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1、專題二細胞工程知識排查考點詮解一、植物組織培養(yǎng)1植物組織培養(yǎng)技術(1)細胞的全能性是指具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。(2)在生物的生長發(fā)育過程中，細胞未表現出全能性的原因是細胞中的基因在特定的時間和空間條件下選擇性表達出各種蛋白質。(4)植物組織培養(yǎng)的概念：在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整植株。特別提醒：細胞具有全能性與脫分化和再分化(1)細胞全能性的原因：生物體的每個細胞都具有發(fā)育成完整個體所必需的全部基因。(2)細胞全能性的比較：受精卵生殖細胞

2、體細胞植物細胞動物細胞分化程度低的細胞分化程度高的細胞(3)細胞全能性的實現：植物細胞在離體、一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件下，經脫分化和再分化可實現其全能性，發(fā)育為完整個體。離體的動物體細胞，全能性受到限制，但其核仍具有全能性，但需借助卵細胞的細胞質才能表現出來。(4)在愈傷組織的誘導階段應避光，進行暗培養(yǎng)有利于細胞的脫分化，而在愈傷組織的分化再生階段要進行光照。(5)誘導培養(yǎng)基和分化培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分相同，但在激素的種類、含量及比例上有所區(qū)別。(6)植物組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)階段也不同：若是進行植物微型繁殖，應培養(yǎng)成植株幼苗；若是生產人工種子，應培養(yǎng)成具有生根發(fā)芽能力的胚狀體；若是生產

3、細胞產品，則可培養(yǎng)到愈傷組織，從大量培養(yǎng)的愈傷組織中提取產品，如紫草素、紫杉醇等。3人工種子(1)制備過程：離體組織誘導植物愈傷組織體細胞胚的誘導體細胞胚的成熟體細胞胚的包裹儲藏或種植。(2)結構：目前研制的人工種子，是由胚狀體、人工種皮和提供胚狀體發(fā)育所需營養(yǎng)的人工胚乳三部分組成，如上圖所示。(3)人工種子的優(yōu)點：保持優(yōu)良品種的遺傳特性。生產上不受季節(jié)限制，且可工廠化生產?？朔嗽嚬苊绱罅績Σ睾瓦\輸的困難。人工胚乳中除含有胚狀體發(fā)育所需的營養(yǎng)物質外，還可以添加各種附加成分，如固氮細菌、防病蟲農藥、除草劑和植物激素類似物等，有利于幼苗茁壯成長，提高作物產量。(4)人工種子與自然種子的區(qū)別：人工

4、種子是通過組織培養(yǎng)(無性生殖)形成的，能保持親本的優(yōu)良性狀，而自然種子是通過有性生殖形成的，具更大的變異性。(3)植物體細胞雜交的結果是獲得雜種植株，整個過程包括細胞融合和植物組織培養(yǎng)兩個階段。(4)雜種植物之所以具有兩個親本性狀的根本原因在于其內含有兩個親本的遺傳物質。3應用：可突破生殖隔離，克服遠緣雜交不親和的障礙，實現不同物種間的遺傳物質重組，從而獲得異源多倍體。三、動物細胞培養(yǎng)1概念：從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。動物細胞培養(yǎng)技術是其他細胞工程技術的基礎。2過程(1)取材：一般選取動物胚胎或幼齡動物的組織或器官。(2)制備

5、細胞懸液：將材料剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使之分散成單個細胞，然后用培養(yǎng)液稀釋制成細胞懸液。(3)原代培養(yǎng)：動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，細胞會出現貼壁生長和接觸抑制現象。(4)傳代培養(yǎng)：對貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)的過程稱為傳代培養(yǎng)。細胞在傳至1050代左右時其增殖會逐漸緩慢，以至于停止增殖，但部分細胞因細胞核型發(fā)生變化，會朝向等同于癌細胞的方向發(fā)展。3培養(yǎng)條件(1)無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝產物。(2)營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基的成分包括糖、氨基酸、促生長因子、

