第31講 微生物的利用1(2020·杭州模擬)如表為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答下列問題：成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gK2HPO41 gC6H12O630 g瓊脂15 gH2O1 000 mLMgSO4·7H2O0.5 g青霉素0.1萬單位(1)依物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。依用途劃分，則屬于_培養(yǎng)基。(2)根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是_。(3)該培養(yǎng)基中的碳源是_。不論何種培養(yǎng)基，在各成分都融化后分裝前，要進行的是_。(4)若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌，應(yīng)除去的物質(zhì)是_，應(yīng)加入的物質(zhì)是_。(5)細菌種群進化過程中，起主要作用的變異是_。(填編號)A環(huán)境條件B基因重組C基因突變 D染色體畸變解析：(1)該培養(yǎng)基中含有凝固劑瓊脂，屬于固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基含有抗生素(青霉素)，屬于選擇培養(yǎng)基。(2)該培養(yǎng)基含有有機碳源C6H12O6，可見所培養(yǎng)的微生物是異養(yǎng)型生物。(3)不論何種培養(yǎng)基，在各成分都融化后分裝前，要先進行pH調(diào)整。(4)若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌，應(yīng)除去青霉素和C6H12O6，加入纖維素粉。(5)細菌是原核生物，沒有染色體，不會發(fā)生染色體畸變；細菌不能進行有性生殖，不會發(fā)生基因重組，所以細菌可遺傳的變異只有基因突變。答案：(1)固體選擇(2)異養(yǎng)型(3)C6H12O6調(diào)整pH(4)青霉素和C6H12O6纖維素粉(5)C2請回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基的問題：(1)微生物的培養(yǎng)都需要培養(yǎng)基，一般培養(yǎng)基都含有的成分有_；配制固體培養(yǎng)基還需要加入凝固劑_。(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般流程包括：AB上述流程中A代表_，實驗室中這個步驟常用的方法有_；流程中B代表_，該步驟進行的適宜溫度是_°C左右。(3)鑒定分解尿素的細菌的方法是向以_為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑，培養(yǎng)某種細菌，如果pH升高，指示劑將變紅，說明該種細菌能分解尿素。(4)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，選擇培養(yǎng)基中菌落數(shù)()A多B少C相等 D幾乎為零解析：(1)一般培養(yǎng)基中都應(yīng)含有水、無機鹽、碳源和氮源四種成分。(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的流程包括：計算稱量融化滅菌倒平板；灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌是實驗室中常用的滅菌方法。(4)選擇培養(yǎng)基上只能生長特定的微生物，因此該培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)目比全營養(yǎng)培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)少。答案：(1)水、碳源、氮源和無機鹽瓊脂(2)滅菌灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌倒平板60(3)尿素酚紅(4)B3(2020·浙江五校高三聯(lián)考)某村莊有一條小溪，近幾年由于上游幾家乳膠廠不斷向其中排放廢水，小溪變得不再清澈。某同學(xué)想測定該溪水中的細菌含量情況。回答下列問題：(1)先根據(jù)所學(xué)知識制備LB培養(yǎng)基。制備該培養(yǎng)基的步驟是：計算稱量融化滅菌倒平板。下列關(guān)于制備LB培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是_。A培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH再進行滅菌B培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝到培養(yǎng)皿中C融化瓊脂時不能使培養(yǎng)基溢出或燒焦D滅菌時一般用高壓蒸汽滅菌鍋在121 ，500 g/cm2 壓力下滅菌15分鐘(2)該同學(xué)利用上述制備的培養(yǎng)基來檢測水樣中的細菌數(shù)量，他所選擇的分離方法應(yīng)是_；該同學(xué)在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_。接種在超凈工作臺上進行，實驗前一段時間需打開工作臺上的紫外燈和過濾風(fēng)，實驗中需關(guān)閉的是_(A.酒精燈B照明燈C紫外燈D過濾風(fēng))。(3)值得注意的是，他所選擇的這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往比實際細菌的數(shù)目要低，這是因為_；_。(不考慮實驗操作原因引起的細菌數(shù)目的變化)(4)該同學(xué)欲將所分離出的某種細菌臨時保藏，應(yīng)接種到試管的_培養(yǎng)基上，等菌落長成后，放入冰箱低溫保藏。解析：培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH再進行滅菌，A正確；培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌再分裝到培養(yǎng)皿中，B正確；融化瓊脂時不能使培養(yǎng)基溢出或燒焦，C正確；滅菌時一般用高壓蒸汽滅菌鍋在121 ，1000 g/cm2壓力下滅菌15分鐘，D錯誤。答案：(1)D(2)(稀釋)涂布分離法檢查平板滅菌是否徹底C(3)該方法只能統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，死菌無法統(tǒng)計 當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(4)斜面4(2020·杭州模擬)從土壤中分離以尿素為氮源的細菌，實驗過程如圖所示，請回答下列問題：(1)欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌，將土壤用_進行一系列的梯度稀釋，同一濃度的土壤稀釋液至少涂布_個平板。(2)在培養(yǎng)基中加入尿素(唯一氮源)，以分離出能分解尿素的細菌，這種加入尿素的培養(yǎng)基在功能上屬于_。A選擇培養(yǎng)基 B固體培養(yǎng)基C液體培養(yǎng)基 D半固體培養(yǎng)基(3)接種后的培養(yǎng)皿_放于37 的恒溫箱中培養(yǎng)。在能利用尿素的細菌菌落周圍，有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是_。(4)為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。水培某植物時，為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用_技術(shù)。解析：(1)稀釋時，為減少雜菌干擾，需要用無菌水稀釋。為排除偶然因素，每個稀釋度需要涂布3個平板。(2)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。