知識點20生物技術(shù)實踐1.(2014·江蘇高考·T16)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗敘述,錯誤的是()A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C.向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌,可見玻棒上有白色絮狀物 D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍【解題指南】關(guān)鍵知識:DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,隨著NaCl溶液濃度增大或降低,DNA在其中的溶解度增大?！窘馕觥窟xC。本題考查“DNA的粗提取和鑒定”實驗的選材、步驟和鑒定。原則上含DNA的生物材料都能作為提取DNA的材料,但是DNA含量高的材料,實驗成功的可能性更大,所以酵母和菜花可作為提取DNA的材料,故A正確;DNA在2mol/L NaCl溶液和蒸餾水中,溶解度較大,故B正確;向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌,雞血細胞會破裂,因DNA在蒸餾水中溶解度較大,故不會析出,C項錯誤;DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍,故D正確。2.(2014·江蘇高考·T18)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,正確的是()A.高溫易使酶失活,因此冷水洗滌去污效果應(yīng)該比溫水好B.洗衣粉中表面活性劑對堿性蛋白酶活性有一定的促進作用C.在pH低于7.0的自來水中,堿性蛋白酶依然能起作用D.洗衣粉中酶主要是通過快速分解溶在水里的污漬發(fā)揮作用【解題指南】關(guān)鍵知識:(1)加酶洗衣粉適宜的洗滌溫度和pH。(2)加酶洗衣粉去污原理是利用酶的催化作用使污漬分解成可溶物?！窘馕觥窟xC。本題考查加酶洗衣粉的使用。加酶洗衣粉中的酶在水溫4560時,能充分發(fā)揮洗滌作用。水溫高于60時,堿性蛋白酶失去活性,水溫低于15時,酶的活性迅速下降,影響洗滌效果,所以A錯誤;表面活性劑能影響堿性蛋白酶的活性,可能會使酶失活,因此B錯誤;堿性蛋白酶適宜的pH為6.08.5,故C正確;洗衣粉中的酶能把衣物上的油脂、蛋白質(zhì)等分解成可溶性的小分子物質(zhì),從而使其很容易被洗去,因而D錯誤。3.(2014·江蘇高考·T24)某同學設(shè)計了如圖所示的發(fā)酵裝置,下列有關(guān)敘述正確的是(多選)()A.該裝置可阻止空氣進入,用于果酒發(fā)酵B.該裝置便于果酒發(fā)酵中產(chǎn)生的氣體排出C.去除彎管中的水,該裝置可滿足果醋發(fā)酵時底層發(fā)酵液中大量醋酸菌的呼吸D.去除彎管中的水后,該裝置與巴斯德的鵝頸瓶作用相似【解題指南】(1)圖示信息:彎管沒有插入葡萄汁的液面下,且未通入無菌空氣,所以不能給底層的微生物提供氧氣。(2)關(guān)鍵知識:果酒和果醋發(fā)酵的原理、條件?！窘馕觥窟xA、B、D。本題考查果酒、果醋的制備。該裝置中注水的彎曲部分可阻止空氣進入,能用于果酒發(fā)酵,A正確;果酒發(fā)酵產(chǎn)生的CO2可溶解在彎管的水中,進一步通過水排出,B正確;醋酸菌是好氧菌,因彎管沒有插入裝置底部,且未通入無菌空氣,去除彎管中的水后也不能滿足底層發(fā)酵液中醋酸菌的呼吸需求,C錯誤;去除彎管中的水后,該裝置的彎管部分也能防止空氣中的微生物進入,與巴斯德的鵝頸瓶作用類似,D正確。4.(2014·廣東高考·T4)下列敘述錯誤的是()A.醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸 B.酵母菌在無氧條件下利用葡萄汁產(chǎn)生酒精C.泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸發(fā)酵 D.腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶【解題指南】(1)關(guān)鍵知識:細胞呼吸原理和生物技術(shù)在食品加工方面的應(yīng)用。(2)隱含信息:有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物應(yīng)用。【解析】選A。本題考查細胞呼吸原理和生物技術(shù)在生產(chǎn)應(yīng)用中的相關(guān)知識。A項中,醋酸菌釀醋時需要持續(xù)通氣,即利用醋酸菌的有氧呼吸,故錯誤。B項中,酵母菌是單細胞真核生物,在有氧條件下進行有氧呼吸,無氧條件下進行無氧呼吸,可以將有機物不徹底分解生成酒精和二氧化碳,并釋放少量的能量,從而可利用葡萄汁產(chǎn)生酒精,故正確。C項中,乳酸菌屬于厭氧型細菌,進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,可用于泡菜腌制,故正確。D項中,腐乳是豆腐在毛霉等微生物的作用下形成的,由于毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶,可將豆腐中的蛋白質(zhì)和脂肪分解成肽、氨基酸和甘油、脂肪酸等小分子物質(zhì),故正確。5.(2014·山東高考·T35)玉米是重要的糧食作物,經(jīng)深加工可生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下:(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時,該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長提供 。