2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點過關(guān)練 考點43 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1xx·江蘇高考 下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗敘述，錯誤的是()A酵母和菜花均可作為提取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁梢姴０羯嫌邪咨鯛钗顳DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)解析：酵母和菜花都含DNA物質(zhì)，都可用來提取DNA，A項正確。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，所以DNA在2 mol/L的NaCl溶液或者蒸餾水中都能溶解，B項正確。雞血細(xì)胞加水?dāng)嚢?，?xì)胞吸水漲破釋放出DNA，DNA存在于溶液中，C項錯誤。DNA與二苯胺在沸水浴條件下反應(yīng)，冷卻后變藍(lán)，D項正確。答案：C2xx·江蘇高考某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA 粗提取和鑒定實驗，操作錯誤的是()A加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨B用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的 DNAC加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱解析：加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和，否則容易產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作，A錯誤；利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開，起到純化的作用，B正確；加入酒精溶液，靜置溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA，用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌，防止斷裂，C正確；用二苯胺鑒定DNA需要水浴加熱，D正確。答案：A3xx·江蘇高考下列關(guān)于“DNA 粗提取與鑒定實驗”的敘述，正確的是()A洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后變藍(lán)C常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA 的提取D用玻棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致DNA 獲得量減少解析：本題考查DNA提取和鑒定。DNA溶解度與洗滌劑無關(guān)，DNA與二苯胺在沸水浴條件下反應(yīng)，冷卻后變藍(lán)；用玻璃棒攪拌，使DNA吸附在玻璃棒上，且DNA量不會減少。答案：C1xx·上海普陀一模下列有關(guān)蛋白質(zhì)和DNA的提取和分離的說法，正確的是()A可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取DNA和蛋白質(zhì)B提取DNA時，可用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解以析出蛋白質(zhì)C透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜D用玻璃棒快速攪拌有利于提取DNA解析：哺乳動物的成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，不能提取到DNA；不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解去除雜質(zhì)，并在0.14 mol/L時，溶解度最小，析出DNA；用玻璃棒快速攪拌容易使DNA斷裂，不利于DNA的提取。答案：C2xx·安徽蚌埠檢測下列關(guān)于操作過程的敘述中錯誤的是()APCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌BPCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在20 儲存CPCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后，迅速融化D在微量離心管中添加反應(yīng)成分時，每吸取一種試劑后，移液器上的吸液槍頭都必須更換解析：為了防止外源DNA等因素的污染，PCR反應(yīng)中所用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸餾水等，在使用前要進(jìn)行高壓滅菌；還要將所用的緩沖液和酶分裝成小份；并且使用一次性吸液槍頭，則A、B、D三項都正確。在使用前，將PCR所需試劑從冰箱內(nèi)拿出后，應(yīng)放在冰塊上緩慢融化，則C項錯誤。答案：C3xx·江蘇揚州中學(xué)檢測下列有關(guān)血紅蛋白提取和分離的程序的描述，不正確的是()A采血時在采血器皿中加檸檬酸鈉是為了防止血液凝固B混合液離心后分為4層，從上往下，第4層是血紅蛋白水溶液C經(jīng)過透析可對樣品進(jìn)行粗分離，透析的目的是除去分子量較小的雜質(zhì)D通過凝膠色譜法可以除去分子量較大的雜蛋白解析：血液離體后會凝固，采血時在采血器皿中加檸檬酸鹽可以防止凝固；透析袋能使小分子自由出入，而血紅蛋白等大分子則保留在袋內(nèi)；通過凝膠色譜法可以將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去；混合液離心后分為4層，從上往下，第3層是血紅蛋白水溶液。