HLA-A13、B17、B27相關(guān)后，vKarvonen和Zachariae等隨后證實(shí)HLA-B27與GPP強(qiáng)相關(guān)，與PsV不相關(guān)；從而首次揭示了PsV與GPP的遺傳背景具有差異性。Dausset等(1977)首次報(bào)道了GPP與HLA-A12020vOcklawaha等（1996）對(duì)日本541例GPP的流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)：vGPP與HLA-A2、B14、B35有弱相關(guān)；vPsV陽(yáng)性的GPP與HLA-A1、B37、DRw10顯著相關(guān)；PsV陰性的GPP不與它們相關(guān)，v從而首次揭示PsV陽(yáng)性的GPP與Ps

12、V陰性的GPP具有遺傳異質(zhì)性。Ocklawaha等（1996）對(duì)日本541例GPP的流行2121vOzawa等則首次從DNA水平上研究發(fā)現(xiàn)HLA-DQB1*0303與PsV陰性的GPP顯著相關(guān)。v進(jìn)一步驗(yàn)證了PsV陽(yáng)性的GPP與PsV陰性的GPP的遺傳異質(zhì)性。v我國(guó)只有宋芳吉報(bào)道北方漢族GPP患者與HLA-B13顯著相關(guān)，v國(guó)內(nèi)尚未有HLA-II基因與GPP相關(guān)的研究文獻(xiàn)。Ozawa等則首次從DNA水平上研究發(fā)現(xiàn)HLA-DQB1*2222目 的本文采用PCR-SSP技術(shù)，對(duì)山東籍漢人GPP患者和健康對(duì)照進(jìn)行HLA-DQB1等位基因分型研究，目的在于：目的23231)探討山東漢人GPP與HLA-

13、DQB1等位基因的相關(guān)性。從而從DNA水平上探討GPP可能的發(fā)病機(jī)制。2)獲得山東漢人對(duì)GPP易感或保護(hù)的相關(guān)基因。3)驗(yàn)證PsV陽(yáng)性GPP與PsV陰性GPP遺傳異質(zhì)性；以及探討GPP各臨床類型的遺傳背景是否具有差異性，從而為臨床分型提供依據(jù)。4)長(zhǎng)遠(yuǎn)目的為研究中國(guó)漢人與GPP相關(guān)性提供一些遺傳學(xué)數(shù)據(jù)。1)探討山東漢人GPP與HLA-DQB1等位基因的相關(guān)性。從2424材料與方法q實(shí)驗(yàn)儀器與材料DNA擴(kuò)增儀穩(wěn)壓電泳儀紫外線分析儀臺(tái)式高速離心機(jī)旋渦混合器移液器(2l，20l，200l各一個(gè))序列特異性引物（SSP）PCR反應(yīng) Buffer TaqDNA聚合酶材料與方法實(shí)驗(yàn)儀器與材料2525q實(shí)驗(yàn)

14、對(duì)象v病例資料：38例GPP均來(lái)自1990年以來(lái)，曾在我院住院治療(包括多次住院)并確 診的GPP患者和近2年來(lái)門診新發(fā)現(xiàn)并 確診的GPP患者，所有患者均為山東 籍漢族人，性別、年齡不限。v對(duì)照資料：94例全部來(lái)自山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東籍漢族大學(xué)生及教職工自愿健康獻(xiàn)血員，彼 此 間 無(wú) 血 緣 關(guān) 系，個(gè) 體 及 家 族 中 無(wú) 銀屑病及其病史。實(shí)驗(yàn)對(duì)象2626q標(biāo)本收集：病例及對(duì)照每人均采取周圍靜脈全血2ml，置于含有塑料試管里，稍混勻加蓋后，-80超低溫冰箱保存。qDNA抽提：應(yīng)用上海生工提供的抽提試劑盒。標(biāo)本收集：病例及對(duì)照每人均采取周圍靜脈全血2ml，置于含有塑2727qPCR反應(yīng)體系：

