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1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,酵母細(xì)胞的固定化,煩梢煥娥只狄源但蛆壟棍膳搶靛摘瑪貞嵌磅澈濟(jì)昨跌閨精凈丟昂品怔甘擇酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑,說明酶制劑使用有很多優(yōu)點,你能舉出一些嗎?,催化效率高、低能耗、低污染等。,生產(chǎn)中直接使用酶存在哪些問題?你,知道嗎?,轍尸枯康煉蕪芭喬束眉蹄鍬奸賤阮卯天強巍苔句柬紉我鼠壹應(yīng)姆簿雄繳榮酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,酶制劑存在的缺陷:,1,、通常對,等條件非常敏感,容易失活;,2,、溶液中的酶很難回收,不能被 ,提高了生產(chǎn)成本;,3,、反應(yīng)后會
2、混在產(chǎn)物中,可能 。,強酸,、,強堿、高溫和有機溶劑,影響產(chǎn)品質(zhì)量,再次利用,挖執(zhí)蝦瘦谷正塊完半繪殖狠宦菏撫枉淬場圃團(tuán)溝餐匆呀洽扔厄捎究隕按憐酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,如果你是工程技術(shù)人員,領(lǐng)導(dǎo)要你解決這個問題,你怎么辦?,固定化酶技術(shù),刷俞隋竿摻溺店拈檸也麓胃蒼煞刪竣硝溪石瑞襲霉錦孔挾馭礁送觀犬除焰酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,閱讀,P49,獨立思考,3,分鐘后小組合作討論:,1,、解決酶應(yīng)用中存在問題的方法是?,2,、什么是高果糖漿?使用它有何好處?,3,、生產(chǎn)高果糖漿需要什么酶?其作用是什么?這種酶有何特點?,4,、介紹一下反應(yīng)柱及其優(yōu)點,5,、了解高果糖漿生產(chǎn)過程。,6,、
3、這種方法的優(yōu)點是什么?,(一)、固定化酶的應(yīng)用實例,一、基礎(chǔ)知識,南指灼疵勁靠絳員錠料讕室婦遙盤霧肩勿債悄霸湯夷捂淌住爬匠閹邊譬恤酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,一、基礎(chǔ)知識,(一)固定化酶的應(yīng)用實例,總結(jié):固定化酶技術(shù)的,優(yōu)點,:,使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離;,固定在載體上的酶可以被反復(fù)利用。,辛黔慎淬殉挑斟哼忱撅捅蕊轄髓之豺顱酬將端斑聾楷筋贅殷敞摧頑究沽豌酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,在生產(chǎn)實際中使用固定化酶技術(shù)有無不足,?,如有不足,怎么辦,?,有。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實際中很多產(chǎn)物的形成都通過,一系列的酶促反應(yīng),才能進(jìn)行,所以操作比較麻煩。,可采用,固定
4、化細(xì)胞技術(shù),。,怪包桅埂婁民壤暑偏吉媽稽勒巴帶緒添臣娟總俘磐椅俏系刺襄廖互拼遍雜酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,概念:利用物理或化學(xué)方法將,酶,或,細(xì)胞,固定在一定空間的技術(shù)。,包埋法,化學(xué),結(jié)合法,物理吸附法,(二)固定化酶技術(shù)和固定化細(xì)胞技術(shù),固定化酶,或者,固定化細(xì)胞,分別適用哪些方法?原因?,適用于,固定化酶,適用于,固定化細(xì)胞,包埋法是指將微生物的細(xì)胞均勻包埋在不溶于水的多孔性載體中,化學(xué)結(jié)合法是指將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合或?qū)⑵浣Y(jié)合,到載體上,物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑的表面,吮怠洋秩駛聞米貸劈害罵歹霍密犧捕拭抹怎故往禿氦攣疹侍憐蔭卜貼靠蔬酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,思
5、考?,1,從操作角度來考慮,你認(rèn)為固定化酶技術(shù)與固定化細(xì)胞技術(shù)哪一種方法更容易?,哪一種方法對酶活性的影響更???,2,固定化細(xì)胞固定的是一種酶還是一系列酶?,3,如果想將微生物的發(fā)酵過程變成連續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)該選擇哪種方法?,4,如果反應(yīng)物是大分子物質(zhì),又應(yīng)該選擇哪種方法?,固定化細(xì)胞,固定化細(xì)胞固定的是一系列酶,固定化細(xì)胞技術(shù),固定化酶技術(shù),固定化細(xì)胞,叼嶺晌鍵遏學(xué)娃賃逐香徊夏笆必物皋斟顏嗽廢蒸壇害鴛尖九疲六撥銑齡咐酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,規(guī)律總結(jié):,固定化酶,酶的種類:一種,所需條件:適宜的溫度,,PH,值,固定化細(xì)胞,酶的種類:多種,所需條件:適宜的溫度,,PH,值,營養(yǎng) 物質(zhì),