6、無機鹽、微量元素等，在使用時，通常需加入血清、血漿等。(3)溫度和pH：適宜溫度為36.50.5 ，pH為7.27.4。(4)氣體環(huán)境：所需氣體主要有O2和CO2，其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。4應用(1)制備有價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。(2)轉基因動物的培育。(3)檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性。特別提醒：動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較見下表。動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)理論基礎(原理)細胞增殖細胞的全能性培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基，含營養(yǎng)物質、動物血清等固體或半固體培養(yǎng)基，含營養(yǎng)物質、激素等動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)結果大量產生細胞或細胞產品獲得新個體或細胞產品用途生

7、產蛋白制品轉基因動物的培育檢測有毒物質生產細胞產物轉基因植物的培育作物新品種的培育微型繁殖、作物脫毒、生產人工種子四、動物體細胞核移植技術和克隆動物1概念：將一個動物細胞的細胞核，移入一個去核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。2分類：哺乳動物核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，由于動物體細胞分化程度高于胚胎細胞，因此動物體細胞核移植的難度更高。3過程(1)供體細胞的采集和培養(yǎng)。(2)受體細胞(卵母細胞)采集后，在體外培養(yǎng)到減數第二次分裂中期，并用微型吸管吸出細胞核與第一極體。(3)將供體細胞注入去核卵母細胞后

8、，通過電刺激使兩細胞融合，構建重組胚胎。(4)將重組胚胎移入代孕母體體內，發(fā)育成與供體遺傳物質相同的個體。4應用(1)加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育。(2)保護瀕危物種。(3)生產醫(yī)用蛋白。(4)作為異種移植的供體。(5)用于組織器官的移植。(6)了解胚胎發(fā)育和衰老過程。(1)供體細胞應選取優(yōu)良動物的體細胞，一般選用傳代培養(yǎng)10代以內的細胞。(2)受體細胞應選用處于減數第二次分裂中期的去核卵母細胞，因處于此期的細胞具備與精子受精的能力。(3)將供體細胞注入去核卵母細胞后，需用電刺激或化學方法處理，激活受體細胞，使其完成減數分裂并發(fā)育為早期胚胎。(4)生產出的克隆動物的性狀與供體動物基本

9、相同，但由于受體動物的細胞質基因也要控制性狀，因此克隆動物并不完全和供體動物相同。(5)此過程涉及動物細胞培養(yǎng)、顯微注射技術、胚胎移植等技術操作。五、動物細胞融合與單克隆抗體1動物細胞融合(1)概念：兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。(2)常用的誘導因素：聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。(3)意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。2單克隆抗體(1)制備過程：對小鼠注射特定的抗原蛋白，以使其產生相應的B淋巴細胞。B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，可形成多種雜交細胞。用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，未融合的親本細胞和融

10、合的具有同種核的細胞會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長。對雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，可獲得能分泌所需抗體的細胞。將能產生特定抗體的雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內增殖或體外培養(yǎng)，可獲得大量的單克隆抗體。(2)雜交瘤細胞特點：既能大量繁殖，又能產生專一抗體。(3)單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產量大。(4)單克隆抗體的應用：作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質并特異性地與之結合。用于治療疾病和運載藥物：制成“生物導彈”。熱點突破題型一植物組織培養(yǎng)及應用典例1香蕉原產熱帶地區(qū)，是我國南方重要的經濟作物之一。廣東省冬季常受強寒潮和霜凍影響，對香蕉生長發(fā)育影響很大。由香蕉束頂病毒(BBTV，

11、單鏈環(huán)狀DNA病毒)引起的香蕉束頂病，對香蕉生產的危害十分嚴重。當前香蕉栽培品種多為三倍體，由于無性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遺傳變異性，因此利用基因工程等現代科技手段提高其種植水平，具有重要意義。請根據上述材料，回答下列問題：(1)簡述香蕉大規(guī)模快速繁殖技術的過程。(2)脫毒香蕉苗的獲得，可采用_的方法，此方法的依據是_和_。(3)建立可靠的BBTV檢測方法可以監(jiān)控脫毒香蕉苗的質量，請問可用哪些方法檢測病毒的存在？(列舉兩種方法)(4)在某些深海魚中發(fā)現的抗凍蛋白基因 afp對提高農作物的抗寒能力有較好的應用價值，該基因可以從這些魚的DNA中擴增得到。試述在提取和純化DNA時影響提純效果

