考點(diǎn)33觀察類實(shí)驗(yàn)和鑒定提取類實(shí)驗(yàn)直擊考綱1.能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能等進(jìn)行綜合運(yùn)用。2.具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行分析、解釋，并能對(duì)收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。3.具有對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力，包括運(yùn)用觀察、實(shí)驗(yàn)與調(diào)查、假說演繹、建立模型與系統(tǒng)分析等科學(xué)研究方法。1觀察類實(shí)驗(yàn)操作流程模板2鑒定類實(shí)驗(yàn)的操作流程模板1觀察類實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)名稱細(xì)胞的狀態(tài)觀察對(duì)象染色劑生物材料(及特殊要求)觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂死細(xì)胞染色體無(為固定裝片)蝗蟲精母細(xì)胞觀察細(xì)胞的有絲分裂死細(xì)胞龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞染色前需漂洗干凈用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞活或死細(xì)胞細(xì)胞無(無需染色)酵母菌細(xì)胞、水綿細(xì)胞、葉的保衛(wèi)細(xì)胞、魚的紅細(xì)胞等觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原活細(xì)胞紫色中央液泡的大小和原生質(zhì)層的位置紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞2.鑒定提取類實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)名稱試劑顏色生物材料備注淀粉的鑒定碘液藍(lán)色脫色的葉片等若材料有顏色，需先脫色還原糖的鑒定斐林試劑磚紅色沉淀蘋果或梨勻漿等現(xiàn)配現(xiàn)用、水浴加熱脂肪的鑒定蘇丹(或)染液橘黃(或紅)色花生種子切片(或勻漿)需用高倍鏡觀察(勻漿不需用高倍鏡觀察)蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑紫色豆?jié){、稀蛋清等先加A液，后加B液，搖勻使用綠葉中色素的提取和分離提取液：無水乙醇；分離液：層析液胡蘿卜素：橙黃色；葉黃素：黃色；葉綠素a：藍(lán)綠色；葉綠素b：黃綠色新鮮的綠葉(如菠菜葉)加入二氧化硅是為了研磨得更充分；碳酸鈣可防止在研磨中色素被破壞DNA的粗提取和鑒定二苯胺試劑藍(lán)色雞血細(xì)胞等沸水浴加熱5 min3關(guān)注洋蔥在實(shí)驗(yàn)中的“一材多用”取材部位實(shí)驗(yàn)名稱取材原因葉鱗片葉植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原外表皮細(xì)胞含紫色大液泡使用高倍顯微鏡觀察細(xì)胞的多樣性細(xì)胞較大，外表皮細(xì)胞有大液泡，內(nèi)表皮細(xì)胞有明顯的細(xì)胞核管狀葉葉綠體中色素的提取和分離根觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂材料易得，且分生區(qū)細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，染色體數(shù)目少，易于觀察4.辨析有關(guān)顏色反應(yīng)類實(shí)驗(yàn)的五種顏色顏色原理紅還原糖斐林試劑磚紅色沉淀脂肪蘇丹染液紅色染色體(質(zhì))醋酸洋紅液紅色黃脂肪蘇丹染液橘黃色葉綠體中色素分離的濾紙條中：胡蘿卜素橙黃色，葉黃素黃色綠酒精橙色的重鉻酸鉀溶液灰綠色葉綠體中色素分離的濾紙條中：葉綠素b黃綠色，葉綠素a藍(lán)綠色藍(lán)淀粉碘液藍(lán)色DNA二苯胺試劑藍(lán)色紫染色體(質(zhì))龍膽紫溶液紫色蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色5.常用試劑的種類及作用試劑體積分?jǐn)?shù)或質(zhì)量濃度作用原理相關(guān)實(shí)驗(yàn)酒精50%洗去浮色(溶劑)脂肪的鑒定70%消毒微生物的培養(yǎng)95%解離觀察細(xì)胞的有絲分裂100%溶解、提取色素葉綠體色素的提取和分離鹽酸5%營造酸性環(huán)境探究pH對(duì)酶活性的影響15%解離觀察細(xì)胞的有絲分裂NaOH0.1 g/mL斐林試劑、雙縮脲試劑的成分檢測(cè)還原糖、蛋白質(zhì)5%營造堿性環(huán)境探究pH對(duì)酶活性的影響CuSO40.05 g/mL斐林試劑的成分檢測(cè)還原糖0.01 g/mL雙縮脲試劑的成分檢測(cè)蛋白質(zhì)6.