答案：B4xx·湖北黃岡檢測已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示，下列有關(guān)該樣品中蛋白質(zhì)的分離的敘述正確的是()A將樣品裝入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋內(nèi)，則分子丙也保留在袋內(nèi)B若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲移動速度最快C若將樣品以2000 r/min的速度離心10 min，分子戊存在于沉淀中，則分子甲也存在于沉淀中D若用SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子，則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)解析：分子甲的相對分子質(zhì)量最小，進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道而移動速度最慢；分子乙留在透析袋內(nèi)，說明其相對分子質(zhì)量比較大，分子丙比分子乙相對分子質(zhì)量大，所以分子丙也留在袋內(nèi)；分子戊比分子甲的相對分子質(zhì)量大，故離心后分子甲可能不存在于沉淀物中；SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的樣品，其電泳遷移率取決于分子的大小，相對分子質(zhì)量相差越大，形成的電泳帶相距越遠(yuǎn)。答案：A5xx·安師大附中月考下列對PCR擴增實驗的描述錯誤的是()A實驗中通過加熱使目的基因DNA解旋，沒有加入解旋酶和ATPB在設(shè)計2種引物時，需要讓引物和引物之間的堿基序列互補C緩沖溶液中要提供DNA模板、引物、原料、耐熱的DNA聚合酶D為避免外源DNA污染，實驗中的槍頭、緩沖液等在使用前必須高壓滅菌解析：PCR過程中不需要解旋酶和ATP，A正確；PCR需要DNA模板、引物、原料、耐熱的DNA聚合酶、緩沖溶液等條件，C正確；若外源細(xì)菌、病毒等的DNA隨槍頭、緩沖液等進(jìn)入PCR反應(yīng)體系，將影響PCR反應(yīng)，D正確。兩種引物之間不能互補，引物自身折疊后也不能互補，引物應(yīng)與相應(yīng)的DNA模板連的3端是互補的，B錯誤。答案：B6xx·江蘇無錫期末DNA分子經(jīng)PCR反應(yīng)循環(huán)一次后，新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與()A模板母鏈相同B非模板母鏈相同C兩條模板母鏈相同D兩條模板母鏈都不相同解析：PCR反應(yīng)的原理是DNA復(fù)制技術(shù)，遵循DNA堿基互補配對原則，以DNA的一條鏈為模板合成新的子鏈，新合成的那條鏈的脫氧核苷酸的序列應(yīng)與非模板母鏈相同。答案：B7xx·山東泰安期末下列關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實驗的相關(guān)敘述，錯誤的是()A可以選擇DNA含量較高的生物組織為材料，如雞的血細(xì)胞BDNA不溶于酒精，且在0.14 mol/L的氯化鈉溶液中析出C可以利用嫩肉粉把雜質(zhì)多糖和RNA去除D洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，從而獲得含有DNA的濾液解析：雞血細(xì)胞中含DNA，可作為提取DNA的生物組織材料，但不可選用哺乳動物成熟的紅細(xì)胞；DNA不溶于酒精，NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時DNA溶解度最小，此時可大量析出；嫩肉粉中含有蛋白酶，可將蛋白質(zhì)水解，從而除去蛋白質(zhì)；洗滌劑可以瓦解細(xì)胞膜，從而獲得含有DNA的濾液；故C不正確。答案：C8xx·河北質(zhì)檢如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗的相關(guān)操作。(1)圖中實驗材料A可以是_等，研磨時加入的B應(yīng)該是_。(2)通過上述所示步驟得到濾液C后，再向濾液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是_，再過濾得到濾液D，向濾液D中加入蒸餾水的目的是_ _。(3)在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2 mL的4種溶液中，經(jīng)攪拌后過濾，獲得如表所示的4種濾液，含DNA最少的是濾液_。1B液中攪拌研磨后過濾濾液E22 mol/L的NaCl溶液中攪拌后過濾濾液F30.14 mol/L的NaCl溶液中攪拌后過濾濾液G4冷卻的95%的酒精溶液中攪拌后過濾濾液H(4)DNA鑒定的原理是_。答案：(1)洋蔥(菜花等)洗滌劑和食鹽(2)使DNA溶解使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H(4)在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺呈藍(lán)色9xx·雅禮中學(xué)模擬某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 、另一組置于20 條件下保存24 h。DNA的粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾。取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝?，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 20 分析上述實驗過程，回答下列問題：(1)該探究性實驗課題名稱是_。(2)第二步中“緩緩地”攪拌，這是為了減少_。(3)根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論1：與20 相比，相同實驗材料在20 條件下保存，DNA的提取量較多。結(jié)論2：_。針對結(jié)論1，請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：_，然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析：(1)從表格可以看出，該實驗有兩個自變量：材料和溫度。所以該探究性實驗課題名稱為探究不同材料和不同溫度對DNA提取量的影響。低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA較多。(2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物，所以若速度快，易造成DNA的斷裂。(3)本實驗的結(jié)論可從兩個方面來考慮：相同材料在不同溫度下的結(jié)論；不同材料在相同溫度下的結(jié)論。(4)氯仿能使蛋白質(zhì)變性，而對DNA影響極小，所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。