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1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,實驗四果蠅的性狀觀察 與飼養(yǎng)管理,生命科學學院,了解果蠅的生活習性，掌握果蠅飼養(yǎng)管理的方法，鑒定果蠅的雌雄性別和突變性狀。,一、實驗目的,二、實驗原理,普通果蠅（,Drosophila,melanogaster,）為雙翅目昆蟲，具完全變態(tài)。用果蠅做實驗材料有許多優(yōu)點：,1.,生長迅速，,每,12,天左右即可完成一個世代；,2.,繁殖能力強，,每只受精的雌蠅可以產卵,500,個左右，,因此在短時間內即可獲得大量的子代,便于

2、遺傳分析；,3.,飼養(yǎng)容易，,以玉米粉等做飼料就可以生長繁殖；,4.,突變性狀多,達,400,以上,且多數(shù)是形態(tài)變異,容易觀察。,三、實驗材料,野生型果蠅,(,灰身、紅眼、長翅、直剛毛,),及幾種常見的突變型：如白眼、小翅、卷剛毛、黑檀體等。,四、實驗器具和藥品試劑,生化培養(yǎng)箱、雙筒解剖鏡（或放大鏡）、鑷子、鍋、電磁爐、高壓滅菌器、電熱恒溫干燥箱、培養(yǎng)瓶、棉花塞、燒杯、玻棒、棉簽、濾紙。,乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、瓊脂、玉米粉、白糖。,五、實驗內容和步驟,（一）生活史的觀察,果蠅的生活史包括卵、幼蟲、蛹、成蟲四個連續(xù)的發(fā)育階段。,圖,1,果蠅生活史,卵：,卵白色，長橢圓形，長約,0.5mm,，

3、在背面的前端伸出一對觸絲，它能使卵附著在柔軟的食物上，不至于深陷到食物中去。,幼蟲：,幼蟲從卵中孵化出來后，經過兩次蛻皮到第三齡期,體長可達,4-5mm,。,在解剖鏡下觀察可見一端稍尖為頭部，并且有一黑點即口器；,稍后有一對半透明的唾腺，每條唾腺前有一條唾腺管向前延伸，然后會合成一條導管通向消化道。神經節(jié)位于消化道前端的上方。,蛹：,幼蟲生活七天左右即化蛹,化蛹前從培養(yǎng)基中爬出附在瓶壁上，漸次形成一個棱形的蛹。,起初顏色淡黃、柔軟，以后逐漸硬化，變?yōu)樯詈稚?這就顯示即將羽化了。,成蟲：,剛羽化出的果蠅，身體狹長，翅還沒有展開，身體較白嫩，此時野生型體色與黑檀體體色都是一樣的，沒有多大區(qū)別。,不

4、久，蠅體變?yōu)榇侄虣E圓形，雙翅展開，體色加深,如野生型果蠅的體色成為灰褐色，突變型黑檀體果蠅的體色成為烏黑色。,圖,1,果蠅生活史,1.,卵,2.,一齡幼蟲,3.,二齡幼蟲,4.,三齡幼蟲,5.,蛹,6.,成蟲,(,雄,),7.,成蟲,(,雌,),果蠅生活周期的長短與溫度關系密切，,30,以上時果蠅則將不育并可導致死亡，低溫則使它的生活周期延長，同時生活力也降低。培養(yǎng)果蠅的最適溫度是,20-25,。,10 15,20,25,卵幼蟲蛹成蟲,57,天,18,天,15,天,12,天,用手輕拍果蠅的培養(yǎng)瓶，使果蠅震落瓶底，迅速拔去棉塞，并將麻醉瓶與培養(yǎng)瓶的兩口相對，培養(yǎng)瓶在下、麻醉瓶在上，并朝向燈光處，

5、雙手遮住培養(yǎng)瓶，利用果蠅的趨光性和向上性，將果蠅引入麻醉瓶；,先在棉簽上滴上數(shù)滴乙醚，將培養(yǎng)瓶口朝下，果蠅即向上爬行。輕抽出棉塞，插進棉簽，將棉塞塞住，平放在桌面上約半分鐘，果蠅即被麻醉。,（二）果蠅麻醉,注意不能麻醉過度，如果果蠅的翅膀與身體呈,45,度角翹起，表明麻醉過度，不能復蘇而死亡；,搖動麻醉瓶，使果蠅震落瓶底，之后立即將果蠅倒白瓷板或濾紙上，用毛筆小心撥動觀察；,檢查后的果蠅可以放回原培養(yǎng)瓶中，也可以進行處死。,（三）果蠅雌雄性別的鑒別,果蠅有雌雄之分，幼蟲期較難區(qū)別，成蟲期則較易區(qū)別：,1.,體型：,雌果蠅,體型較大，雄果蠅較?。?2.,腹部末端：雄性腹部,鈍圓,，雌性末端末端,

6、稍尖,；,3.,腹部背面：雌性有明顯,5,條黑色條紋，雄性有,7,條，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈現(xiàn)一,明顯黑點,。,4.,腹部腹面：雌性有較明顯的,7,個腹片，雄性有,5,個腹片。,5.,性梳：雄性第一對足的跗節(jié)基部外側有黑色鬃毛狀性梳，雌性則無。性梳的有無，是鑒別雌雄性果蠅的明顯標志之一。,圖,3,左：雄性果蠅的左前足 中：跗節(jié)基部的性梳 右：雌果蠅無性梳,C,、基節(jié),TR,、轉節(jié),F,、腿節(jié),TI,、脛節(jié),TA,、跗節(jié),（四）果蠅培養(yǎng)基,果蠅在水果攤或果園里常可見到，但它并不是以水果為食，而是采食生長在水果上的酵母菌，因此實驗室內凡能發(fā)酵的基質，均可作為果蠅的飼料。,配方,水,/ml,瓊

7、脂,/g,蔗糖,/g,玉米粉,/g,丙酸,/ml,酵母粉,/g,1,80,1.5,13,10,0.5,0.5,2,100,1,10,10,0.5,0.5,按配方稱量各成分；,用,2/3,的水將瓊脂調勻，加熱熔化；,加入蔗糖使溶解；,用,1/3,的水將玉米粉調成糊狀，倒入上液中，不斷攪拌，煮沸至粘稠為止；,為防止培養(yǎng)基長霉，可加,2ml,丙酸或苯甲酸攪拌均勻,將培養(yǎng)基倒入滅菌的培養(yǎng)瓶中；,用棉塞封口，使冷卻凝固；,用前,1-2,天，在培養(yǎng)基表面撒少量干酵母粉，使培養(yǎng)基發(fā)酵后即可使用。,實驗室常用的培養(yǎng)基配制方法是：,（五）幾種常見的突變性狀,實驗中常用的果蠅突變性狀多可用肉眼鑒別，有一些則可借助于解剖鏡辨認，這些性狀一般都是明顯而穩(wěn)定的。,作 業(yè)：,1.,如何區(qū)分果蠅的雌雄個體？,2.,果蠅麻醉是的注意事項有哪些？,