常見疑難辨析(1)在觀察類實(shí)驗(yàn)中低倍鏡和高倍鏡的使用情況如何？除觀察類實(shí)驗(yàn)外，還有什么實(shí)驗(yàn)中也用到了顯微鏡呢？提示觀察類實(shí)驗(yàn)中除了“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”使用低倍鏡即可外，其余均需要使用高倍顯微鏡；還有“脂肪的切片法鑒定”“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化”也用到了顯微鏡。(2)在“觀察細(xì)胞的有絲分裂”實(shí)驗(yàn)中為什么應(yīng)注意觀察呈正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞？提示呈正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞分裂旺盛，而呈長方形的細(xì)胞可能是伸長區(qū)或成熟區(qū)的細(xì)胞，沒有分裂能力。(3)在觀察減數(shù)分裂實(shí)驗(yàn)中為什么不宜選擇動(dòng)物的卵巢或植物的雌蕊？提示因?yàn)樾叟渥拥漠a(chǎn)生數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于雌配子，更易觀察到減數(shù)分裂。(4)為什么應(yīng)選取成熟的植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)？提示因其含有中央大液泡，易于發(fā)生質(zhì)壁分離與復(fù)原的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。(5)斐林試劑能否用于蛋白質(zhì)的鑒定？為什么？提示不能，因?yàn)橛糜诘鞍踪|(zhì)鑒定的雙縮脲試劑B液是0.01 g/mL的CuSO4溶液，兩種試劑的本質(zhì)不同。斐林試劑的本質(zhì)是新制的Cu(OH)2，故應(yīng)將甲液和乙液等量混勻后使用，而雙縮脲試劑的本質(zhì)是堿性條件下的Cu2，故應(yīng)先加A液1 mL造成堿性環(huán)境，再加B液4滴搖勻使用。(6)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？提示不一定，因?yàn)橹镜蔫b定有兩個(gè)方案，可磨碎后在試管內(nèi)鑒定，肉眼觀察即可，也可做切片借助顯微鏡觀察。(7)綠葉中色素的提取和分離有何區(qū)別？提示前者用無水乙醇提取法，原理是色素能夠溶于有機(jī)溶劑無水乙醇中；而后者用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散得快，反之?dāng)U散得慢。題組一觀察類實(shí)驗(yàn)1(2018·南京聯(lián)考)在“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”實(shí)驗(yàn)中，對(duì)紫色洋蔥鱗片葉外表皮臨時(shí)裝片進(jìn)行了三次觀察和兩次處理。下列有關(guān)敘述正確的是()A第一次觀察為低倍鏡觀察，后兩次為高倍鏡觀察B第一次處理滴加的液體為清水，第二次滴加的液體為質(zhì)量濃度為0.3 g/mL的蔗糖溶液C若將紫色洋蔥鱗片葉的外表皮換成內(nèi)表皮，則不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離D紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞中不屬于原生質(zhì)層的有細(xì)胞壁、細(xì)胞核和細(xì)胞液答案D解析“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”實(shí)驗(yàn)中，一般需要進(jìn)行三次觀察，第一次是正常細(xì)胞的觀察，第二次是質(zhì)壁分離細(xì)胞的觀察，第三次是質(zhì)壁分離復(fù)原細(xì)胞的觀察，三次觀察均為低倍鏡觀察，A錯(cuò)誤；第一次處理滴加的液體為質(zhì)量濃度為0.3 g/mL的蔗糖溶液，觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象，第二次滴加的液體為清水，觀察質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；紫色洋蔥鱗片葉的內(nèi)表皮細(xì)胞也會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離，但不含色素，現(xiàn)象不便于觀察，C錯(cuò)誤。