答案：(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA的斷裂(3)等質(zhì)量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混和，靜置一段時間，吸取上清液10xx·上海普陀區(qū)期末在基因工程中通常需要利用PCR技術(shù)擴增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR如圖所示，包括三個基本反應(yīng)步驟：模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93 左右一定時間后雙鏈解離；模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55 左右，引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板引物結(jié)合物；引物的延伸：DNA模板引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，合成一條新的與模板DNA 鏈互補的脫氧核苷酸鏈。重復(fù)循環(huán)變性退火延伸三過程，就可獲得較多的目的基因。(1)溫度降至55 左右，引物與模板DNA單鏈結(jié)合形成DNA模板引物結(jié)合物時所遵循的原則是_。(2)在PCR技術(shù)中，引物的作用是_。(3)從理論上推測，第三輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物B的DNA片段所占比例為_。(4)下圖表示利用PCR技術(shù)獲取目的基因X的第一次循環(huán)產(chǎn)物。則至少需要在第_輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)獨立且完整的X基因。如果經(jīng)過n次循環(huán)，則產(chǎn)物中所示DNA分子數(shù)為_。解析：分析文字與圖形，獲取信息：與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物與靶序列之間通過堿基互補配對原則結(jié)合，并引導(dǎo)子鏈延伸；讀圖可知，1次循環(huán)產(chǎn)物中的DNA分子的兩條鏈不等長；且1個DNA分子含引物A,1個DNA分子含引物B；據(jù)此類推，n次循環(huán)獲得的2n個DNA中：產(chǎn)物中、所示DNA分子數(shù)各1個，獨立且完整的X基因2n4個；含引物A的DNA分子2n1個，含引物B的DNA分子2n1個，含引物A和引物B的DNA分子2n2個?；蚬こ讨行枰罅磕康幕颍琍CR循環(huán)中獲得的并不都是獨立完整的X基因。以極少量的目的基因為模板，重復(fù)循環(huán)變性退火延伸三過程，就可獲得較多的目的基因。在第3輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)獨立完整的X基因，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，獨立完整的X基因所占比例越大。DNA模板與引物結(jié)合時遵循堿基互補配對原則；引物能與模板鏈堿基互補配對，引導(dǎo)并作為子鏈合成的起點；第三輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物B的DNA片段所占比例為(231)/237/8；至少需要在第3輪循環(huán)產(chǎn)物中才能開始出現(xiàn)獨立且完整的X基因。如果經(jīng)過n次循環(huán)，則產(chǎn)物中所示DNA分子數(shù)為1個。答案：(1)堿基互補配對(2)能與模板鏈堿基互補配對，引導(dǎo)并作為子鏈合成的起點(3)7/8(4)31個 1下列關(guān)于物質(zhì)分離的原理及操作不正確的是()A提取玫瑰精油時直接加熱，提取胡蘿卜素時采用水浴加熱B在凝膠色譜法的洗脫過程中，大分子物質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出CSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中，蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小D分離紅細(xì)胞時應(yīng)進(jìn)行低速長時間離心處理 解析：選項A，提取玫瑰精油可直接加熱，胡蘿卜素的提取過程采用水浴加熱，因為后者用的是有機溶劑，明火加熱容易引起燃燒、爆炸；選項B凝膠實際上是一些微小的多孔球體，這些小球體大多數(shù)是由多糖類化合物構(gòu)成。在小球內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離；選項C，SDS能與各種蛋白質(zhì)分子形成蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大?。贿x項D，分離紅細(xì)胞時，應(yīng)進(jìn)行低速短時間離心。 答案：D2在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實驗中，相關(guān)敘述正確的是()A用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，濾去析出物B調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D切碎的菜花和新鮮的雞血中都需要加入適量檸檬酸鈉溶液解析：DNA的粗提取與鑒定實驗中，用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14 mol/L，此時析出的絲狀物主要是DNA，過濾后取析出物，棄去濾液；鑒定DNA時需要沸水浴加熱；在用雞血做實驗材料時，加檸檬酸鈉的作用是防止血液凝固。答案：B 3下列有關(guān)PCR反應(yīng)的總結(jié)性敘述，正確的是()A需要兩種能與DNA母鏈互補配對的小段DNA作引物BPCR反應(yīng)獲得的DNA分子只含有引物或引物C每次循環(huán)可以分為三個階段DDNA在860 nm的紅外線波段有強烈的吸收峰，據(jù)此可以進(jìn)行DNA含量的測定解析： PCR反應(yīng)的引物可以是小段DNA或小段RNA；PCR反應(yīng)獲得的DNA分子大多數(shù)既含有引物又含有引物，只有極少數(shù)只含有引物或引物；每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性、延伸三個階段；DNA在260 nm的紫外線波段有強烈的吸收峰。答案：C