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1、2022年高中生物 第四章 生物化學與分子生物學技術實踐 4.1 DNA粗提取與鑒定教案(選修1)
一、學習目標
1、通過嘗試對植物或動物組織中的DNA進行粗提取,了解DNA的物理化學性質。
2、理解DNA粗提取與鑒定的原理??
3.掌握DNA如提取計數(shù),能利用DNA的性質進行實驗設計和操作
二、知識構成:
1提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性兩個方面。問:提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?
2.DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使DNA溶解,需要使用什么濃度?要使DNA析出,又需要使用什么濃度?
3、酒精是一種常用有機溶劑,但DNA卻不能溶于酒
2、精(特別是95%冷卻酒精),但細胞中蛋白質可溶于酒精。問:采用DNA不溶于酒精的原理,可以達到什么目的?
4、提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?
5、思考:洗滌劑在提取DNA中有何作用?
6、當鑒定提取出的物質是否是DNA時,需要使用什么指示劑進行鑒定?
7、不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時,應本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。你認為教材提
3、供的材料中哪些不適合提取DNA?
8、從核DNA數(shù)目來看,豬38條,雞78條,哺乳動物血0條,獼猴桃58條,洋蔥16條,豌豆14條,菠菜12條,大腸桿菌1條。請選擇動植物材料各一種。
9、若選用雞血和洋蔥作實驗材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?
10、在以上實驗中,加入蒸餾水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?過濾時應當選用(濾紙、尼龍布)。
11、在處理植物組織時需要進行研磨,其目的是什么?研磨不充分產生什么結果?
具體做法。
4、
12、在濾液中仍然含有一些雜質,怎樣除去這些雜質呢?得到的DNA呈何顏色?
13、怎樣鑒定析出的白色絲狀物就是DNA呢?閱讀教材。
具體做法。試管2支,編號甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色絲狀物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均勻→沸水浴5min→觀察顏色變化
3.總結DNA粗提取和鑒定的實驗操作過程。
三、學法和自檢:
1 在DNA分子的粗提取實驗中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是( )
A. 稀釋血液、沖洗樣品
B. 使血細
5、胞破裂,降低NaCl濃度使DNA析出
C. 使血細胞破裂,增大DNA溶解度
D. 使血細胞破裂,提取含雜質較少的DNA
2 在制備雞血細胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的是( )
A. 防止凝血 B. 加快DNA析出 C. 加快DNA溶解 D. 加速凝血
課題
四、達標檢測
1.在研究DNA的基因樣本前,采集來的血樣需要蛋白水解酶處理,然后用有機溶劑除去蛋白質。用蛋白水解酶處理血樣的目的是( )
A.除去血漿中的蛋白質 B.除去染色體上的蛋
6、白質 C.除去血細胞表面的蛋白質
D.除去血細胞中的所有的蛋白質,使DNA釋放,便于進一步提純
2.與析出DNA粘稠物有關的敘述,不正確的是( )
A.操作時緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度
B.在操作A時,用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子完整
C.加蒸餾水可同時降低DNA和蛋白質的溶解度,兩者均可析出
D.當絲狀粘稠物不再增加時,此時NaCl的濃度相當于0.14mol/L
3.洗滌劑能夠瓦解( ),但對DNA沒有影響。
A.細胞壁 B.細胞膜 C.細胞核 D.細胞質
4.在沸水浴的條件下,DNA遇( )會被染成藍色。
7、
A.斐林試劑 B.蘇丹Ⅲ染液 C.雙縮脲試劑 D.二苯胺
5.在DNA提取過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是( )
A.不易破碎 B.減少提取過程中DNA的損失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷
6.下列操作中,對DNA的提取量影響最小的是( )
A.使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質
B.攪拌時,要使用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌
C.在“析出DNA粘稠物”時,要緩緩加蒸餾水,直至溶液中粘稠物不再增加
D.在用酒精沉淀DNA時,要使用冷酒精,甚至再將混合液放入冰箱中冷卻
E在DNA的溶解和再溶解時,要充分攪拌
7.
8、DNA的粗提取中,將與濾液體積相等的、冷卻的( ),靜置2—3min,溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物。
A.0.9%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液
C.質量分數(shù)15%的HCl D.體積分數(shù)為95%的酒精溶液
8.以血液為實驗材料時,需要向血液中加入( ),防止血液凝固。
A.醋酸鈉 B.龍膽紫 C.檸檬酸鈉 D.醋酸洋紅
9.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是( )
A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解雜質的速度
C.減少DNA的溶解度,加快DNA析出 D.減小雜質
9、的溶解度,加快雜質的析出
10.去除濾液中的雜質時,直接在濾液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的( )分解蛋白質。
A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.腸肽酶
五、學習小結和課外作業(yè):
1、學習小結:
2、上本作業(yè):
3、課本或資料選題:
4、補充練習:
DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性,隨著NaCl溶液的變化而變化。
(1)請在下列NaCl溶液中選出溶解度能使DNA析出最徹底的一種( )和溶解度最高的一種( )
A. 0.14mol/l B. 2mol/l C. 0.15mol/l D. 0.3mol/l
(2)DNA不溶于酒精溶液,但細胞中的某些物質卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以____________,可以推測溶于酒精中的物質可能有____________。
(3)利用DNA與_____變藍色的特性,將該物質作為鑒定______的試劑。其實驗過程要點是向放有_____的試管中加熱4ml的____?;旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜赺__5min,待試管______,觀察試管中溶液顏色的變化,這個實驗也說明DNA耐___溫。
答案:(1)A;B (2)除去雜質;某些脂類、蛋白質、糖類或其他大分子物質
(3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺試劑;沸水中水浴加熱;冷卻后;高