2022年高中生物 課時(shí)訓(xùn)練5 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 新人教版選修11.可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是()。A.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析:細(xì)菌合成的脲酶可以催化尿素分解形成氨。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細(xì)菌后,如果pH升高,指示劑若變紅,則說明該細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶分解尿素。答案:A2.關(guān)于微生物的培養(yǎng),下列敘述錯(cuò)誤的是()。A.細(xì)菌一般在3037 的溫度下培養(yǎng)12 dB.放線菌一般在2528 的溫度下培養(yǎng)57 dC.霉菌一般在2528 的溫度下培養(yǎng)34 dD.不同種類的微生物,一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間解析:不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和時(shí)間。答案:D3.在尋找目的菌株時(shí),要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找,下列不屬于厭氧細(xì)菌生存環(huán)境的是()。A.土壤深層B.人或動(dòng)物體內(nèi)C.真空D.池塘淤泥解析:厭氧型微生物的生長(zhǎng)繁殖不僅需要厭氧環(huán)境,同時(shí)還需要生存所必需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等。真空環(huán)境只能提供無氧環(huán)境,卻不能提供其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。答案:C4.需要在火焰旁操作的有()。土壤取樣稱取土壤稀釋土壤溶液涂布平板微生物的培養(yǎng)A.B.C.D.解析:除了土壤取樣和微生物的培養(yǎng)不便于在火焰旁進(jìn)行外,其他均要在火焰旁進(jìn)行,以防止雜菌污染。答案:D5.分離土壤中分解尿素的細(xì)菌,對(duì)培養(yǎng)基的要求是()。加尿素不加尿素加瓊脂不加瓊脂加葡萄糖不加葡萄糖加硝酸鹽不加硝酸鹽A.B.C.D.解析:分離分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)該以尿素為唯一氮源,不用加硝酸鹽來提供氮源。另外還要加葡萄糖提供碳源,加瓊脂作為凝固劑,制成固體培養(yǎng)基,利于細(xì)菌的分離、鑒定、計(jì)數(shù)等。答案:C6.以下關(guān)于分解尿素的細(xì)菌的說法正確的是()。A.能分解尿素的原因是能合成分泌蛋白酶B.以尿素作為唯一的碳源C.環(huán)境中含有大量的尿素誘導(dǎo)該細(xì)菌產(chǎn)生了分解尿素的特性D.以尿素為唯一氮源且添加了酸堿緩沖劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)該菌后不會(huì)使酚紅指示劑變紅解析:A項(xiàng):酶有專一性,分解尿素的細(xì)菌之所以能分解尿素是因?yàn)槟芎铣煞置陔迕?。B項(xiàng):該菌能以葡萄糖作為碳源。C項(xiàng):環(huán)境中含有大量的尿素對(duì)分解尿素的性狀起了選擇作用而非誘導(dǎo)作用。D項(xiàng):該菌產(chǎn)生脲酶把尿素分解為氨后,使pH升高,進(jìn)一步使酚紅指示劑變紅,但添加酸堿緩沖劑后,阻止了pH的升高,因此培養(yǎng)基不再使酚紅指示劑變紅。答案:D7.稀釋涂布平板法分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)使用的涂布器應(yīng)保存在體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中,取出后又要放在酒精燈火焰上引燃,這兩步分別屬于什么技術(shù)?()A.滅菌、滅菌B.消毒、消毒C.滅菌、消毒D.消毒、滅菌解析:消毒和滅菌是不同的。往往消毒比較溫和,僅僅消滅危害健康的致病菌;而滅菌就比較強(qiáng)烈,如高壓蒸汽、灼燒等,它是殺死一切菌。因此本題前者屬消毒,后者屬滅菌。答案:D8.下列有關(guān)土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的說法中,錯(cuò)誤的是()。A.因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量不同,所以,為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離B.測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍不同C.如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落解析:樣品的稀釋度直接影響平板上生長(zhǎng)的菌落的數(shù)目。實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),以保證獲得菌落在30300之間適于計(jì)數(shù)的平板。