專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)業(yè)分層測評(建議用時：45分鐘)學(xué)業(yè)達(dá)標(biāo)1不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含()A碳源、磷酸鹽和維生素B氮源和維生素C水、碳源、氮源和無機(jī)鹽D碳元素、氧元素、氫元素、氮元素【解析】培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，此外還應(yīng)考慮pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)及O2等條件?！敬鸢浮緾2下列說法正確的是()A為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)基質(zhì)的是固體培養(yǎng)基B培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落【解析】培養(yǎng)基是微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)不同，可將培養(yǎng)基分成固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基；要想得到液體培養(yǎng)基只需不加凝固劑即可?！敬鸢浮緿3獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌B接種純種細(xì)菌C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D防止外來雜菌的入侵【解析】獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵?！敬鸢浮緿4在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，下列各項(xiàng)操作不需要在無菌條件下進(jìn)行的是()A配制培養(yǎng)基 B倒平板C接種 D培養(yǎng)【解析】配制培養(yǎng)基時不需要無菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐囵B(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌?！敬鸢浮緼5能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A稀釋涂布平板法 B重量法C直接計(jì)數(shù)法 D比濁法【解析】利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下，將細(xì)菌個體從固體培養(yǎng)基上分離出來，并可以繁殖形成菌落，可根據(jù)菌落數(shù)測定樣品活菌數(shù)?！敬鸢浮緼6煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是() 【導(dǎo)學(xué)號：05520013】A溫度不同B時間不同C前者適用于固體消毒，后者適用于液體消毒D沒有區(qū)別【解析】煮沸消毒法是指在100 條件下煮沸56 min，而巴氏消毒法則是在7075 條件下煮30 min或在80 條件下煮15 min，二者的關(guān)鍵區(qū)別是溫度不同?！敬鸢浮緼7關(guān)于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備，敘述錯誤的是()A操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時進(jìn)行倒平板D等平板冷卻凝固約510 min后將平板倒過來放置【解析】制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時，其操作順序?yàn)橛?jì)算稱量溶化滅菌倒平板；由于牛肉膏比較黏稠，稱量時可連同稱量紙一同放入燒杯；待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時，在酒精燈火焰附近倒平板；平板冷凝后，應(yīng)將平板倒過來放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染?！敬鸢浮緼8下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述中，錯誤的是()A首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C適宜條件下培養(yǎng)D結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落【解析】稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。只有在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物才能被分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。故選D?！敬鸢浮緿9微生物培養(yǎng)過程中，肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是()A細(xì)菌的大小、形狀、顏色B菌落的大小、形狀、顏色C有無鞭毛D培養(yǎng)基的不同【解析】微生物的鑒別和分離，一般要用固體培養(yǎng)基，由于不同微生物在固體培養(yǎng)基上長出菌落的形狀、顏色等各不相同，所以可以作為鑒別的標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)槊恳粋€細(xì)菌細(xì)胞很小，肉眼無法看到其顏色、形狀等?！敬鸢浮緽10某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察、計(jì)數(shù)。請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題：(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌的培養(yǎng)提供了_和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和_。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種_作為對照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有_種細(xì)菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越_。【解析】用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等成分，碳源、氮源一般分別由糖類和蛋白質(zhì)類物質(zhì)所提供。對培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。在檢測湖水中細(xì)菌的污染情況時，應(yīng)設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，才能得出可靠的結(jié)果?！敬鸢浮?1)氮源碳源無機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌法(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高能力提升11某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次【解析】培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中；轉(zhuǎn)換劃線角度后要灼燒接種環(huán)，冷卻后再從上次劃線的末端開始進(jìn)行劃線；接種后的培養(yǎng)皿必須放在恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)，一般每隔12 h或24 h觀察一次?！