（全國(guó)通用版）2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 選考部分 生物技術(shù)實(shí)踐 課時(shí)檢測(cè)（三十九）微生物的培養(yǎng)和利用一、選擇題1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說(shuō)法，正確的是()A天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段D分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源解析：選C天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基，但也需要加工；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手應(yīng)消毒，不能滅菌；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源，不是碳源，需加入不含氮元素的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源。2平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法，下列敘述正確的是()A都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過(guò)接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)D都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落解析：選D平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋，稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。3某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是()A利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱取和稀釋土壤樣品時(shí)應(yīng)在火焰旁解析：選A分離細(xì)菌常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，但平板劃線法不能對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；篩選能分解石油的細(xì)菌，要以石油作為培養(yǎng)基中唯一的碳源；篩選細(xì)菌的整個(gè)操作過(guò)程都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，所以應(yīng)在火焰旁進(jìn)行。4下列關(guān)于大腸桿菌的培養(yǎng)敘述錯(cuò)誤的是()A在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件B在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒C若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的稀釋度合適D使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄解析：選B培養(yǎng)過(guò)程中，除營(yíng)養(yǎng)條件要滿足需要外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件是否適宜；滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以，應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌而不是消毒；使用稀釋涂布平板法時(shí)要保證樣品稀釋比例合適，這樣才會(huì)有更科學(xué)的數(shù)據(jù)；有的大腸桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，所以使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。5在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無(wú)菌濾紙片，d處濾紙片浸有無(wú)菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯(cuò)誤的是()Aa處抑菌效果小于b處Bb處的濾紙片沒(méi)有瀝干Cc處抗生素?zé)o效Dd為對(duì)照解析：選A培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同，透明圈越大，說(shuō)明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈并不小于b處；b處不是圓形的透明圈，可能是濾紙片沒(méi)有瀝干，抗生素流出濾紙片；c處無(wú)透明圈，說(shuō)明c處抗生素對(duì)大腸桿菌無(wú)效；d為空白對(duì)照。二、非選擇題6(2014·江蘇高考節(jié)選)為了獲得­胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開(kāi)展了產(chǎn)­胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是_；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該_。(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是_。(3)下圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是_。 (填序號(hào))安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見(jiàn)菌生長(zhǎng)，最可能的原因是_。解析：(1)實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)，在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用牛皮紙或干凈的報(bào)紙包扎器皿。(2)酵母菌是真菌，對(duì)青霉素具有抵抗能力，青霉素主要抑制細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)。(3)圖中甲為安全閥，乙為放氣閥，丙為壓力表。(4)接種的平板上未見(jiàn)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明接種不成功，原因可能是接種環(huán)灼燒后未冷卻，使菌株因溫度過(guò)高而被殺死。答案：(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報(bào)紙)包扎器皿(2)抑制細(xì)菌(放線菌)生長(zhǎng)(3)(4)接種環(huán)溫度過(guò)高，菌被殺死7如圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：(1)圖甲是利用_法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用_法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是_和_；對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是_和酒精消毒。(2)接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)行？_。(3)接種后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng)？_。(4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是_(填“圖甲”或“圖乙”)。解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進(jìn)行。在微生物培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌(2)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域(3)避免培養(yǎng)過(guò)程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長(zhǎng) (4)圖乙8(2018·江西贛中南五校聯(lián)考)如表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)根據(jù)表格和所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問(wèn)題：成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示劑瓊脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL(1)從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于_。(2)若根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于_(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來(lái)篩選出土壤中的尿素分解菌，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分必需怎樣更改？_，并用_作為指示劑。(3)在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_。(4)圖1和圖2是培養(yǎng)某細(xì)菌的結(jié)果圖，其對(duì)應(yīng)的接種方法分別是：_和_，這兩種方法接種后培養(yǎng)基上都可以得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖所形成的_。圖1所用的接種方法可用來(lái)對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外，測(cè)定微生物數(shù)目的另一種方法是_。