12、的因素及其依據。(列舉兩點)(5)如何利用afp基因，通過轉基因技術獲得抗寒能力提高的香蕉植株？在運用轉基因香蕉的過程中，在生態(tài)安全方面可能會出現什么問題？(列舉兩點)(6)從細胞工程的角度出發(fā)，簡述一種培育抗寒香蕉品種的方法及其依據。另外，抑制果膠裂解酶的活性可以延長香蕉果實儲藏期，請描述采用蛋白質工程技術降低該酶活性的一般過程。解析：香蕉是三倍體、高度不育，要大規(guī)?？焖俜敝?，只能通過植物組織培養(yǎng)，培育人工種子進行繁殖；植物的莖尖、根尖不帶病毒，可通過組織培養(yǎng)的方式獲得脫毒苗；用細胞工程的方法培育抗寒香蕉品種，應該采用體細胞雜交技術，讓不同品種的體細胞進行融合，通過對雜種細胞進行組織培養(yǎng)獲得

13、新個體，從中篩選出所需類型。答案：(1)選取香蕉外植體，通過誘導脫分化產生愈傷組織，然后通過調整植物激素比例，再分化形成芽和根，獲得大量試管苗(或通過誘導形成大量胚狀體，制成人工種子，適宜條件下萌發(fā)長成幼苗)。(2)莖尖(分生組織)組織培養(yǎng)莖尖不帶病毒(或病毒在植物體內分布不均勻)植物細胞全能性(3)BBTV病毒基因的檢測(DNA分子雜交技術)；BBTV病毒蛋白的檢測(獲得抗血清，利用抗原抗體的雜交反應，判斷病毒是否存在)。(4)選擇NaCl溶液的合適濃度，利用DNA和其他雜質在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同的特性，達到分離目的；加入一定量酒精，使部分蛋白質雜質溶解于酒精，與DNA分離；加入

14、蛋白酶，除去蛋白質雜質的干擾；控制DNA提取的溫度，使大多數蛋白質雜質變性。(答出其中兩點即可)(5)將afp基因插入土壤農桿菌的質粒中，構建表達載體，通過農桿菌的轉化導入香蕉受體細胞，成功轉化的香蕉細胞通過組織培養(yǎng)形成植株。生態(tài)安全問題包括：外源基因擴散到其他物種(外源基因漂移)；轉基因植株擴散影響生態(tài)系統的結構和功能；轉基因植株擴散對生物多樣性的影響；轉基因植物殘體或分泌物對環(huán)境的影響。(答出其中兩點即可)(6)體細胞雜交育種，其依據是將不同品種的香蕉體細胞利用體細胞雜交技術融合成雜種細胞后培育出抗寒香蕉品種(或體細胞誘變育種，其依據是利用誘變劑等方法使香蕉離體培養(yǎng)的細胞發(fā)生基因突變，然后

15、篩選培育出抗寒品種)。蛋白質工程方法的步驟為：果膠裂解酶蛋白的功能分析；果膠裂解酶蛋白的結構預測和設計；果膠裂解酶基因的改造。題型二植物體細胞雜交典例2葉肉細胞原生質體的分離和培養(yǎng)的主要過程可以用下面的圖解簡單表示，根據圖解回答問題：(1)圖解中“酶解”所用的酶應該包括_和_。(2)原生質體的結構由_三部分組成。(3)在培養(yǎng)基的成分中，除了各種營養(yǎng)成分外，還必須含有_、_才能誘導獲得愈傷組織。(4)獲得原生質體后，需要對其活力進行檢查，下列最適合的實驗是_。A觀察原生質體的結構是否完整B觀察細胞質流動C觀察細胞的有絲分裂D觀察葉綠體數目的多少(5)一般在培養(yǎng)基上培養(yǎng)2448 h后，大部分原生質

16、體已再生出細胞壁?？梢酝ㄟ^取樣，利用25%蔗糖溶液以及其他用具，通過_實驗來鑒別細胞壁是否已經再生。解析：對植物細胞酶解的目的是除去細胞壁，植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此酶解所需的酶是纖維素酶和果膠酶。原生質體包括細胞膜、細胞質和細胞核三部分。在植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中必須含有合適比例的生長素和細胞分裂素才能促使原生質體形成愈傷組織。活細胞的細胞質具有流動性，因此要對原生質體的活力進行檢查時，觀察細胞質流動最適合。植物細胞有無細胞壁再生，可以通過質壁分離和復原的實驗來驗證。答案：(1)纖維素酶果膠酶(2)細胞膜、細胞質、細胞核(3)生長素細胞分裂素(4)B(5)植物細胞的質壁分離和復原