15、每個(gè)PCR反應(yīng)體系為25l。其中含有10PCR Buffer 2.5ml；0.4 mol特異性引物；0.2 mol內(nèi)對(duì)照引物；200 mol的dNTP mmol MgCl2；1 u Tag DNA酶；2l 模板DNA。qPCR反應(yīng)參數(shù)：第一步94預(yù)變性5 min。第二步94 變性30 s55-60退火50 s72延伸30s32個(gè)循環(huán)。第3步72延伸5min。第4步4保存2 h。PCR反應(yīng)體系：每個(gè)PCR反應(yīng)體系為25l。其中含有102828q讀取及判斷結(jié)果：每條泳道內(nèi)必須出現(xiàn)陽(yáng)性對(duì)照帶(796bp)，在其前方對(duì)應(yīng)欲檢測(cè)等位基因大小的位置出現(xiàn)明亮的帶時(shí)判為陽(yáng)性；如果未出現(xiàn)陽(yáng)性對(duì)照帶，視為PCR反

16、應(yīng)不成功,需重新擴(kuò)增。電泳圖象，見(jiàn)圖-1，-2，-3，-4，讀取及判斷結(jié)果：每條泳道內(nèi)必須出現(xiàn)陽(yáng)性對(duì)照帶(796bp)2929 M DQB1*0603、0201、0602200bp100bpMDQB1*0603、0201、3030M DQBM DQB1 1*0501*0501、0602 0602AC/GPP無(wú)PsV史及家族史200bp100bpM3131 M DQB M DQB1 1*0602*0602、0303 0303成人GPP有關(guān)節(jié)型銀屑病史200bp100bpMDQB1*0602、3232 M DQB M DQB1 1*0603*0603、0201 0201 兒童GPPPsV、家族史陽(yáng)

17、性200bp100bpMDQB1*0603、023333q統(tǒng)計(jì)學(xué)處理v采用2檢驗(yàn)：對(duì)患者組與對(duì)照組的HLA-DQB1等位基因逐一進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。應(yīng)用軟件包，把相關(guān)數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī)計(jì)算出相關(guān)參數(shù)2、P和RR值。v校正Pc(Pcorrection)由Bonferrn法計(jì)算，即PC=P所檢測(cè)的等位基因數(shù)。v以PC作為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理3434v等位基因頻率(Allelicfrenquency,AF)依據(jù)Hardy-Weinberg平衡定律，由公式AF=1-(1-antigenfrequency)1/2計(jì)算，其中antigenfrequency為檢測(cè)陽(yáng)性數(shù)占檢測(cè)總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。等位基因頻率(Alle

18、licfrenquency,AF)依3535結(jié)結(jié) 果果q臨床情況v一般情況：病例組38例，男26例，女12例。發(fā)病年齡最小2月，最大72歲，平均29歲；其中12歲以下發(fā)病的兒童8例。病程最短21天，最長(zhǎng)30年。PsV病史陽(yáng)性18例(包括1例關(guān)節(jié)型銀屑病)，PsV病史陰性20例。有PsV家族史9例。對(duì)照組94例，男59例，女36例，平均年齡21歲。結(jié)果臨床情況3636v臨床類型：VonZumbusch型27例；LGPP6例；妊娠期GPP3例；AC/GPP2例；8例兒童均為VonZumbush型。v9例做病理檢查，表現(xiàn)為角化不全，表皮內(nèi)中性粒細(xì)胞移入，角層下棘層上部Kogoj微膿腫，棘層不同程度的

19、肥厚；真皮淺層血管擴(kuò)張，周圍淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。臨床類型：VonZumbusch型27例；LGPP6例3737q實(shí)驗(yàn)結(jié)果，見(jiàn)：表1表2表3表4實(shí)驗(yàn)結(jié)果，見(jiàn)：3838 表表1 GPP患者與對(duì)照組患者與對(duì)照組 HLA-DQB1等位基因頻率分布比較等位基因頻率分布比較 等位基因患者組對(duì)照組n=38n=942 P PC RR頻數(shù)頻率頻數(shù)頻率DQB1*0602110.157100.055DQB1*0603110.15770.038DQB1*060410.013230.131DQB1*0201150.22270.0386.780.0090.1173.4210.60.0010.0135.068.674

20、0.0030.0390.0819.980.00040.0058.10表1GPP患者與對(duì)照組HLA-DQ3939HLA-DQB1等位基因PsV陽(yáng)性GPP(n=18)對(duì)照組(n=94)2 P PC RR頻數(shù)頻率頻數(shù)頻率DQB1*060230.087100.0550.110.4365.6681.68DQB1*060390.29270.03819.000.00040.00512.42DQB1*0201130.47270.03838.910.00040.00532.31表表2 PsV陽(yáng)性陽(yáng)性GPP與對(duì)照組與對(duì)照組 基因頻率分布比較基因頻率分布比較HLA-DQB1PsV陽(yáng)性GPP(n=18)對(duì)照組(n=9

