考點76 DNA的粗提取與鑒定 1實驗原理（1）DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同溶解規(guī)律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L逐漸降低的過程中，溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進一步分離。（3）DNA與二苯胺沸水浴加熱，呈藍色。2操作流程 考向 DNA的粗提取與鑒定過程分析 1下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是A雞血細胞是較理想的實驗材料BDNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的升高而增大C洗滌劑能瓦解細胞膜，但對DNA沒有影響DDNA溶液中加入二苯胺試劑，沸水浴加熱，檢測結(jié)果呈藍色【參考答案】B 技法提煉DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、3、4”加蒸餾水2次加到雞血細胞液中，使血細胞吸水漲破；加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中，使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度稀釋到0.14 mol/L，使DNA析出用紗布過濾4次過濾血細胞破裂液，得到含細胞核物質(zhì)的濾液；過濾用2 mol/L的NaCl充分溶解的DNA，濾去溶液中的雜質(zhì)；濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)；過濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液用NaCl溶液4次加2 mol/L的NaCl溶液，溶解提取的細胞核物質(zhì)；用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出；用2 mol/L的NaCl溶液，溶解濾取的DNA黏稠物；用2 mol/L的NaCl溶液，溶解絲狀物用于鑒定DNA 2DNA提取過程中可以選用雞血或者菜花作為實驗材料。請回答下列關(guān)于DNA粗提取和鑒定的問題：（1）使用雞血提取DNA時，需在雞血中加入檸檬酸鈉，目的是_；在雞血細胞液中加入蒸餾水，目的是_。（2）使用菜花提取DNA時，需要研磨，研磨時可加入一定的洗滌劑和食鹽，其作用分別是_和_。（3）DNA在濃度為_mol/L的氯化鈉溶液中溶解度最低。使用體積分數(shù)為95%的冷卻酒精可使DNA_（填“析出”或“溶解”）。（4）使用二苯胺鑒定DNA時，需要在_條件下進行，DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)_色。【答案】（1）防止血液凝固 使雞血細胞破裂（2）瓦解細胞膜 溶解DNA（3）0.14 析出（4）沸水浴 藍 1在DNA粗提取實驗中，應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。相關(guān)操作正確的是A以菜花為材料進行研磨時，可以適當加熱以促進DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸餾水，使DNA快速析出C將絲狀物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后，加水析出D向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌2在利用菜花進行“DNA粗提取與鑒定”實驗中，相關(guān)操作正確的是A將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍B向菜花研磨液中加入適量的蒸餾水，以降低DNA酶活性C向質(zhì)量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中加入蒸餾水析出DNA時，應(yīng)快速加入，直到出現(xiàn)黏稠物為止D向溶有粗提物的NaCl溶液中加入冷卻的體積分數(shù)95%的酒精，可獲得較純凈的DNA3在DNA的粗提取實驗過程中，對DNA提取量影響較小的是A使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂，釋放出DNA等核物質(zhì)B攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C在析出DNA黏稠物時，要緩緩加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多D要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻4下列反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的坐標圖，正確的是A BC D5關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗中不屬于該實驗依據(jù)的原理是ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的不同而不同B利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純的DNACDNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D在沸水中DNA遇二苯胺會出現(xiàn)藍色反應(yīng)6如圖是利用雞血粗提取DNA的基本操作，下表中操作目的不能實現(xiàn)的是 AA BBCC DD7下圖是“DNA粗提取與鑒定”實驗中的兩個操作步驟示意圖，下列有關(guān)敘述錯誤的是 A圖1中的絲狀物含有DNAB圖1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶C圖2所示實驗操作完成后，最好待試管溶液冷卻后觀察顏色變化D圖2中的溶液b能夠溶解DNA8在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，甲、乙、丙、丁四個小組除下表中所列處理方法不同外，其他操作步驟均正確，但實驗結(jié)果卻不同，下列有關(guān)敘述不正確的是 A實驗材料選擇錯誤的組別是丙B沸水浴后試管中溶液顏色變藍的組別是甲、丁C甲組實驗現(xiàn)象差的原因是25 的酒精對DNA的凝集效果差D乙組實驗不成功僅因為在鑒定時加入了雙縮脲試劑9如圖為菜花DNA的粗提取與鑒定的實驗流程圖。據(jù)圖回答下列問題： （1）選擇菜花作為提取DNA的實驗材料的原因是_。（2）研磨前，向研缽中加入石英砂的目的是_，加入的物質(zhì)a是_。（3）研磨液過濾后，應(yīng)向濾液中加入2 mol/L的NaCl溶液，目的是_；也可以向濾液中加入嫩肉粉，目的是_。（4）鑒定DNA所用的化學試劑為_，鑒定實驗中，A、B兩支試管屬于對照組的是_，對照組試管中加入的物質(zhì)有_。10回答下列有關(guān)“DNA的粗提取和鑒定”實驗的問題。（1）下列有關(guān)“DNA的粗提取和鑒定”實驗原理的敘述，正確的是_。ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而減小B利用DNA不溶于酒精的性質(zhì)，可除去細胞中溶于酒精的物質(zhì)而得到較純凈的DNACDNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D在沸水中，DNA遇二苯胺會出現(xiàn)紫色反應(yīng)（2）如圖為該實驗過程中的一些重要操作示意圖。 