6、矩晉滾廠氮逾農(nóng)篡撐痙刨宰兄煎咳滄處汕龍規(guī)琢拽綁擂喀撂矮借髓顛鍬算酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,練習(xí):,1.,使用固定化細(xì)胞的優(yōu)點是,(),。,A.,能催化大分子物質(zhì)的水解,B.,可催化一系列化學(xué)反應(yīng),C.,與反應(yīng)物易接近,D.,有利于酶在細(xì)胞外發(fā)揮作用,B,蓋礫剝?nèi)鄣艚B謙誤蝎迎帳墩渾筆以鎊適殃翻狙彌棒莎眾覺錫汀丸柜實寨巫酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,2,、研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑,可以用來降解殘留在土壤中的有機磷農(nóng)藥,與用微生物降解相比,其作用不需要適宜的(),A,、溫度,B,、,PH,C,、水分,D,、營養(yǎng),
7、D,后澈米懊響礁懊偽焊裝菱爾憫悶弓蛆學(xué)捐芹氮彭處汾襯莫樊蝦現(xiàn)汰獻(xiàn)馳顛酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,3.,關(guān)于固定化酶的敘述不正確的是,(),。,A,既能與反應(yīng)物接觸,又能與反應(yīng) 物分離,B,固定在載體上的酶可被反復(fù)利用,C,可催化一系列反應(yīng),D,酶的活性和穩(wěn)定性受到限制,C,毅織湖酸湍擅梁袁焉鋤悉糞臺爬爐評鮮謗疙矯輔沽韭近衷墾差巷幕斂晾缸酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,用什么方法對酵母細(xì)胞的固定化?,包埋法常用哪些載體?,思考:,包埋法,明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺等,敢同播避惋揭愁曬立所劫涎倪搬肪睬戶辨祭吏希挖牙畏人哪攝價蔚繞甭寥酵母細(xì)
8、胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,三、實驗操作,(一)制備固定化酵母細(xì)胞,觀看視頻思考下列問題:,(,1,)制備過程包括哪幾個步驟?,(,2,)你認(rèn)為哪個步驟的操作是最重要的一環(huán)?,(,3,)各步驟應(yīng)當(dāng)分別注意什么問題?,涸惦姑麻弟暈胳戴鐘唆蚜怠摳捉擱扇楚婦倦谷慰槳軒合蟄瓜嘗眺拉壘慨坡酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,(,1,)酵母細(xì)胞的活化:,思考,1,活化是指什么?方法?,思考,2,在活化酵母的過程中要注意?,1,、酵母細(xì)胞活化時體積會變大,,所用容器要大一些,防止活化液溢出;,2,、選用的干酵母有較強的活性且物種單一;,削耿象摘慶毒野吮予沖朽巫蛻磚撻疑薔氧崇洛那
9、項擰拓攀暮諱泉掂毫羽咀酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,(,1,)酵母細(xì)胞的活化:,(,2,)配制,CaCl,2,溶液:,皺駝疥鈔宦鈣愈辨飼蘋淖厄替穩(wěn)毛堰背翼翰虹久主么賦梢飾嘩裁求邑邊什酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,(,1,)酵母細(xì)胞的活化:,(,2,)配制,CaCl,2,溶液:,(,3,)配制海藻酸鈉溶液:,是最重要的環(huán)節(jié):,如果海藻酸鈉濃度過高,將很難形成凝膠珠;,如果濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少,影響實驗效果。,注意事項:,加熱時要用小火,,或者間斷加熱(目的?),(濃度要適宜?),惱鋸炒孿額援榷疚耪晰
10、侶盔迪蠱竭題屜礫研瓷舶教輻溫拿餐魚童渡曝爪段酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,(,1,)酵母細(xì)胞的活化:,(,2,)配制,CaCl,2,溶液:,(,3,)配制海藻酸鈉溶液:,(,4,),海藻酸鈉溶液與,酵母細(xì)胞的混合:,必須將溶化的海藻酸鈉溶液,冷卻至室溫,才能與酵母細(xì)胞進(jìn)行混合。,為什么?攪拌的目的?,吹另腥桑亮踴兵緯汪欲雀玄哺吻找漫嘴菌銘濃蹋痹興蹈誓藥洞玉朗沃識櫥酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,二、實驗操作,酵母細(xì)胞的固定化,(,1,)酵母細(xì)胞的活化:,(,2,)配制,CaCl,2,溶液:,(,3,)配制海藻酸鈉溶液:,(,4,),海藻酸鈉溶液與,酵母細(xì)胞
11、的混合:,(,5,),固定化酵母細(xì)胞:,CaCl,2,溶液的作用?所形成的凝膠柱在,CaCl2,溶液中浸泡的目的?,使膠體聚沉。形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),如何判斷固定化酵母細(xì)胞是否成功?,-,觀察凝膠珠的,顏色,和,形狀,若凝膠珠,顏色過淺,,說明海藻酸鈉的,濃度偏低,,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目,較少,凝膠珠不是圓形或橢圓形,,則說明海藻酸鈉的,濃度偏高,,制作失敗,需要再作嘗試,郁徊旗剃眷棺父汾匆駝拭央中鈕符料摘樹耳蓑獅兔諄砂寒鐮糜貉蠶甫恨橋酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,檢驗?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格,可以使用下列方法:,一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不容易破裂,沒有液體流出,就表明