21、4040表表3 PsV陰性陰性GPP與對(duì)照組與對(duì)照組 基因頻率分布比較基因頻率分布比較HLA-DQB1等位基因PsV陰性GPP(n=20)對(duì)照組(n=94)2 P PC RR頻數(shù)頻率頻數(shù)頻率DQB1*060280.225100.0558.600.0030.0395.60DQB1*060320.05170.0380.000.6578.5411.38DQB1*020120.05170.0380.000.6578.5411.38HLA-DQB1PsV陰性GPP(n=20)對(duì)照組(n=94141HLA-DQB1等位基因PsV陽(yáng)性GPP(n=20)PsV陰性GPP(n=20)2P PC RR頻數(shù)頻率頻數(shù)

22、頻率DQB1*060230.08780.2251.500.1602.080.30DQB1*060390.29220.0517.370.0070.0919.00DQB1*0201130.47220.05115.350.00040.00523.40表表4 PsV 陽(yáng)性陽(yáng)性GPP與與PsV 陰性陰性GPP基因頻率比較基因頻率比較HLA-DQB12PPC4242討討 論論q本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示vHLA-DQB1*0201、0603的頻率在患者中顯著升高，與對(duì)照組比較均有顯著性差異(，PC；，PC)。v表明攜帶DQB1*0201、0603這兩個(gè)等位基因的山東漢族人群患GPP的風(fēng)險(xiǎn)性高于其他人群。討論本實(shí)驗(yàn)結(jié)果

23、顯示4343進(jìn)一步分析：DQB1*0201、0603多呈雜合態(tài)表達(dá)(9/15，9/11)。而對(duì)照組無(wú)一例表達(dá)。表明雜合體(0201/0603)患GPP的風(fēng)險(xiǎn)性最高。進(jìn)一步分析：4444vHLA-DQB1*0602的頻率患者組較對(duì)照組也明顯升高(，P=0.009)，但校正后無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(PC=0.117)。v本研究認(rèn)為擴(kuò)大樣本量后，可能會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)性關(guān)聯(lián)。v依據(jù)是：DQB1*0201、0603、0602這3個(gè)等位基因編碼的DQ分子有共同的結(jié)構(gòu)。HLA-DQB1*0602的頻率患者組較對(duì)照組也明顯升高(，4545v如：Khandnja發(fā)現(xiàn)，96%抗dsDNA抗體陽(yáng)性的SLE患者攜帶DQB1*0201或

24、DQB1*0602，v隨后他發(fā)現(xiàn)這2個(gè)基因編碼的DQ鏈第14位aa都是甲硫氨酸，第26位都是亮氨酸，而其它DQB1等位基因在這2個(gè)位置的氨基酸差異較大。v提示這2個(gè)基因編碼的抗原分子含有與致病肽結(jié)合的共表位。如：Khandnja發(fā)現(xiàn)，96%抗dsDNA抗體陽(yáng)性的SLE4646vHjelmstrom研究發(fā)現(xiàn)DQB1*0201、0603與MG強(qiáng)相關(guān)。v他采用同源模型技術(shù)構(gòu)建出這2個(gè)等位基因編碼的DQ2和DQ6分子結(jié)構(gòu)。v提出了P7和P9 2個(gè)共同的可能的易感肽鏈結(jié)合區(qū)。Hjelmstrom研究發(fā)現(xiàn)DQB1*0201、0603與M4747v本實(shí)驗(yàn)對(duì)3份DQB1*0201陽(yáng)性的擴(kuò)增DNA測(cè)序結(jié)果：v3

25、份擴(kuò)增DNA堿基序列在第30位都由正常的T變?yōu)镚。在第45位，2份由T變?yōu)镚，1份由A變?yōu)镃。與人類基因庫(kù)提供的氨基酸序列比對(duì)，本實(shí)驗(yàn)在第21-23位的氨基酸序列與正常比較差異較大。v我們還不敢判定這些堿基和氨基酸的異常與GPP關(guān)系有多大，但至少帶給我們一點(diǎn)啟示。本實(shí)驗(yàn)對(duì)3份DQB1*0201陽(yáng)性的擴(kuò)增DNA測(cè)序結(jié)果：4848v本實(shí)驗(yàn)顯示，患者組中DQB1*0604的頻率明顯 低 于 對(duì) 照 組(，PC0.05)，表 明 攜 帶DQB1*0604的山東漢人患GPP的風(fēng)險(xiǎn)性較小。v國(guó)外研究表明，攜帶DQB1*0604的白人對(duì)MG抵抗。v但DQB*0604是否是山東漢人或國(guó)人對(duì)GPP抵抗的保護(hù)性基