發(fā)酵過程中檢測酵母菌數(shù)量可采用法或稀釋涂布平板法計數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā),宜選用法或法從玉米胚芽中提取。(3)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用,從而降低生產(chǎn)成本。(4)利用PCR技術(shù)擴增葡萄糖異構(gòu)酶基因時,需用耐高溫的催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán),每次循環(huán)包括變性、和三步?！窘忸}指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“玉米秸稈”“玉米胚芽”和“玉米淀粉”。(2)關(guān)鍵知識:所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基,其含有碳源、氮源、無機鹽、水等;PCR技術(shù)與細胞內(nèi)DNA復(fù)制的最大區(qū)別是需要耐高溫的DNA聚合酶?！窘馕觥勘绢}主要考查微生物的培養(yǎng)和PCR技術(shù)。(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)水解后的產(chǎn)物為葡萄糖,葡萄糖可為酵母菌的生長提供碳源。酵母菌可用顯微鏡直接計數(shù)法或稀釋涂布平板法計數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā),因此不宜選用蒸餾法提取,可用壓榨法或萃取法提取。(3)利用固定化酶技術(shù)可使酶重復(fù)利用,從而降低生產(chǎn)成本。(4)PCR技術(shù)中應(yīng)選用耐高溫的DNA聚合酶催化,PCR的每次循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三步。答案:(1)碳源顯微鏡直接計數(shù)(2)壓榨萃取(注:兩空可顛倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶(低溫)復(fù)性(或退火)(中溫)延伸6.(2014·浙江·自選模塊·T17)“生物技術(shù)實踐”模塊下面是關(guān)于固定化酶和細菌培養(yǎng)實驗的問題,請回答:(1)某興趣小組欲利用固定化酶進行酶解淀粉的實驗,分組見下表。組別固定化酶柱長度(cm)淀粉溶液的流速(mL·min-1)甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5將吸附了-淀粉酶的石英砂裝入柱中后,需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱,以除去。按上表分組,將配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液進行KI-I2檢測。若流出液呈紅色,表明有生成,若各組呈現(xiàn)的顏色有顯著差異,則流出液中淀粉水解產(chǎn)物濃度最高的是組。(2)下列關(guān)于上述固定化酶實驗的敘述,錯誤的是 。A.固定化酶柱長度和淀粉溶液流速決定了酶柱中酶的含量 B.淀粉溶液流速過快會導致流出液中含有淀粉C.各組實驗所用的淀粉溶液濃度應(yīng)相同 D.淀粉溶液的pH對實驗結(jié)果有影響(3)現(xiàn)有一份污水樣品,某興趣小組欲檢測其中的細菌數(shù),進行以下實驗。將一定量的污水樣品進行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液,用法分別接種于固體平面培養(yǎng)基上,經(jīng)培養(yǎng)后進行計數(shù)。該實驗應(yīng)注意,接種前,從盛有的容器中將玻璃刮刀取出,放在酒精燈火焰上灼燒,冷卻后待用;分組時,需用作為對照。(4)在上述細菌培養(yǎng)實驗中進行計數(shù)時,應(yīng)計數(shù)的是接種了 。A.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數(shù) B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細菌數(shù)C.各個稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù) D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“固定化酶”“細菌培養(yǎng)”“接種”“計數(shù)”。(2)隱含信息:酶濃度對淀粉水解反應(yīng)的影響、pH等環(huán)境因素對酶活性的影響、底物淀粉與酶接觸面積對反應(yīng)速率的影響、微生物培養(yǎng)時防止雜菌污染的方法等?！窘馕觥勘绢}主要考查固定化酶應(yīng)用的相關(guān)知識。(1)題表中固定化酶柱長度代表所用固定化酶濃度的大小,長度越大酶柱中所含酶越多;淀粉溶液的流速決定了反應(yīng)物與酶柱中酶相互接觸的時間長短,流速越小,淀粉與酶越能充分接觸而反應(yīng)。淀粉遇KI-I2試劑顯藍色,而流出液中顯示紅色,說明大分子淀粉在酶的作用下水解。從表中可知,丙中酶柱較長,淀粉流速較小,最適合酶促反應(yīng),反應(yīng)速率最快。(2)設(shè)計實驗應(yīng)遵循對照原則、單因子變量原則,所以每組實驗中淀粉溶液濃度應(yīng)相同、溶液的pH均應(yīng)保持在淀粉酶的最適pH條件下,所以C、D項正確。淀粉溶液流速過快,酶與底物不能充分反應(yīng),流出的可能是沒有水解的淀粉,故B項正確。酶柱中酶的含量由酶柱長度決定,但是酶在反應(yīng)前后保持不變,所以淀粉溶液流速不能決定酶的含量,因此A項錯誤。(3)本實驗所接種細菌為不同稀釋度的菌液,而不是挑取菌落接種,應(yīng)用涂布分離法。