17、題型三動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應用典例3某研究小組進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：(1)將數量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數量比乙細胞數量_。(2)在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是_。細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是_。(3)在兩種細胞生長過程中，當乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長_。藥物試驗需要大量細胞，兩種細胞頻繁傳代，甲細胞比乙細胞可以傳代的次數

18、更_。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用_消化處理。(4)為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_。(5)已知癌基因X過量表達與肝腫瘤的發(fā)生密切相關，要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，可將甲細胞分為A、B兩組，A組細胞培養(yǎng)液中加入一定量的_，B組細胞培養(yǎng)液中加入等量的無菌生理鹽水，經培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細胞中的_或_合成水平的差異，確定抗腫瘤藥物Y的藥效。解析：本題考查動物細胞培養(yǎng)及實驗設計遵循的單一變量原則，以及對實驗結果進行分析總結得出結論的能力。癌細胞比正常細胞具有更強的生命活力，分裂速度更快，培養(yǎng)相同時間得到數

19、量更多。動物細胞培養(yǎng)基需有糖類(葡萄糖)、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，通常還要添加一定量血清或血漿，另外還要有適量O2和CO2，需適宜的溫度和pH，還要有嚴格的無菌環(huán)境，可通過添加抗生素防止培養(yǎng)過程中雜菌滋生。癌細胞無接觸抑制現象，但正常細胞有，因而會有貼壁生長現象，需定期用胰蛋白酶處理。另外實驗設計設置對照組，要遵循單一變量原則。答案：(1)多(2)血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質維持培養(yǎng)液pH(3)停止多胰蛋白酶(4)抗生素(5)藥物Y溶液mRNA蛋白質題型四克隆哺乳動物典例4在某一局部山區(qū)有一種雌性黑牛A，與一種雄性黃牛B交配，由于某種原因，其后代中無雄牛出現，但為了在自然

20、情況下延續(xù)種族，雌性黑牛A只能與另一山區(qū)的雄性黃牛C交配，后代中才有雄牛出現。(1)請分析，導致局部山區(qū)無雄性小牛出現的原因很可能是_。(2)請你利用現代科學技術手段，設計一種方案，使某局部山區(qū)的雌性小牛不與另一山區(qū)的雄性小牛交配，就能得到一種雄性小黃牛。設計的理論依據：_。主要的設計方案：_。_。_。(3)上述方案設計中得到雄性小黃牛的性狀表現特點是_，作出這一判斷的依據是_；這頭雄性小黃牛與題中A、C交配得到的雄性小黃牛是否有區(qū)別？_，理由是_。解析：(1)由題干信息可知，后代無雄性小牛，說明含Y染色體的精子不能正常發(fā)育。(2)若不通過有性雜交的方式生產雄性小牛，可通過體細胞核移植技術。(

21、3)克隆動物的性狀主要與供體動物相似，而有性生殖產生的后代則具有兩個親本的性狀。答案：(1)該環(huán)境條件下可能使含Y染色體的精子致死(2)細胞的全能性細胞核移植：取B的體細胞核移植到去核的A卵細胞中，得到重組細胞動物細胞培養(yǎng)：將重組細胞在適宜的條件下培養(yǎng)，形成早期胚胎胚胎移植：將上述獲得的胚胎，再移植到A的體內(子宮)讓其發(fā)育，即可得到雄性小黃牛(3)其性狀主要與B相似(少部分性狀可能與A相同)生物的性狀主要受細胞核基因控制，少數性狀受細胞質基因控制，而這頭小黃牛的細胞核基因來自于B，細胞質基因來自于A有此雄性小黃牛系無性生殖的產物，而A、C交配得到的雄性小黃牛，則是有性生殖的產物題型五單克隆抗

22、體的制備典例5科學家從某些能無限增殖細胞的細胞質中分離出無限增殖調控基因(prG)，該基因能激發(fā)許多動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答以下相關問題。(1)利用細胞融合技術制備單克隆抗體，促進動物細胞融合常用的誘導因素是_。(2)利用細胞融合技術制備單克隆抗體時有兩次篩選，第1次篩選的目的是_。第2次篩選的目的是_。(3)有人提出，可以直接通過基因工程導入該調控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。請回答：酶A是指_，酶B是指_。對已導入重組質粒的進行“檢測”的目的是_；題目中所指的細胞是_，所指的細胞具有的特點是_。(4)也有人提出用細胞核移植技術構建重組細胞來生產

