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重慶市榮昌安富中學2014屆高二生物 DNA重組技術(shù)的基本工具教案

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1、DNA重組技術(shù)的基本工具教學案例 教學過程教學內(nèi)容教學手段和方法預期目標1.創(chuàng)設情境,引入對基因重組技術(shù)工具的學習。師:1973年轉(zhuǎn)基因微生物轉(zhuǎn)基因大腸桿菌問世;1980年第一個轉(zhuǎn)基因動物轉(zhuǎn)基因小鼠誕生;1983年第一例轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因煙草出現(xiàn),實現(xiàn)了一種生物的某些性狀在另一種生物中的表達。同學們,性狀的表達與我們從前學過的什么過程有關(guān)?生:與基因控制蛋白質(zhì)的合成有關(guān)。師:假若這是一個DNA上的能指導合成某種藥物蛋白的基因(老師用手指出紙條上的該區(qū)段),而這是一條煙草的DNA(老師拿出另一紙條)。同學們分析,要實現(xiàn)藥物基因在煙草中的表達,提前要做哪些關(guān)鍵工作?生:1. 要將藥物基因切割下來;2

2、. 要將藥物基因整合到煙草的DNA上。師:同學們說得對!但還應該實際考慮問題,這兩條紙帶所代表的DNA是在同一個細胞中嗎?生:不是。師:所以這里就存在一個基因轉(zhuǎn)移的實際問題,誰能具體說一下?生:就是如何將控制合成藥物的基因轉(zhuǎn)入煙草細胞的問題。 拿出兩種不同顏色的等寬的紙條。學生討論。第三個內(nèi)容不好回答,教師要引導。贊揚也是教育的一種方式。聯(lián)系舊知識,使學生認識到基因工程也是建立在基因控制蛋白質(zhì)合成的基礎理論上的,不可割裂。抽象變直觀,增強誘思的效果。使學生認識到科學的發(fā)展有賴于技術(shù)的創(chuàng)新。2 / 102.學習 “分子手術(shù)刀”限制酶。師:同學們思考的問題,正是科學家們思考的問題。剛才我們所探討的

3、工作,都是在分子水平上進行的,切割也好,連接也好,轉(zhuǎn)移也好,無一例外。中國有句俗語叫“沒有金剛鉆兒,不攬瓷器活兒”??茖W家們在實施基因工程之前,苦苦求索,終于找到了實施基因工程的三種“金剛鉆兒”,使基因工程的設想成為了現(xiàn)實。這三種“金剛鉆兒”,一是準確切割DNA的工具,“分子手術(shù)刀”限制酶;二是DNA片段的連接工具,“分子縫合針”DNA連接酶;三是基因轉(zhuǎn)移工具,“分子運輸車”基因進入受體細胞的載體。下面我們就來學習這方面的內(nèi)容。師:在進入對限制酶的學習時,你們可能最關(guān)心的是這種工具酶到哪里去尋找。我們不妨從以往學過的知識談起,引起思考。自然界中有各種生物,它們所處的環(huán)境不是真空。一些生物的DN

4、A可能進入另一種生物的細胞中。這種可能,同學們可用什么實例來說明?生:噬菌體侵染細菌的實驗。師:那么現(xiàn)今存在的生物為什么沒有在長期的進化過程中被外源DNA的入侵而絕滅,仍能保持一種穩(wěn)定狀態(tài)呢?生:生物體有的有免疫系統(tǒng),如動物;有的有保護作用的組織、器官,如植物。師:那么作為單細胞的生物來講,怎么會有那么復雜的結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)?它如何來抵抗入侵的外源DNA,保護自身呢?生:只有讓外來的DNA失效,才能保護自身。師:那么怎樣才能讓DNA失效?生:用DNA酶,因為在必修課本中學過。師:用DNA酶,那么生物自身的DNA不也要失效了嗎?生:一種特殊的酶,能切割外來的DNA,而對自身不切割。引導大家思考。學生討

5、論。討論中及時發(fā)現(xiàn)有創(chuàng)新思維的學生,鼓勵發(fā)表意見。學生再次議論。及時鼓勵學生。學生看書。以上教學也是將三種操作工具整合到一個完整的過程之中。將直白的教學內(nèi)容變得有思維力度。培養(yǎng)學生思維的創(chuàng)造性。以上教學改變直白的教學方式,通過誘思,提高學生的思維能力。3.學習“分子縫合針”DNA連接酶。師:根據(jù)你們的分析可知,這種酶可能是一種不同于DNA酶的、我們還沒有認識的酶。我們討論至此,同學們是否有了從哪里獲得這種酶的意向?生:到單細胞的生物中去找。師:科學家的基本意向也和同學們一樣。單細胞生物比多細胞生物更容易受到外源DNA的侵入。在長期的進化過程中,使其必須有處理外源DNA的酶??茖W家們經(jīng)過不懈的努

6、力,終于從原核生物中分離純化出這種酶,叫做限制酶。迄今已從近300種微生物中分離出4 000種限制酶。這種酶與我們以前知道的DNA酶的作用是不同的。請同學們看書,學習限制酶特有的作用。師:書中告訴我們這種特殊的酶有什么作用?生:它們能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。師:以上這句話,說出了兩層意思。一是識別特定核苷酸序列。請同學們看圖,EcoRI只能識別GAATTC的核苷酸序列,SmaI只識別CCCGGG的核苷酸序列。第二層意思是從特定部位的兩個核苷酸之間切開。請同學們看圖,EcoRI就從G和A之間切開,SmaI就從C和G之間切