微生物培養(yǎng)為防止雜菌污染需在無菌條件下進行,常用的消毒滅菌方法有消毒法:煮沸、巴氏消毒法、化學試劑消毒法(70%酒精);滅菌法:灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。(4)測定微生物數(shù)量的方法:直接計數(shù)法,此法利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量,但不能區(qū)分細菌死活;間接計數(shù)法,常用的是稀釋平板計數(shù)法,此法在含菌數(shù)較少的情況下,也可計數(shù),但需將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中微生物細胞分散開,為防止偶然性,應(yīng)計數(shù)合理稀釋度樣品培養(yǎng)基上的菌落數(shù),菌落易于觀察。通過以上分析,故D項正確。答案:(1)未吸附的-淀粉酶糊精丙(2)A(3)涂布分離70%酒精未接種的培養(yǎng)基(4)D7.生物選修1:生物技術(shù)實踐(2014·新課標全國卷·T39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將分解成。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲+-+培養(yǎng)基乙+-+注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是;培養(yǎng)基乙(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是 ?！窘忸}指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“纖維素酶”“剛果紅”。(2)隱含信息:兩種培養(yǎng)基中有瓊脂的為固體培養(yǎng)基,無瓊脂的為液體培養(yǎng)基;淀粉是微生物的碳源,不含纖維素粉不能作為分離和鑒別纖維素分解菌實驗的選擇培養(yǎng)基。(3)關(guān)鍵知識:土壤中某些微生物的分解作用和篩選纖維素分解菌的方法。【解析】本題主要考查纖維素酶的作用、剛果紅染色法、分離和鑒別纖維素分解菌的方法。(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被纖維素酶分解為葡萄糖,如圖:纖維素纖維二糖葡萄糖(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,且需要以纖維素為唯一碳源。答案:(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能分離單菌落不能培養(yǎng)基乙中沒有纖維素,不會形成CR-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌8.生物選修1:生物技術(shù)實踐(2014·新課標全國卷·T39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分離等工作。回答下列問題:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是;然后,將1 mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液;經(jīng)適當培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過滅菌,在第二次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是 。(3)示意圖A和B中,表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高的利用率?！窘忸}指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“先行培養(yǎng)”“振蕩培養(yǎng)”。(2)隱含信息:A圖中菌落是采用平板劃線法培養(yǎng)的結(jié)果,B圖中菌落分布相對均勻,為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果。(3)關(guān)鍵知識:稀釋涂布平板法檢測細菌含量、平板劃線法分離細菌。【解析】本題考查微生物培養(yǎng)、細菌分離的相關(guān)知識。(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物學實驗一般會設(shè)置空白對照:隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成;利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù):(2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌;在第二次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線,這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少,以便得到單個菌落。(3)根據(jù)示意圖A和B中生長出的菌落形態(tài),判定B圖中為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果(菌落分布相對均勻)。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量,促進好氧型微生物的生長;另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案:(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)9.