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湖南省高考生物復(fù)習(xí) 生物技術(shù)實(shí)踐 第3講 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課件 新人教版選修1

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1、 一、菊花的組織培養(yǎng) 【答案】全能性脫分化再分化種類年齡微量元素維生素甘氨酸煙酸生長素細(xì)胞分裂素5.8接種移栽 【答案】全能性四分體時期單核期雙核期 脫分化胚狀體21.愈傷組織 二、月季的花藥培養(yǎng) 【答案】22.初花期23.完全未開放24.單核期細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期25.醋酸洋紅法26.焙花青鉻礬法27.紅28.藍(lán)黑29.從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織30.徹底去除花絲31.愈傷組織32.胚狀體33.長出愈傷組織34.分化培養(yǎng)基上35.幼小植株分開 一、植物組織培養(yǎng)的過程 1.菊花的組織培養(yǎng)過程 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關(guān)鍵 1影響因素 (1)內(nèi)部因素:材料的選取。 (2)外部因素

2、:營養(yǎng)成分的種類及配比;植物激素的用量及使用順序;pH、溫度、光照等。 2獲得成功的關(guān)鍵 (1)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗逆性差,對培養(yǎng)條件要求較高。 (2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染,就會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。原因是微生物增殖快,生長迅速,消耗養(yǎng)分多,并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。 (3)無菌技術(shù)主要包括對操作空間、實(shí)驗(yàn)用具、實(shí)驗(yàn)材料以及操作者的消毒滅菌。 【友情提醒】一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染,特別是真菌性污染,一定不要打開培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,然后再打開培養(yǎng)瓶進(jìn)行清理。 三、植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長素,后使用細(xì)胞分

3、裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素細(xì)胞既分裂又分化同時使用分化頻率提高 生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,其作用及特點(diǎn)為: 1在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢。 2使用順序不同,結(jié)果不同,具體如下: 3.用量比例不同,結(jié)果也不同:生長素/細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促進(jìn)根分化,抑芽形成比值低時促進(jìn)芽分化,抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織的形成 四、實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)注意的幾個問題 1材料的選取:菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝;月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。 2外

4、植體消毒:所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。 3培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照,月季花藥的培養(yǎng)不需光照,而在后期均需光照。 【例1】利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、大量繁殖植物,在培養(yǎng)過程中,取該植物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例的生長素和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中,花芽的生長狀況如下表所示:生長素細(xì)胞分裂素花芽生長狀況A組花芽00組織切塊B組花芽3 ppm0.2 ppm形成愈傷組織C組花芽3 ppm0.002 ppm愈傷組織分化出根D組花芽0.03 ppm1.0 ppm愈傷組織分化出嫩枝E組花芽00.2 ppm稍生長 (1)在此過

5、程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽是_組。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,能誘導(dǎo)新的花芽形成的條件是_。 (2)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明,在植物組織培養(yǎng)過程中,誘導(dǎo)芽和根形成的關(guān)鍵是培養(yǎng)基中_。 在生產(chǎn)實(shí)踐中,欲快速、大量獲得此植物的花芽,可選用_組的培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)。 【解析】脫分化、再分化過程與植物激素生長素和細(xì)胞分裂素有關(guān),且生長素用量與細(xì)胞分裂素用量直接影響培養(yǎng)過程。當(dāng)生長素/細(xì)胞分裂素比值高時,有利于根的分化,抑制芽的分化,即表中的C組;當(dāng)生長素/細(xì)胞分裂素比值低時,有利于芽的分化,抑制根的分化,即表中的D組;當(dāng)比值適中時,有利于促進(jìn)愈傷組織的生長,即表中的B組。欲快速、大量獲得此植物的花芽,必須首先獲得大量的嫩

6、枝。 【答案】 (1)B、C、D細(xì)胞分裂素濃度大于生長素濃度 (2)細(xì)胞分裂素含量與生長素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素的濃度比)D 1.(2008江蘇)下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是( ) A培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化 C離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同D 【解析】此題考查學(xué)生對植物組織培養(yǎng)技術(shù)的掌握。培養(yǎng)基中加入蔗糖的目的:一方面可以提供營養(yǎng),另一方面可以調(diào)節(jié)滲透壓;在整個組織培養(yǎng)過程中影響再分化的關(guān)鍵是生長素和

7、細(xì)胞分裂素的使用比例和使用順序;組織培養(yǎng)過程中的第一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)是脫分化,從而形成愈傷組織;組織培養(yǎng)的對象既可以是體細(xì)胞也可以是生殖細(xì)胞,因此獲得的愈傷組織的基因組成不一定相同,采用綠色開花植物的生殖器官部位如花藥進(jìn)行培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因只有體細(xì)胞的一半。 2.(2009山東)人參是一種名貴中藥材,其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下: 請回答: (1)配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基,分裝后要進(jìn)行_。接種前,要對人參根進(jìn)行_。 (2)用于離體培養(yǎng)的根切塊,叫做_。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染,若是有顏色的絨毛狀菌落,屬于_污染;若是有光澤的黏液狀菌落,屬于_污

8、染。滅菌消毒外植體真菌(霉菌)細(xì)菌 (3)用少量_酶處理愈傷組織,獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán),在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng),可有效提高人參皂苷合成量。 (4)人參皂苷易溶于水溶性(親水性)有機(jī)溶劑,從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用_方法,操作時應(yīng)采用_加熱。果膠萃取(浸取)水浴 【解析】山東理綜生物試題的選修1試題,歷年來,都是立足課本,主要考查課本的基礎(chǔ)知識,題目較簡單。以植物組織培養(yǎng)為材料背景考查了植物組織培養(yǎng)過程中涉及的培養(yǎng)基及消毒滅菌的相關(guān)知識及污染后的菌落特征的比較。同時考查了選修1中關(guān)于物質(zhì)的提取和鑒定的專題,跨度較大,考查的知識面較廣。 (1)接種前,要對材料進(jìn)行消毒(不能填滅菌,滅菌時是采用強(qiáng)烈的因素殺菌),配制培養(yǎng)基并分裝后要用滅菌鍋滅菌。 (2)比較菌落特征: 真菌污染:有顏色的絨毛狀菌落;細(xì)菌污染:有光澤的黏液狀菌落。 (3)利用果膠酶處理愈傷組織可以獲得單個的細(xì)胞。 (4)由題干知,人參皂苷易溶于親水性有機(jī)溶液,故而采用萃取的方法可以從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷。

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