(5)以下過(guò)程中所利用的主要微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)與大腸桿菌較相似的有_。A制作果酒 B由果酒制作果醋C制作泡菜 D制作腐乳解析：(1)大腸桿菌只能從環(huán)境中攝取有機(jī)物，不能自己合成有機(jī)物，屬于分解者。(2)該培養(yǎng)基中含有指示劑，屬于鑒別培養(yǎng)基。尿素分解菌可以分解尿素，而其他微生物不能，因此可將培養(yǎng)基中的蛋白胨改為尿素，用于篩選土壤中的尿素分解菌，并用酚紅作為指示劑。(3)培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要滅菌，操作者雙手需要進(jìn)行消毒。(4)圖1采用的是稀釋涂布平板法，圖2采用的是平板劃線法。單個(gè)微生物細(xì)胞繁殖所形成的細(xì)胞群叫菌落。(5)A、B、C、D中所利用的主要微生物是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌、毛霉，醋酸菌、大腸桿菌和乳酸菌都是原核細(xì)胞，結(jié)構(gòu)相似。答案：(1)分解者(2)鑒別將蛋白胨改成尿素酚紅(3)滅菌消毒(4)稀釋涂布平板法平板劃線法菌落顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(5)BC9臨床使用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用_法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周?chē)霈F(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素A_；含B的濾紙片周?chē)鷽](méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明該致病菌對(duì)抗生素B_；含C的濾紙片周?chē)耐该魅Ρ群珹的小，說(shuō)明_；含D的濾紙片周?chē)耐该魅σ脖群珹的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素_。解析：(1)實(shí)驗(yàn)室中對(duì)微生物純化培養(yǎng)時(shí)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個(gè)菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖，常用稀釋涂布平板法。(3)對(duì)某種抗生素越敏感的致病菌，在該抗生素存在的范圍內(nèi)，越不易生存，形成的透明圈就越大。如果在透明圈中還有菌落生存，則說(shuō)明這個(gè)菌落的細(xì)菌耐藥性很強(qiáng)。(4)通過(guò)(3)可知，在應(yīng)用時(shí)，要想殺死某致病菌，就得選擇能使該致病菌大量死亡，即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板(2)稀釋涂布平板(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A的弱耐藥菌(4)A10某市衛(wèi)生計(jì)生委發(fā)布的衛(wèi)生監(jiān)測(cè)信息顯示一些美容美發(fā)場(chǎng)所的毛巾、理發(fā)(美容)用具大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)。如圖甲為大腸桿菌含量檢測(cè)操作簡(jiǎn)圖，圖乙為伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基配方?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)_(填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā)，對(duì)某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌？_。(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無(wú)機(jī)鹽以外，還應(yīng)加入_(一種營(yíng)養(yǎng)成分)，以及_。待各成分都溶化后和分裝前，要進(jìn)行的是_和滅菌，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用器具是_。倒平板時(shí)要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要目的是_。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線的目的是_。要檢測(cè)樣液中的大腸桿菌含量，取25 cm2毛巾樣本，加5 mL蒸餾水，浸潤(rùn)半小時(shí)，然后在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL樣液；在37 的培養(yǎng)箱中放置48小時(shí)，3個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為49、48和47。據(jù)此可得出25 cm2毛巾樣液中的活菌數(shù)為_(kāi)。解析：(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌，濾膜過(guò)濾才能獲得大腸桿菌，對(duì)不耐高溫的試劑除菌時(shí)無(wú)法用高壓蒸汽滅菌法，可以用濾膜過(guò)濾達(dá)到除菌目的。(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無(wú)機(jī)鹽以外，還應(yīng)加入氮源以及瓊脂。配制的培養(yǎng)基在溶化后和分裝前需要先調(diào)整pH和滅菌，高壓蒸汽滅菌法常用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。倒平板后將平板倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。從功能上劃分，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)接種環(huán)灼燒滅菌后，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線，目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈深紫色，據(jù)題意可知，25 cm2毛巾樣本中的活菌數(shù)為(494847)÷3÷0.1×52.4×103。答案：(1)小于用濾膜過(guò)濾除菌(2)氮源瓊脂調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌鍋防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染鑒別(3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落2.4×10311(2018·惠州模擬)日前微博傳言手機(jī)細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過(guò)實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題：(1)該實(shí)驗(yàn)需制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、_等。(2)據(jù)圖，兩電視臺(tái)均采用_法接種，該方法需要_(多選)。A接種環(huán) B酒精燈C移液管D涂布器E無(wú)菌水(3)通過(guò)觀察菌落的_，可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是：_。(4)按圖操作取樣面積，實(shí)驗(yàn)員測(cè)定某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10 mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1 mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個(gè)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)分別為48、50、52，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為_(kāi)個(gè)/平方厘米。該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組該如何設(shè)置？_。解析：(1)微生物培養(yǎng)基的成分一般包括水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。(2)據(jù)圖分析可知，該實(shí)驗(yàn)的接種方法為稀釋涂布平板法，該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無(wú)菌水等。(3)不同的菌落形態(tài)、大小不同，圖示兩個(gè)電視臺(tái)調(diào)查的手機(jī)屏幕和馬桶按鈕都有多種形態(tài)的菌落，即存在多種微生物。兩電視臺(tái)實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致，但報(bào)道結(jié)果截然不同，可能是因?yàn)槭謾C(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同。(4)根據(jù)提供的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，某手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)(485052)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)2×104(個(gè)/平方厘米)。答案：(1)氮源和無(wú)機(jī)鹽(2)稀釋涂布平板 BCDE(3)形態(tài)、大小手機(jī)的取樣和馬桶的取樣都不相同 (4)2×104取培養(yǎng)基涂布0.1 mL無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)