2如圖表示洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片的制作與觀察，下列相關(guān)敘述不正確的是()AA過程所用的解離液是以質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精配制而成的BB過程的主要目的是洗去解離液，防止解離過度C在顯微鏡下可以看到一個(gè)細(xì)胞連續(xù)分裂的過程D在低倍鏡下找到物像后，可以換用高倍鏡繼續(xù)觀察答案C解析解離液是以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精配制而成的，A正確；B過程為漂洗，其主要目的是洗去解離液，防止解離過度，B正確；在顯微鏡下看到的每一個(gè)細(xì)胞都已被殺死，C錯(cuò)誤；在低倍鏡下找到物像后，可以換用高倍鏡進(jìn)行更大放大倍數(shù)的觀察，D正確。3.下面是用顯微鏡觀察時(shí)的幾個(gè)操作步驟，要把顯微鏡視野下的標(biāo)本從下圖中的A轉(zhuǎn)為B，其正確的操作步驟是()向右上方移動(dòng)載玻片調(diào)節(jié)反光鏡使視野明亮轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋 向左下方移動(dòng)載玻片A B C D答案C解析從題圖中可以看出，A圖中的細(xì)胞比B圖中的多而小，說明A圖是低倍鏡下的圖像，B圖是A圖左下方的細(xì)胞在高倍鏡下的圖像。所以應(yīng)向左下方移動(dòng)裝片，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器換成高倍鏡，由于高倍鏡下視野較暗，可調(diào)節(jié)反光鏡使視野明亮，在高倍鏡下調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物像清楚，所以順序是。題組二鑒定提取類實(shí)驗(yàn)4(2018·廣東模擬)下列有關(guān)組織細(xì)胞中化合物鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是(多選)()A蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后，會(huì)產(chǎn)生紫色反應(yīng)B將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)無色，水浴加熱后有磚紅色沉淀生成C脂肪的檢測(cè)中使用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精是為了溶解組織中的脂肪D酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定答案BCD解析蛋白酶本身就是蛋白質(zhì)，因此用雙縮脲試劑鑒定會(huì)產(chǎn)生紫色反應(yīng)，A正確；斐林試劑本身具有藍(lán)色，因此將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，B錯(cuò)誤；脂肪的檢測(cè)中滴加50%的酒精溶液是為了洗去浮色，C錯(cuò)誤；酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精，酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精，D錯(cuò)誤。5(2018·揚(yáng)州模擬)以下關(guān)于實(shí)驗(yàn)步驟的敘述(試劑、藥品的濃度和用量符合要求)，正確的是()A鑒定蛋白質(zhì)：豆?jié){CuSO4溶液NaOH溶液觀察顏色變化B鑒定還原糖：蘋果勻漿CuSO4溶液NaOH溶液水浴加熱觀察顏色變化C提取綠葉中的色素：剪碎綠葉SiO2CaCO3無水乙醇研磨過濾D觀察植物細(xì)胞有絲分裂：制片解離漂洗染色顯微鏡觀察答案C解析蛋白質(zhì)的鑒定應(yīng)先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液，A錯(cuò)誤；用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)，應(yīng)將NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合使用，B錯(cuò)誤；提取綠葉中的色素的流程為剪碎綠葉SiO2CaCO3無水乙醇研磨過濾，C正確；觀察植物細(xì)胞有絲分裂：解離漂洗染色制片顯微鏡觀察，D錯(cuò)誤。6(2018·淮安期末)現(xiàn)提供可配制斐林試劑的溶液：甲液(0.1 g·mL1的NaOH溶液)、乙液(0.05 g·mL1的CuSO4溶液)以及蒸餾水，如果充分利用上述試劑及必需的實(shí)驗(yàn)用具，可靈活性地鑒別出下列哪些物質(zhì)()葡萄糖蔗糖胃蛋白酶RNAA只有 B和C和 D、和答案C解析葡萄糖是還原糖，可以用斐林試劑鑒定，所以用上述試劑可以檢測(cè)，正確；蔗糖是非還原糖，不能用斐林試劑鑒定，錯(cuò)誤；胃蛋白酶是蛋白質(zhì)，可以用雙縮脲試劑鑒定，可以用上述試劑鑒定，但使用時(shí)需要將斐林試劑的乙液稀釋為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01 g·mL1，正確；以上試劑只能鑒定還原糖和蛋白質(zhì)，而不能鑒定RNA，錯(cuò)誤。7