26、因，有待于進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)顯示，患者組中DQB1*0604的頻率明顯低于對(duì)照組(4949v通過(guò)以上分析，結(jié)合本科題研究。v推測(cè)：DQB1*0201、0603、0602這3個(gè)等位基因編碼的DQ2和DQ6分子鏈中可能存在著與GPP易感的肽鏈結(jié)合區(qū)。通過(guò)以上分析，結(jié)合本科題研究。5050qPsV陽(yáng)性GPP與對(duì)照組比較DQB1*0201、0603的頻率在PsV陽(yáng)性GPP組中顯著高于對(duì)照組(RR=32.31，PC=0.005；RR=12.42，PC=0.005)。qPsV陰性GPP與對(duì)照組比較DQB1*0602頻率顯著高于對(duì)照組(RR=5.6，PC=0.039)。PsV陽(yáng)性GPP與對(duì)照組比較5151q

27、PsV陽(yáng)性GPP與PsV陰性GPP比較DQB1*0201、0603的頻率在PsV陽(yáng)性GPP組高于PsV陰性組（RR=23.4，PC=0.005；RR=9.0，P=0.007）。通過(guò)以上三個(gè)比較表明：DQB1*0201、0603與PsV陽(yáng)性GPP關(guān)聯(lián)；DQB1*0602與PsV陰性GPP關(guān)聯(lián)。q本實(shí)驗(yàn)結(jié)果強(qiáng)烈支持PsV陽(yáng)性GPP與PsV陰性GPP具有遺傳異質(zhì)性的觀點(diǎn)。q本文還分析了GPP各臨床類型DQB1等位基因的分布情況，結(jié)果各臨床類型之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PsV陽(yáng)性GPP與PsV陰性GPP比較5252q本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與日本研究不一致，日本人GPP與DQB1*0303強(qiáng)相關(guān)。v根據(jù)Nishika

28、i報(bào)道，日本人SLE患者中DQB1*03亞群（0301、0302、0303）的頻率都升高，推測(cè)DQB1*03亞群可能是日本人的優(yōu)勢(shì)基因。v所以本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與日本研究不一致，可能與種族不同有關(guān)。v但也不能排除與其它等位基因強(qiáng)烈連鎖不平衡的結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與日本研究不一致，日本人GPP與DQB1*03035353小小 結(jié)結(jié)q本研究采用PCR-SSP法，對(duì)魯籍38例GPP和94例健康對(duì)照進(jìn)行了HLA-DQB1等位基因分型研究，發(fā)現(xiàn)HLA-DQB1*0201、0603與GPP患者顯著相關(guān)，提示HLA-DQB1*0201、0603可能是山東漢人GPP的易感基因。有PsV病史的GPP與無(wú)PsV病史的GPP與

29、HLA-DQB1相關(guān)的等位基因不同，表明這兩種類型GPP的遺傳背景具有差異性。本研究提供了一些中國(guó)漢人與GPP相關(guān)的遺傳學(xué)數(shù)據(jù)，這對(duì)于今后研究中國(guó)漢人與GPP的相關(guān)性具有重要意義。小結(jié)本研究采用PCR-SSP法，對(duì)魯籍38例G5454展展 望望q本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有對(duì)其它HLA位點(diǎn)等位基因進(jìn)行分型研究，因而無(wú)法推測(cè)山東漢人對(duì)GPP易感或保護(hù)的單體型。qHLA各等位基因座位之間存在廣泛連鎖，有些基因連鎖后易感性消失，有些反而增強(qiáng)，因而推斷與疾病相關(guān)的單體型，比研究單個(gè)等位基因與疾病的相關(guān)性更有助于闡明疾病的病因及發(fā)病機(jī)制。展望本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有對(duì)其它HLA位點(diǎn)等位基因進(jìn)行分型5555q由此可見(jiàn)，研究中國(guó)漢人與GPP的相關(guān)性，重點(diǎn)研究與GPP相關(guān)的單體型以及分析關(guān)聯(lián)基因所編碼的分子結(jié)構(gòu)將是以后研究的方向。由此可見(jiàn)，研究中國(guó)漢人與GPP的相關(guān)性，重點(diǎn)研究與GPP相關(guān)5656Thankyouforattending!5757