(2014·四川高考·T10)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是 。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和,這些植物激素一般需要事先單獨配制成保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有 。(4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是,該實驗設(shè)計是否合理?為什么? ?！窘忸}指南】(1)圖示信息:利用選擇培養(yǎng)基分離降解苯磺隆的菌株,取菌株產(chǎn)生的蛋白酶分解苯磺隆。(2)關(guān)鍵知識:微生物的培養(yǎng)基成分、植物組織培養(yǎng)、微生物的接種、對照原則?！窘馕觥勘绢}考查微生物的培養(yǎng)及對照實驗的設(shè)計原則。(1)微生物的培養(yǎng)基主要含有水、碳源、氮源和無機鹽四類營養(yǎng);選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長,又要抑制或阻止其他種類微生物生長,因而必須以苯磺隆為唯一碳源,只讓目的菌株生長繁殖。(2)植物組織培養(yǎng)中啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素,為了避免每次配制時都要稱量,可將植物激素先配成母液。(3)接種環(huán)在平板內(nèi)的第二次劃線起,都要先灼燒滅菌冷卻后劃線,而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線,不冷卻會燙死上一次劃線末端的菌株,從空白處劃線會無菌株。(4)從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知,蛋白酶是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的,由此可判定實驗假設(shè)是目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì),但是還需設(shè)計不加入蛋白酶的對照組。答案:(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻;劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對照10.(2014·江蘇高考·T29)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題:(1)外植體經(jīng)誘導后形成愈傷組織的過程稱為。(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時,細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細胞干重在12 d后下降的原因有;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、。(3)多倍體愈傷組織細胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經(jīng)處理,會產(chǎn)生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和 酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經(jīng)誘導處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細胞,合理的解釋是、。 (4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有(填序號)。選取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋 必須在光照條件下培養(yǎng)培養(yǎng)過程中需通空氣 固定化后植物細胞生長會變慢【解題指南】(1)題干中有文字“在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時,細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化”,從而推斷圖中曲線的含義。(2)關(guān)鍵知識:植物組織培養(yǎng)、染色體變異及細胞固定化?！窘馕觥勘绢}考查植物組織培養(yǎng)、誘導染色體加倍、有絲分裂、酶的固定化技術(shù)。(1)外植體在人工、無菌條件下,經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)由圖蔗糖濃度下降可知,外植體離體培養(yǎng)過程中需要消耗蔗糖,12天后蔗糖濃度較低;pH下降會影響酶的活性,愈傷組織細胞對物質(zhì)的合成少于分解,細胞干重下降。植物組織培養(yǎng)過程中,蔗糖既能維持一定的滲透壓,又能提供植物細胞生命活動必須的營養(yǎng)物質(zhì)(能量)。(3)一定濃度的秋水仙素或低溫都可抑制紡錘體的形成,使子染色體不能移向兩極,從而使細胞中染色體數(shù)目加倍。植物細胞壁的成分主要是纖維素和果膠,可通過纖維素酶、果膠酶破壞細胞壁,從而使愈傷組織細胞分離。在用秋水仙素或低溫處理后,會出現(xiàn)染色體為2n、4n、8n等的細胞,4n的細胞在有絲分裂后期著絲點分裂,染色體數(shù)目加倍至8n;8n的細胞在有絲分裂中期能清晰看出8n條染色體。(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,應(yīng)選用生長旺盛的愈傷組織細胞。愈傷組織不能進行光合作用,因此要通入無菌空氣確保其正常的生命活動。細胞的固定化通常使用包埋法,由于包埋材料的影響,營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的擴散都受到一定的限制,所以固定化細胞生長速度會變慢。