23、單克隆抗體，試用相關的圖示及文字表示該過程：解析：(1)誘導動物細胞融合的方法有三種，其中用滅活的病毒是常用方法。(2)在單克隆抗體制備過程中，融合的細胞共有3種形態(tài)，第1次篩選的目的是選出雜交瘤細胞，但是雜交瘤細胞不一定產生所需抗體，所以還必須進行第2次篩選。(3)基因工程中用到的酶是限制性核酸內切酶和DNA連接酶，將重組質粒成功導入后，進行檢測的目的是看目的基因是否表達。題目中所指的細胞是漿細胞，因為只有漿細胞才會產生抗體，所指的細胞是導入目的基因的漿細胞，由于目的基因控制細胞無限增殖，所以可用轉基因技術來生產單克隆抗體。(4)由題干可知，從無限增殖細胞的細胞質中分離出無限增殖調控基因(p

24、rG)，所以采用核移植技術，應將無限增殖細胞的核除去，留下細胞質，讓其與漿細胞核融合，則可產生單克隆抗體。答案：(1)滅活的病毒(2)篩選出雜交瘤細胞篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞(3)限制性核酸內切酶DNA連接酶檢測目的基因在受體細胞中是否進行了表達(或檢測受體細胞是否顯示出目的基因控制的性狀)漿細胞既能無限增殖又能產生特定抗體(4)見圖隨堂演練1用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是 ()A都需用CO2培養(yǎng)箱B都須用液體培養(yǎng)基C都要在無菌條件下進行D都可體現細胞的全能性解析：植物組織培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基不需用CO2培養(yǎng)箱，植物組織培養(yǎng)可得到完整的植物個體，體現了細胞的全能性，動

25、物細胞培養(yǎng)獲得的是動物細胞或代謝產物，未體現細胞的全能性；植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)均需要在無菌條件下進行。答案：C2下列關于植物體細胞雜交或植物細胞質遺傳的敘述，錯誤的是()A利用植物體細胞雜交技術可克服生殖隔離的限制，培育遠緣雜種B不同種植物原生質體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程C兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現型一致D兩個不同品種的紫茉莉雜交，F1的遺傳物質來自母本的多于來自父本的解析：植物體細胞雜交包括植物原生質體融合、植物組織培養(yǎng)兩個過程。利用植物體細胞雜交技術可克服物種間生殖隔離的限制，培育遠緣雜種。紫茉莉枝條顏色遺傳屬于細胞質遺傳，故兩個不同品種的紫茉莉雜交，

26、正交、反交所得F1的表現型不一致。因受精卵的細胞質幾乎全來自卵細胞，故兩個不同品種的紫茉莉雜交，F1的細胞質中遺傳物質幾乎全部來自母本。答案：C3(2010浙江理綜卷)將無根的非洲菊幼苗轉入無植物激素的培養(yǎng)基中，在適宜的溫度和光照條件下培養(yǎng)一段時間后，應出現的現象是() ABCD.解析： 無根幼苗可自身產生植物激素，誘導分化出根部。不可能脫分化形成愈傷組織，也不會在下部分化出芽。答案：A4(2010江蘇卷)(多選)明黨參是我國珍稀藥用植物，對其進行保護性開發(fā)利用的方法有()A設計細胞培養(yǎng)反應器，實現藥用成分的工廠化生產B大量培養(yǎng)愈傷組織，直接提取藥用成分C大規(guī)模栽培組織培養(yǎng)苗，獲取藥用成分D利

27、用組織培養(yǎng)獲得胚狀體，制成人工種子解析：明黨參是藥用植物，其內含有藥用成分，要大量提取藥用成分，可利用細胞培養(yǎng)反應器實現組織細胞的快速培養(yǎng)并提取大量有效成分，實現工廠化生產；也可以大量培養(yǎng)愈傷組織從中提取藥用成分；大規(guī)模栽培組織培養(yǎng)苗，獲取大量植株進而獲取藥用成分；用組織培養(yǎng)獲得的胚狀體制成人工種子，實現大量種植明黨參，也可獲得有效藥用成分。答案：ABCD5酶解法制備原生質體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛(以植物為食)消化腺中提??；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實驗小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實