7、開。師:剛才我們提到科學家們已經(jīng)分離出4 000多種限制酶。由于酶的不同,它們識別的特定核苷酸序列也不同,這樣就為我們切割DNA提供了多種特定的“手術(shù)刀”。但它們切割DNA后形成的末端有兩種可能,請同學看圖回答。生:一種形成黏性末端,一種形成平末端。師:那么這兩種末端是如何形成的呢?請從書中找到答案。生:限制酶在它識別序列的中心位置兩側(cè)將DNA兩條單鏈分割開,就形成黏性末端,而從識別序列的中心位置切開就產(chǎn)生平末端。教師點撥。學生看插圖。學生看書。學生看書,接著議論。引導學生與DNA酶作對比,在比較中準確認識限制酶。讓文字與插圖結(jié)合,使抽象的文字在直觀的插圖中得以體現(xiàn)。聯(lián)系舊知識,提供一個比較的

8、對象,在比較中加深對DNA連接酶的認識。4.學習“分子運輸車”基因進入受體細胞的載體。5.布置作業(yè)。師:切斷的DNA片段要與受體細胞的DNA連接,同學們根據(jù)以往學習的經(jīng)驗,能說出用什么酶嗎?生:用DNA復制中的DNA聚合酶。師:同學們想到用DNA聚合酶是很正常的,但是現(xiàn)在我們學習的這種連接與DNA復制中的連接有所不同。請看書后議論,由同學來回答。生:DNA連接酶是將雙鏈的DNA片段連接起來,而DNA聚合酶則是將一個個脫氧核苷酸連接起來。師:同學們說得對,但還不深刻。比如剛才說DNA連接酶是將雙鏈的DNA片段連接起來,就是說DNA連接酶是同時連接雙鏈的切口,而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個個脫氧

9、核苷酸連接起來。相同之處都是通過形成磷酸二酯鍵來連接的。請同學們在圖中正確指出其位置。師:開始時,我們學習了限制酶切割后有兩種不同的結(jié)果,一種產(chǎn)生黏性末端,一種產(chǎn)生平末端。那么恢復它們的連接,所用DNA連接酶是否可以不加選擇?同學們應從書中求得真知,自己解答這個問題。生:應該有所選擇。因為Ecoli DNA連接酶只能將雙鏈DNA片段黏性末端之間連接起來,不能將雙鏈DNA片段平末端之間連接起來。 T4 DNA連接酶既可“縫合”雙鏈黏性末端, 也可“縫合”雙鏈DNA的平末端, 但平末端之間連接的效率比較低。師:單純的DNA片段是很難導入受體細胞的,所以我們將切割下來的目的基因?qū)胧荏w細胞就需要有一

10、個“分子運輸車”幫助。不是任何的“分子運輸車”都可以用來作目的基因進入受體細胞的載體的。其中的理由要從實際情況出發(fā)考慮才能清楚。下面老師提出四個問題供大家思考。教師點撥。利用插圖。看書學習。將局部問題整合到實際工作的全過程中思考。學生討論。學生歸納。學生結(jié)合插圖尋找。提高學生思維的深刻性。準確認識DNA連接酶的作用部位。解決本課的難點。提出問題,誘導思考,解決難點。培養(yǎng)思維的廣闊性。培養(yǎng)學生的歸納能力。利用插圖加深對載體必須具備條件的認識。1.假如目的基因?qū)胧荏w細胞后不能復制將怎樣?2.作為載體沒有切割位點將怎樣?3.目的基因是否進入受體細胞,你如何去察覺?4.如果載體對受體細胞有害將怎樣?

11、不能分離會怎樣?生:1.導入受體細胞的目的基因不能復制,將在細胞增殖中丟失。2.載體沒有切割位點,外源的目的基因不可能插入。3.如果載體上有遺傳標記基因,這樣,在載體進入受體細胞后,就可通過標記基因的表達來檢測。4.載體對受體有害,將影響受體細胞新陳代謝,進而使轉(zhuǎn)入的目的基因也無立足之地。載體不能分離,就不能獲得更多帶有目的基因的載體。師:可見以上內(nèi)容,都是在選擇合適載體時必須考慮的。請同學們閱讀課文,歸納出充當基因進入受體細胞載體的必要條件。生:1. 能自我復制;2. 有切割位點;3. 有遺傳標記基因;4. 對受體細胞無害、易分離。師:目前通常利用的載體是“質(zhì)?!?。質(zhì)粒是能“友好”寄宿在細菌

12、細胞內(nèi)的小型的環(huán)狀DNA。下面讓我們通過插圖一起來認識質(zhì)粒,尤其要在質(zhì)粒載體結(jié)構(gòu)模式圖上找出剛才歸納幾個條件的具體體現(xiàn)。生:找到“復制原點”說明質(zhì)粒能復制并能帶著插入的目的基因一起復制。找到“目的基因的插入位點”說明質(zhì)粒有切割位點。課內(nèi)與課外結(jié)合。體現(xiàn)基礎知識的準確運用。在運用中加深對基礎知識的深層次理解。找到“氨芐青霉素抗性基因”說明有標記基因的存在,將來可用含青霉素的培養(yǎng)基鑒別。找到此質(zhì)粒來自大腸桿菌說明沒有危害,大腸桿菌是非致病菌,大腸桿菌分裂快,也便于從大量復制個體中分離出來。1.完成書后練習題。2.認真完成模擬制作DNA重組模型。希望大家動手、動腦協(xié)調(diào)配合,體會每一步驟在基因重組中的真實含義。最后結(jié)束時加強反思,回答書中提出的兩個問題。 希望對大家有所幫助,多謝您的瀏覽!

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