答案:(1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓(3)秋水仙素(低溫)果膠經(jīng)加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期(4)11.(2014·江蘇高考·T30)為了獲得-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實驗。請回答下列問題:(1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)該。(2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是。(3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是。(填序號)安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是 。(5)為增加-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細胞時,添加石英砂的目的是;研磨時(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是?！窘忸}指南】(1)圖示信息:滅菌鍋及其局部剖面示意圖,從而推斷甲、乙、丙指示的結(jié)構(gòu)名稱。(2)關(guān)鍵知識:微生物的培養(yǎng)與分離純化、色素的提取?！窘馕觥勘绢}考查微生物培養(yǎng)中的滅菌、接種技術(shù)、滅菌鍋的構(gòu)造、色素提取的操作。(1)滅菌常用方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌等,培養(yǎng)皿常用高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌。將培養(yǎng)皿放入滅菌鍋之前通常用牛皮紙或報紙包扎避免滅菌后的再次污染。(2)青霉素能破壞細菌的細胞壁并在細菌的繁殖期起殺菌作用,因此添加青霉素可抑制細菌的生長。(3)乙連接軟管為排(放)氣閥,甲為安全閥,丙是壓力表。(4)3塊平板有兩塊平板長有菌落,說明含有菌株并可在培養(yǎng)基上生長;而其中一塊未見菌落,說明菌株死亡,最可能的原因是接種過程中接種環(huán)灼燒后未冷卻或未足夠冷卻,使菌株因溫度過高被殺死。(5)石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物質(zhì),-胡蘿卜素較耐酸,因此不需添加CaCO3。答案:(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細菌(放線菌)生長(3)(4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要-胡蘿卜素較耐酸12.(2014·海南高考·T30)生物選修1:生物技術(shù)實踐已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量,某同學設(shè)計了一個實驗,實驗材料、試劑及用具包括:刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。回答相關(guān)問題:(1)請完善下列實驗步驟。標準管的制備:用和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管。樣品管的制備:用刻度移液管分別吸取一定量的,加到不同的比色管中,然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色,得到樣品管。將每個分別與系列標準管進行比較,找出與樣品管顏色深淺的標準管,該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量,記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。(2)下圖表示的是泡菜中趨勢。(3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細菌主要是(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。【解題指南】(1)題干關(guān)鍵詞:“泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關(guān)”。(2)關(guān)鍵知識:亞硝酸鹽含量的測定、泡菜的制作原理?！窘馕觥勘绢}主要考查泡菜制作原理及亞硝酸鹽含量測定的相關(guān)知識。(1)在亞硝酸鹽的含量測定中,用不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管;用刻度移液管分別吸取一定量的不同泡制天數(shù)的泡菜濾液,加到不同的比色管中,然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色,得到樣品管;將每個樣品管分別與系列標準管進行比較,找出與樣品管顏色深淺相近的標準管,該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量,記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。(2)據(jù)圖可知,該圖表示亞硝酸鹽的含量隨發(fā)酵時間的變化曲線。(3)制泡菜時使用的微生物是乳酸菌。答案:(1)不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液不同泡制天數(shù)的泡菜濾液樣品管相同(相近)(2)亞硝酸鹽含量的變化(3)乳酸菌13