測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104、105和106倍的稀釋液;測(cè)定放線菌的數(shù)量一般選用103、104和105倍的稀釋液;測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用102、103和104倍的稀釋液。將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,從而說明選擇培養(yǎng)基的篩選作用。答案:D9.馬丁培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基之一。下列為馬丁培養(yǎng)基的化學(xué)成分,據(jù)此回答下列問題。成分含量成分含量KH2PO4·3H2O0.1 g葡萄糖1 gMgSO4·7H2O0.05 g蛋白胨0.5 g0.1%孟加拉紅溶液0.33 mL瓊脂1.52 g2%去氧膽酸鈉溶液2 mLH2O100 mL鏈霉素溶液(1×104 /mL)0.33 mL(1)該培養(yǎng)基中加入了鏈霉素,能抑制細(xì)菌和放線菌,但真菌可以在上面生長(zhǎng),因此培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基。 (2)葡萄糖能給微生物生長(zhǎng)提供和。 (3)蛋白胨能給微生物生長(zhǎng)提供和。 (4)培養(yǎng)基中KH2PO4·3H2O可給微生物提供含的無機(jī)鹽。 (5)瓊脂的作用是作為。 解析:鏈霉素能抑制細(xì)菌和放線菌生長(zhǎng),真菌可以在上面生長(zhǎng)。因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基。葡萄糖是一種含碳的有機(jī)物,既可給微生物提供碳源,又可給微生物提供能源。該培養(yǎng)基蛋白胨可以給微生物提供氮源和維生素。答案:(1)選擇(2)碳源能源(3)氮源維生素(4)K、P(5)凝固劑10.探究如何從土壤中分離自生固氮菌并計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)原理:農(nóng)田的表層土壤中,自生固氮菌的含量比較多。將用表層土制成的稀泥漿,接種到無氮培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。在這種情況下,只有自生固氮菌才能生長(zhǎng)繁殖。材料用具:農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9 mL無菌水的大試管若干、無菌移液管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90 mL無菌水的錐形瓶、酒精燈、恒溫箱。方法步驟:(1)倒平板。分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板,應(yīng)在操作。 (2)制備土壤稀釋液。取土樣10 g加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無菌移液管吸取上清液 1 mL,轉(zhuǎn)至9 mL無菌水的大試管中,依次稀釋到107倍稀釋度。為實(shí)現(xiàn)無菌操作,試管口和移液管應(yīng)在離火焰cm處。 (3)涂布。按照由107103稀釋度的順序分別吸取0.1 mL進(jìn)行平板涂布,每個(gè)稀釋度下,無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布個(gè)平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布個(gè)平板。 (4)培養(yǎng)。放入恒溫箱內(nèi),在適宜溫度條件下培養(yǎng)34 d。一般每隔小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次,選取時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止。 (5)細(xì)菌的計(jì)數(shù)。當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),選取菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。如果測(cè)試的平均值為50,則每克樣品中的菌株數(shù)是。(稀釋度是105) (6)預(yù)期結(jié)果。相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落數(shù)(填“多于”或“少于”)無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。理由是 。 解析:要分離自生固氮菌,采用選擇培養(yǎng)基分離的方法,缺乏氮源的培養(yǎng)基可用來分離自生固氮微生物,而其他微生物因缺乏氮源不能生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)步驟一般是:配制無氮培養(yǎng)基滅菌倒平板系列稀釋涂布平板培養(yǎng)觀察并計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)中要注意無菌操作和設(shè)計(jì)對(duì)照等。答案:(1)酒精燈火焰旁(2)12(3)31(4)24菌落數(shù)目穩(wěn)定因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目(5)303005×107(6)多于無氮培養(yǎng)基上可以生存和繁殖的只是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類的生存