(3)培養(yǎng)時，為防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落沖散細菌，需要將培養(yǎng)皿倒置。能利用尿素的細菌可分泌脲酶，脲酶能將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使指示劑酚紅呈紅色。(4)固定化酶技術(shù)使酶可以回收，從而提高了酶的利用率。答案：(1)無菌水3(2)A(3)倒置能利用尿素的細菌可分泌脲酶，脲酶能將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色(4)固定化酶5已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標(biāo)菌)。號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。號培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無機鹽(適量)，X(15 g/L)。號培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無機鹽(適量)，X(45 g/L)?；卮鹣铝袉栴}：(1)在號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是_。、號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機物是_。(2)若將土壤懸浮液接種在號培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會_，其原因是_。(3)號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是_。(4)假設(shè)從號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_和_。解析：(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，牛肉膏、蛋白胨為微生物提供了氮源，而號、號培養(yǎng)基中除X外的其他物質(zhì)均不含碳，所以能為微生物提供碳源的有機物是X。(2)因為號培養(yǎng)基中碳源只有X，相當(dāng)于選擇培養(yǎng)基，只有能降解X的細菌才能增殖，而不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要對菌落進行計數(shù)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進行接種。(4)在有氧條件下，丙酮酸參與細菌的需氧呼吸，可以為該菌的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料6(2020·寧波一模)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細菌(目的菌)。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題：(1)培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的_。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是_。(3)在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用劃線分離的方法進行接種，此過程中所用的接種工具是_，操作時采用_滅菌的方法。解析：(1)在選擇培養(yǎng)基中加入特定物質(zhì)，可以篩選出特定的細菌。(2)根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方，“目的菌”生長所需的氮源和碳源只能來自培養(yǎng)基中的化合物A。異養(yǎng)需氧型細菌在培養(yǎng)時需要振蕩。(3)獲得純凈特定“目的菌”的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。(4)用劃線分離的方法進行接種，接種工具是接種環(huán)，操作時一般采用灼燒滅菌。答案：(1)篩選目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)防止外來雜菌入侵(4)接種環(huán)灼燒7急性腸胃炎、手足口病分別是由細菌和病毒通過消化道進入人體導(dǎo)致的，因此檢驗飲用水的細菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施。請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題：(1)在如圖所示的四種菌落分布圖中，不可能是用涂布分離法得到的是_。(2)圖中用該方法得到的菌落分布圖中，最符合計數(shù)要求的是圖中的_。(3)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要設(shè)置對照組？_。為什么？_。(4)分別取0.1 mL、已稀釋103倍的水樣分別涂布到3個瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落平均數(shù)為50。則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為_。解析：(1)據(jù)圖可知，D圖所示的菌落分布為劃線分離法接種獲得的。(2)利用涂布分離法進行微生物計數(shù)時，需要得到30300個菌落的平板進行計數(shù)。(3)為了增強實驗的說服力，通常要設(shè)置對照實驗，本實驗可設(shè)置空白對照排除培養(yǎng)基污染產(chǎn)生的影響。(4)根據(jù)公式計算每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為50×103÷0.1×1 0005.0×108。答案：(1)D(2)C(3)需要培養(yǎng)基制備不合格會導(dǎo)致菌落數(shù)增加(4)5.0×1088(2020·浙江教育綠色評價聯(lián)盟高三考試)已知某細菌的兩種突變類型細菌和細菌的營養(yǎng)條件和菌落特征都相同，但細菌能分解有機物A而不能分解有機物B，細菌能分解有機物B而不能分解有機物A。現(xiàn)有這兩種類型細菌的混合液樣品，要將其分離，有人設(shè)計了一種方案，部分操作步驟如下圖。請回答下列問題：(1)步驟一使用的是_培養(yǎng)基，其中含有細菌生長所需的水、無機鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還必須加入_，以利于對不同菌種進行分離操作。(2)步驟一采用_法接種，此接種法可使接種細菌逐漸稀釋，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，可形成單個、獨立的_，最終可能得到純種的細菌；要進行上述接種操作，必須在_及酒精燈火焰附近進行，以避免雜菌污染。(3)步驟三中，若對其中某瓶培養(yǎng)液中A、B兩種有機物含量進行測定，當(dāng)培養(yǎng)液中檢測出如下的實驗結(jié)果時，能說明培養(yǎng)液只有細菌的是_。A化合物A與B含量都明顯下降 B化合物A含量明顯下降，B含量基本不變C化合物A含量基本不變，B含量明顯下降 D化合物A、B含量都基本不變解析：(1)步驟一使用的是LB固體培養(yǎng)基，其中含有細菌生長所需的水、無機鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。由于需要配制固體培養(yǎng)基，所以還必須加入凝固劑瓊脂，以利于對不同菌種進行分離操作。(2)步驟一采用劃線分離法接種，此接種法可使接種細菌逐漸稀釋，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)，可形成單個、獨立的菌落，最終可能得到純種的細菌；為了避免雜菌污染，必須在超凈臺及酒精燈火焰附近進行。(3)當(dāng)培養(yǎng)液中檢測出化合物A含量明顯下降，B含量基本不變，才能說明培養(yǎng)液只有細菌，因為細菌只能分解利用有機物A不能利用有機物B。答案：(1)LB固體瓊脂(2)劃線分離(單)菌落超凈臺(3)B6