28、驗結果列于下表。請回答有關問題。試管編號項目蒸餾水(mL)201111緩沖液(mL)0210.50.50.5果膠酶液(mL)0000.500蝸牛酶液(mL)00000.50纖維素酶液(mL)000000.5實驗結果(綠色深淺程度)(注：“”越多表示綠色越深，“”表示顏色無顯著變化)(1)實驗過程中，需要輕搖試管，其目的是_，使原生質體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。(2)從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有_等多種酶。該實驗中_是空白對照組，其設置意義是_。(3)用網篩過濾原生質體到離心管內，離心后收集沉淀物，并用_洗滌。(4)原生質體是否符合要求還需進行

29、檢驗，其檢驗的方法是_。解析：(1)底物與酶接觸的越充分，反應速率越大，從而可提高酶解的效果。(2)細胞壁的成分為纖維素和果膠，蝸牛酶液酶解效果最好，則其必含纖維素酶和果膠酶?？瞻讓φ諏嶒炛?，沒有實驗處理的為對照組。此實驗中無酶處理的為對照組。目的是為了排除無關變量對實驗的干擾。(3)離心管內的沉淀物為原生質體，為防止洗滌時被破壞，可用等滲溶液洗滌。(4)原生質體是否獲得成功，即看植物細胞的細胞壁是否被去凈。把獲得的材料放到低滲溶液中，檢測材料是否吸水漲破。答案：(1)為了使細胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果(2)果膠酶和纖維素酶、排除無關變量的干擾(3)等滲溶液(4)低滲漲破法6動物器官的體外

30、培養(yǎng)技術對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。(1)肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞_。(2)氣室中充入5%CO2氣體的主要作用是_。(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的_，以保證抗生素對肝臟無害。(4)有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素(刺激淋巴細胞分裂)；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液(使染色體著色)，有機物X溶液等。實驗過程：在淋巴細胞培

31、養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用。利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作(“、”表示已完成的步驟)。甲乙丙丁步驟一：加入肝臟培養(yǎng)液步驟二：加入有機物X溶液步驟三：放置肝臟小塊上表中還需進行的操作是_。培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察_，并對比分析。若丙組淋巴細胞出現異常，而甲組的淋巴細胞正常，則說明_。解析：(1)肝臟切成小薄片，有利于肝臟細胞通過濾紙從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)物質，同時有利于與外界進行氣體交換和自身的代謝廢物的排出。(2)組織培養(yǎng)時5%CO2有維持培養(yǎng)

32、液pH的功能。(3)抗生素的種類和劑量對使用的效果很重要。(4)由題可知甲組為該組實驗的實驗組，丙為無肝臟的對照組，那么乙或丁應為無有機物X的對照組。顯微鏡下可觀察到染色體的形態(tài)和數目。如果淋巴細胞出現異常，說明用來培養(yǎng)淋巴細胞的培養(yǎng)液中存在有機物X。丙組未加肝臟，而甲組加了肝臟，所以可說明肝臟對有機物X有解毒功能答案：(1)吸收氧氣和營養(yǎng)物質、排出代謝廢物(2)維持培養(yǎng)液適宜的pH(3)種類和劑量(4)向乙(或丁)組裝置中放置肝臟小塊染色體形態(tài)和數量肝臟小塊對有機物X具有解毒作用7人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為

33、主要抗原，其疫苗生產和抗體制備的流程之一如下圖請回答：(1)過程代表的是_。(2)過程構建A基因表達載體時，必須使用_和_兩種工具酶。(3)過程采用的實驗技術是_，獲得的X是_。(4)對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產的_所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內分離病毒，與已知病毒進行_比較；或用圖中的_進行特異性結合檢測。解析： 由RNA得到DNA的過程為逆轉錄；基因工程中常用的是限制酶和DNA連接酶；通過細胞融合得到雜交瘤細胞，才能具備兩個細胞的特點。答案：(1)逆(反)轉錄(2)限制性核酸內切酶(限制性內切酶、限制酶)DNA連接酶(注：兩空順序可顛倒)(3)細胞融合雜交瘤細胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體