敬鸢浮緽12金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法錯誤的是()A對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D接種后雙手必須用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭【解析】金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，所以在操作時一定要做到安全防范，接種后雙手用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到殺菌的作用；對接種環(huán)進(jìn)行灼燒也可以殺滅細(xì)菌，防止污染環(huán)境；高壓蒸汽滅菌也可殺死培養(yǎng)基中的金黃色葡萄球菌；如果只對帶菌培養(yǎng)基進(jìn)行加熱，殺不盡其中的致病菌，因?yàn)榇司哪透邷啬芰軓?qiáng)，會污染環(huán)境?！敬鸢浮緾13.如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?2345。下列操作方法正確的是()A操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B劃線操作須在火焰上進(jìn)行C在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌【解析】本題考查平板劃線的操作方法。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在5個區(qū)域中，只要有單個活細(xì)菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落?！敬鸢浮緿14下圖為平板劃線法分離純化細(xì)菌示意圖。根據(jù)所學(xué)生物學(xué)知識，回答下列問題。(1)微生物所需的營養(yǎng)成分包括_、_、水和無機(jī)鹽。(2)培養(yǎng)微生物時，除考慮微生物生長所需的營養(yǎng)外，還要考慮微生物生長所需的溫度、_以及是否需要O2等。(3)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時，多采用_法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用_法。(4)平板劃線時，為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始，所以每次劃線前都要_，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線_。(5)脲酶可以將尿素分解為氨，從而使尿素溶液pH升高，這可用_試劑來檢驗(yàn)。用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到的纖維素分解菌中可能還混雜有_。(6)抗生素可以抑制肽聚糖合成，從而可以抑制多數(shù)原核生物繁殖。實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有酵母菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌三種微生物混雜生長的固體培養(yǎng)基，已知大腸桿菌菌落遇伊紅美藍(lán)試劑變?yōu)樽仙?，并帶有金屬光澤；金黃色葡萄球菌耐高濃度食鹽水，菌落為金黃色；酵母菌細(xì)胞壁成分主要為幾丁質(zhì)，營養(yǎng)條件好，氧氣充足時，顯微鏡下可見典型的出芽生殖。現(xiàn)在請你設(shè)計(jì)一個合理的實(shí)驗(yàn)方案，從一個培養(yǎng)基中，將三種微生物一次分離開來。(所需試劑可自選)_?！窘馕觥科桨鍎澗€法如劃線相重合則不能分離出純種；酚酞可檢測堿性溶液，用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到纖維素分解菌，但自養(yǎng)菌可以利用空氣中的CO2生存，需要進(jìn)一步分離；根據(jù)條件可以將不同菌落分離開來?！敬鸢浮?1)碳源氮源(2)pH(3)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌(4)對接種環(huán)灼燒滅菌相交(相接、相連、交叉等)(5)酚酞自養(yǎng)微生物(硝化細(xì)菌)(6)根據(jù)菌落顏色，首先分離出金黃色葡萄球菌，然后向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，將變?yōu)樽仙?，帶有金屬光澤的菌落分離出來，得到大腸桿菌，然后加入非磺胺類抗生素如青霉素，將培養(yǎng)基中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌殺死，得到酵母菌(分離順序不唯一，答案合理即可)15炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實(shí)驗(yàn)確診。(1)細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定：實(shí)驗(yàn)流程如下圖所示：對配制的液體培養(yǎng)基等需采取_方法滅菌；實(shí)驗(yàn)所用液體培養(yǎng)基的碳源為_(填“無機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。挑選可疑菌落制片后，用_觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。接種可疑菌后，35 培養(yǎng)24 h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是_。對照組試管中應(yīng)加入_，與實(shí)驗(yàn)組同時培養(yǎng)6 h后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組_(填“高”或“低”)，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞外，還有_?！窘馕觥颗囵B(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽方法進(jìn)行滅菌。炭疽桿菌同化類型為異養(yǎng)型，應(yīng)選有機(jī)碳作為其碳源。微生物個體小，肉眼觀察不到，必須借助顯微鏡才能觀察到菌體特征。在液體培養(yǎng)基中，細(xì)菌大量繁殖會導(dǎo)致培養(yǎng)液變渾濁；該實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)變量為是否加入噬菌體，所以對照組除不加噬菌體外，其他處理都應(yīng)該和實(shí)驗(yàn)組保持一致(即應(yīng)加入不含噬菌體的生理鹽水)。噬菌體可破壞細(xì)菌細(xì)胞，從而使培養(yǎng)液變清。在特異性免疫的感應(yīng)階段，吞噬細(xì)胞參與了對抗原的攝取、處理和呈遞，效應(yīng)B(漿)細(xì)胞是直接產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。【答案】(2)高壓蒸汽(98 kPa蒸汽)有機(jī)碳顯微鏡細(xì)菌大量繁殖等量生理鹽水低吞噬細(xì)胞、效應(yīng)B(漿)細(xì)胞