知識點(diǎn)17 生物技術(shù)實(shí)踐1.(2018·江蘇高考·T14)下列關(guān)于酵母細(xì)胞固定化實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A.用溫水使海藻酸鈉迅速溶解,待其冷卻到室溫后用于包埋細(xì)胞B.進(jìn)行包埋時(shí),用于懸浮細(xì)胞的CaCl2溶液濃度要適宜C.注射器(或滴管)出口應(yīng)盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀D.包埋酵母細(xì)胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性【解析】選D。溶解海藻酸鈉應(yīng)將其加入水中,用酒精燈加熱,邊加熱邊攪拌,直至完全溶化,A項(xiàng)錯(cuò)誤;進(jìn)行包埋時(shí),對凝膠珠進(jìn)行處理的CaCl2溶液需要適宜的濃度,而不是用于懸浮細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;在制備凝膠珠時(shí),注射器(或滴管)出口應(yīng)與液面有一定的距離,以保證凝膠珠成為球狀,C項(xiàng)錯(cuò)誤。包埋酵母細(xì)胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并有一定的彈性,D項(xiàng)正確。2.(2018·江蘇高考·T16)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進(jìn)行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.夏季生產(chǎn)果酒時(shí),常需對罐體進(jìn)行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進(jìn)氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會(huì)低于大氣壓D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時(shí)終止發(fā)酵【解析】選B。果酒發(fā)酵過程中會(huì)放出熱量使罐體溫度上升,故需對發(fā)酵罐進(jìn)行降溫處理,A項(xiàng)正確;乙醇雖然為揮發(fā)性物質(zhì),但其能溶于水,而且酒精發(fā)酵為無氧呼吸,發(fā)酵過程中不需進(jìn)氣,B項(xiàng)錯(cuò)誤;發(fā)酵過程中有CO2產(chǎn)生,所以罐內(nèi)壓力不會(huì)低于大氣壓,C項(xiàng)正確;發(fā)酵程度可以通過監(jiān)測發(fā)酵液中殘余糖的濃度來確定,D項(xiàng)正確。3.(2018·江蘇高考·T21)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,錯(cuò)誤的是（多選）()A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來B.洗衣粉中的蛋白酶通常會(huì)將添加的其他酶迅速分解C.在50 熱水中用加酶洗衣粉洗衣時(shí),其中的酶會(huì)迅速失活D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存,不會(huì)影響其中酶的活性【解析】選B、C、D。加酶洗衣粉中添加的酶通常是通過基因工程由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來,A項(xiàng)正確;洗衣粉中添加的酶通常是由特殊的化學(xué)物質(zhì)包裹,蛋白酶不會(huì)分解其他酶,B項(xiàng)錯(cuò)誤;加酶洗衣粉中的酶的最適溫度通常在50 左右,所以在50 的熱水中使用,酶不會(huì)迅速失活,C項(xiàng)錯(cuò)誤;加酶洗衣粉要求保存在干燥、陰暗環(huán)境中,如果受潮后再晾干,其中的酶活性會(huì)下降,D項(xiàng)錯(cuò)誤。4.(2018·全國卷·T37)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液,在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制_的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有_(答出兩點(diǎn)即可),氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有_(答出兩點(diǎn)即可)。 (3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng)。平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_ _。 (4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133。乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是_。 【解析】本題考查物質(zhì)的合成、淀粉的鑒定及微生物的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)。(1)鏈霉素屬于抗生素,作用是抑制細(xì)菌的生長?？梢酝ㄟ^加入鏈霉素篩選出抗鏈霉素的細(xì)菌,屬于選擇培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有碳源、無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、生長因子等,氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸。(3)淀粉遇碘變藍(lán),所以應(yīng)加入的顯色劑是碘液。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈。(4)正確稀釋涂布平板,平板上的菌落數(shù)應(yīng)為30300。而乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差。答案:(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈 (4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差5.(2018·全國卷·T37)生物選修1:生物技術(shù)實(shí)踐在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題:(1)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。 (2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是_。 (3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能_。在照射前,適量噴灑_,可強(qiáng)化消毒效果。 (4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。 (5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的原因是_。 【解析】(1)玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具可以通過干熱滅菌的方法來滅菌。(2)巴氏消毒法是在7075 煮30 min或在80 下煮15 min,可以殺死牛奶中的微生物,并使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞;高溫瞬時(shí)消毒是在較短的時(shí)間內(nèi)利用高溫殺死微生物,由于時(shí)間較短,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)紫外線有消毒、滅菌的作用,在照射前,適量噴灑消毒液,可以強(qiáng)化消毒效果。(4)自來水消毒通常采用“氯氣”或“紫外線”等方法。(5)使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,但沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的原因是鍋內(nèi)冷空氣沒有排盡。答案:(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡6.(2018·全國卷·T37)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應(yīng)采用_滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到菌落,菌落的含義是_。 (2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí),若通入氧氣,可促進(jìn)_(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進(jìn)行厭氧培養(yǎng),可促進(jìn)_(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。 (3)制作面包時(shí),為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是_。 【解析】(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基含糖量高,更適合酵母菌培養(yǎng);該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌;若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí),若通入氧氣,進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2,釋放能量多,菌體增殖快;若進(jìn)行厭氧培養(yǎng),進(jìn)行無氧呼吸,產(chǎn)生乙醇和CO2,釋放能量少,菌體增殖慢。(3)制作面包時(shí),在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產(chǎn)生CO2,CO2是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。答案:(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟7.(2018·江蘇高考·T31)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進(jìn)行大量培養(yǎng)。如圖所示為操作流程,請回答下列問題:(1)配制培養(yǎng)基時(shí),按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的_,及時(shí)對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝,并進(jìn)行_滅菌。 (2)取步驟中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟中將溫度約_(在25 、50 或80 中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。 (3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有_。 a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和_供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度,將發(fā)酵液稀釋1 000倍后,經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色,用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù),理論上_色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于_,才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。 【解析】(1)不同種微生物生長所需的最適pH不同,所以,配制培養(yǎng)基時(shí),溶化后需調(diào)pH。分裝到試管中的培養(yǎng)基需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。(2)倒平板時(shí),錐形瓶中的培養(yǎng)基溫度控制在50 左右較適宜,溫度太低會(huì)凝固,太高會(huì)燙手。(3)挑取分離平板中長出的單菌落用于平板劃線時(shí)需注意題干中a、b、d所敘述的要點(diǎn),為了獲得專一酵母,只挑取效果最好的菌落就行,不需挑取多個(gè)菌落。(4)酵母在有氧條件下繁殖快,所以除了營養(yǎng)物質(zhì)外,還需提供充足的氧氣。對于死酵母通常用臺盼藍(lán)進(jìn)行染色,活酵母不會(huì)被染色。設(shè)5個(gè)中格中應(yīng)有m個(gè),據(jù)題意可得到等式:m×5×104×103=3×109,m=60個(gè)。但由于用等體積的臺盼藍(lán)染液進(jìn)行了染色,也被染液稀釋了一倍,所以無色酵母數(shù)應(yīng)不低于30個(gè)。答案:(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50 (3)a、b、d(4)氧氣無304