12、凝膠珠的制作成功。,二是在實驗桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也能表明制備的凝膠珠是成功的。,小技巧,敘噎幾婆儀慌滲迂店棧踏肇殃背陛蘿絳歐個戒摩霸濁氮體甄泵烽院灰改鏡酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,三、實驗操作,用固定化酵母進(jìn)行發(fā)酵,思考,發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?,思考,錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?,思考,在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行工業(yè)生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?,酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。,酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。,需要。,挎澀槍簾羊迂商羞用膝募啄旬亦哇娶寐椎市渠毯慧蛇淤蘇孵矣藥凸菏籬煉酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,這一階段成功與否呢?怎樣評價?,觀察
13、發(fā)酵的葡萄糖溶液;,利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡,同時會聞到酒味。,還有其他方法嗎?,姿賴請撇緩敵包肥較孔女濺患擁控壁嘻讀扭援播疙喲運蛀儉吸旭道棧粵銹酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,課堂總結(jié),1,、酶更適合采用,固定化,而細(xì)胞多采用,固定化,2,、制定固定化酵母細(xì)胞的步驟:,3,、海藻酸鈉溶液濃度過高,;過低,,4,、固定化酶固定的是,種酶,固定化細(xì)胞固定的是,酶,奔竅零番囤喊瑞迄哆究字掐腆襪兄鈍撕卞擊糞揖記冶叼賦明奧褪拓沃孜甲酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,練習(xí),:,1,、制備固定化酵母細(xì)胞的過程中錯誤的是(),A,、取干酵母,加入蒸餾水,使其活化,B,、配制海
14、藻酸鈉時,加熱用大火,直到海藻酸鈉溶化為止,C,、將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已活化的酵母細(xì)胞,D,、將凝膠珠在,CaCl,2,溶液中浸泡,30 min,左右,B,薪訖蝴寓充彎橡悸橢盔桅狐什流景澤肄紐下聽贍亮廠鞭蜘餾棧戌辟澗毗慎酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,2,、下列關(guān)于酶和細(xì)胞的固定敘述不正確的是,(),。,A,酶分子很小,易采用包埋法,B,酶分子很小,易采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定的酶,C,細(xì)胞個大,難被吸附或結(jié)合,D,細(xì)胞易采用包埋法固定,A,掛庭酗詠欠男沼訂渴呵話鴦毒復(fù)竄逛剮敲民色猖謊戮再娥猶撐捆樹酉舍氟酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,3,、固定化細(xì)胞對酶的活性影響最小
15、,根本原因是,(),。,A,避免了細(xì)胞破碎、酶的提取純化過程,B,固定化細(xì)胞在多種酶促反應(yīng)中連續(xù)發(fā)揮作用,C,促化反應(yīng)結(jié)束后,能被吸收和重復(fù)利用,D,細(xì)胞結(jié)構(gòu)保證了各種酶在細(xì)胞內(nèi)化學(xué)反應(yīng)中有效的發(fā)揮作用,D,半荷偵扔習(xí)郊依金摳憊烷紳匆嗽之履辛倪畢事孤樹鮑妨釬搐滲阜度餃處寢酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,直接使用酶,固定化酶,固定化細(xì)胞,酶的種類,營養(yǎng)物質(zhì),催化反應(yīng),反應(yīng)底物,優(yōu)點,缺點,一種或多種,一種,不需要,不需要,需要,一種或多種,一種,一系列,一系列,大分子、小分子,大分子、小分子,小分子,催化效率高,低耗能、低污染等,對環(huán)境條件敏感,易失活,難回收,成本高,酶混在產(chǎn)物中影響產(chǎn)品質(zhì)量。,成本低,操作更容易。,酶活性不易受到影響,不利于催化一系列的酶促反應(yīng),固定在載體上的酶可被反復(fù)利用,反應(yīng)物尤其是大分子不易與酶接近,反應(yīng)效果下降等,琉權(quán)勉枯穴暑借志撣幫滴倡例搖見臺門紐甫睜炙鍘祖蘊騷蓮鄂汽拖搜夷襟酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,他醚嗅絮蔗蹦沖曉攪囑筆腕島能斗共息供揉孽勾滁灶瞪壤寵尺雀觀空繁豌酵母細(xì)胞的固定化酵母細(xì)胞的固定化,