正確的操作順序是_。上圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是_和_。圖A步驟中所用酒精必須經(jīng)過_才能使用，該步驟的目的是_。（3）為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加_試劑，沸水浴，如果出現(xiàn)_，則該絲狀物的主要成分為DNA。 11（2015·江蘇卷）圖1、2 分別為“DNA 的粗提取與鑒定”的實驗中部分操作步驟示意圖，下列敘述正確的是 A. 圖1、2 中加入蒸餾水稀釋的目的相同B. 圖1 中完成過濾之后保留濾液C. 圖2 中完成過濾之后棄去濾液D. 在圖1 雞血細胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì) 1【答案】D【解析】以菜花為材料進行研磨時，可以加入一定的洗滌劑和食鹽，進行充分地攪拌和研磨，過濾后收集研磨液，A項錯誤；為避免DNA斷裂，加入蒸餾水要緩慢，B項錯誤；將絲狀物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中后，加入與濾液體積相等的、冷卻的、體積分數(shù)為95%的酒精溶液，靜置23min，以析出含雜質(zhì)較少的DNA，C項錯誤；為避免DNA斷裂和降解，要向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌，D項正確。2【答案】D 3【答案】B【解析】A項的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子，使進入濾液中的DNA盡量的多；C項是讓DNA充分沉淀，保證DNA的量；D項的道理同C項；而B項的操作并不能使DNA增多或減少。4【答案】C【解析】NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時，DNA的溶解度最低；NaCl溶液濃度小于0.14 mol/L時，隨著NaCl溶液濃度的升高，DNA的溶解度逐漸降低；NaCl溶液濃度大于0.14 mol/L時，隨著NaCl溶液濃度的升高，DNA的溶解度逐漸升高。所以C選項是正確的。5【答案】C【解析】根據(jù)“DNA的粗提取與鑒定的實驗”原理：DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的。當氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低，利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液。利用這一原理，可以進一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。洗滌劑能瓦解細胞膜但是對DNA沒有影響。蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，在80 條件下會變性，而DNA對溫度的耐受性較高。蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，而對DNA沒有影響。DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。C選項不屬于該實驗的原理。6【答案】B 7【答案】B【解析】圖1所示的步驟是提取含雜質(zhì)較少的DNA，具體操作是在濾過的溶液中，加入冷卻的、體積分數(shù)為95的酒精溶液50 mL，并用玻璃棒攪拌，溶液中會出現(xiàn)含雜質(zhì)較少的白色絲狀物。用玻璃棒將絲狀物卷起，并用濾紙吸取上面的水分。這種絲狀物的主要成分就是DNA，A正確。提取含雜質(zhì)較少的DNA利用的原理是DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等物質(zhì)可以溶于酒精溶液，B錯誤。圖2所示的步驟是DNA的鑒定，具體操作是取兩支20 mL的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的氯化鈉溶液5 mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。因此，圖2中的溶液b可以溶解DNA，D正確。然后，向兩支試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，將試管置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后，觀察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化，C正確。8【答案】D【解析】雞血、菜花中都含有DNA，而豬是哺乳動物，其成熟的紅細胞中不含DNA，因此實驗材料選擇錯誤的組別是丙，A正確；甲、乙、丁的實驗材料中都含有DNA，但乙為植物，將植物細胞放入蒸餾水中時，植物細胞不會吸水脹破，且DNA應(yīng)該用二苯胺鑒定，而不能用雙縮脲試劑鑒定，因此沸水浴后試管中溶液顏色變藍的組別是甲、丁，B正確；甲組實驗現(xiàn)象差的原因是25 的酒精對DNA的凝集效果差，C正確；乙為植物，將植物細胞放入蒸餾水中時，植物細胞不會吸水脹破，且DNA應(yīng)該用二苯胺鑒定，而不能用雙縮脲試劑鑒定，D錯誤。9【答案】（1）菜花中的DNA含量相對較高（2）使研磨充分 洗滌劑和食鹽（3）溶解DNA，析出不溶的雜質(zhì) 分解蛋白質(zhì)（4）二苯胺 A NaCL溶液和二苯胺試劑 10【答案】（1）B（2）CBEDA 加速血細胞的破裂 降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出 充分預冷 提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA（3）二苯胺 藍色【解析】（1）根據(jù)DNA粗提取和鑒定的原理：DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達到分離的目的；DNA不溶于酒精溶液，細胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進一步分離；DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度，洗滌劑能瓦解細胞膜，但是對DNA沒有影響；在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色。分析選項可知，B正確。（2）根據(jù)DNA的粗提取和鑒定步驟：加入蒸餾水，破碎細胞過濾，獲取含DNA的濾液，去除濾液中雜質(zhì)，DNA的析出，鑒定。所以正確的操作順序是CBEDA。C加蒸餾水是使血細胞吸水破裂，E加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度降低，析出DNA。DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步驟中所用酒精必須經(jīng)過充分預冷才能使用，以便除去溶于酒精的雜質(zhì)，提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA。（3）DNA鑒定用二苯胺水浴加熱，呈藍色。11.【答案】BCD 質(zhì)，D正確。 10