專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1下列有關(guān)培養(yǎng)基敘述正確的是()A培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分都有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽B除水以外的無機(jī)物都屬于無機(jī)鹽C用培養(yǎng)基培養(yǎng)甲型H1N1流感病毒作為科學(xué)研究D培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)調(diào)pH，適應(yīng)各微生物的生長解析：固氮微生物培養(yǎng)基可無氮源，有的無機(jī)物如NH4NO3可作氮源，H1N1流感病毒必須寄生在細(xì)胞內(nèi)，不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)。答案：D2關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是()A滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的C接種環(huán)用灼燒的方法滅菌D常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌等解析：消毒是指用溫和的理化方法殺死體表或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，滅菌則是用強(qiáng)烈的理化因素殺死體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案：B3制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是()A計(jì)算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D計(jì)算、稱量、滅菌、溶化、倒平板解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，應(yīng)先根據(jù)需要計(jì)算各成分用量，然后稱量、溶化、滅菌、倒平板。答案：C4平板冷凝后，要將平板倒置，其原因是()A接種時(shí)再拿起來方便B在皿底上標(biāo)記日期等方便C正著放置容易破碎D防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染解析：平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。答案：D5氯苯化合物是重要的有機(jī)化工原料，其不易降解，會(huì)污染環(huán)境。某研究小組依照下列實(shí)驗(yàn)方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表：液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機(jī)鹽(無碳)蒸餾水號(hào)10 g 5 g 5 mg 5 g 1 L 號(hào) 50 mg 5 g 3 g 適量 1 L 號(hào) 2080 mg5 g 3 g 適量 1 L圖1(1)配制號(hào)固體培養(yǎng)基時(shí)，除添加號(hào)液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的_。(2)培養(yǎng)基配制時(shí)，滅菌與調(diào)pH的先后順序是_。(3)在號(hào)培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是_。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時(shí)，SP1的菌體變成一個(gè)圓形的休眠體，這種休眠體被稱為_。(5)將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的號(hào)培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖2)。從圖2可知，SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是_。圖2解析：本題考查培養(yǎng)基的配制原則以及微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程，意在考查學(xué)生的圖表信息轉(zhuǎn)換與分析能力。配制固體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)在液體培養(yǎng)基的成分中再加入瓊脂作為凝固劑。在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后進(jìn)行滅菌，防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基。在營養(yǎng)缺乏、環(huán)境惡劣時(shí)，微生物可以形成休眠體芽孢，來度過不良環(huán)境。據(jù)圖可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下菌體數(shù)最早達(dá)到最大值，即最早停止生長，原因是在號(hào)培養(yǎng)液中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下碳源最少，因此也最早被耗盡，使SP1菌停止生長。答案：(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)硝酸銨(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡1下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是()A培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B培養(yǎng)基只有兩類：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌解析：培養(yǎng)基除固體、液體培養(yǎng)基外，還有半固體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；固體培養(yǎng)基中加入了凝固劑，加入少量水仍為固體培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí)，可以形成肉眼可見的菌落，但不一定是單個(gè)菌落，D錯(cuò)誤。答案：A2有關(guān)培養(yǎng)基配制原則表述正確的是()A任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長因子B碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到pH、氧、滲透壓的影響D營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好解析：培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時(shí)不需要添加碳源，培養(yǎng)固氮菌時(shí)可以不加氮源；一般來說，培養(yǎng)基中含量最多的是水；配制培養(yǎng)基時(shí)要合理控制營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，必須考慮微生物對(duì)滲透壓的耐受能力。答案：C3下面對(duì)微生物培養(yǎng)中滅菌的理解不正確的是()A防止雜菌污染B滅菌就是殺死培養(yǎng)基中的雜菌C培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備都必須進(jìn)行滅菌D滅菌必須在接種前解析：滅菌的目的是防止雜菌污染，但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。答案：B4自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別在于()A碳源B氮源C無機(jī)鹽 D生長因子解析：自養(yǎng)型微生物主要包括進(jìn)行光合作用或進(jìn)行化能合成作用的微生物，他們能夠利用CO2來合成自身所需的有機(jī)物；而異養(yǎng)型微生物主要是直接利用外界的有機(jī)物來合成自身所需的有機(jī)物，所以他們培養(yǎng)基的主要差別就在于自養(yǎng)型微生物主要是利用無機(jī)物中的碳，而異養(yǎng)型微生物主要是利用有機(jī)物中的碳。答案：A5下列制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是()A操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C將培養(yǎng)基冷卻至50 左右時(shí)進(jìn)行倒平板D將平板冷卻凝固約510 min后將平板倒過來放置解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，順序不能顛倒。牛肉膏容易吸潮，所以當(dāng)牛肉膏融化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。將培養(yǎng)基冷卻至50 ，用手觸摸錐形瓶感覺剛剛不燙手時(shí)倒平板，平板冷卻后還需倒置。答案：A6平板冷卻凝固后要將平板倒置，其意義是()A利于大腸桿菌的接種B有利于大腸桿菌培養(yǎng)C利于培養(yǎng)基的冷卻D防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基，防止雜菌污染解析：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。答案：D7純化大腸桿菌的步驟正確的是()A樣品稀釋劃線或涂布法分離培養(yǎng)成單菌落B樣品稀釋培養(yǎng)成單菌落劃線或涂布法分離C樣品稀釋劃線或涂布分離培養(yǎng)成單菌落D樣品稀釋劃線涂布分離培養(yǎng)成單菌落解析：微生物的分離與純化主要包括樣品稀釋、劃線或涂布及培養(yǎng)三個(gè)基本步驟，其中劃線或涂布法是對(duì)微生物進(jìn)行分離，培養(yǎng)是將分離后的菌種培養(yǎng)成單個(gè)菌落。答案：A8某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次解析：在配制培養(yǎng)基的過程中要先滅菌后倒平板，A錯(cuò)誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌再進(jìn)行劃線，B正確；接種后放置在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)過程中一般隔12 h或24 h觀察一次，D錯(cuò)誤。答案：B9現(xiàn)有菌液10 mL，按下圖進(jìn)行系列稀釋，在最后一個(gè)試管中測(cè)得細(xì)菌數(shù)為20個(gè)，則未稀釋前的試管中有細(xì)菌()A600個(gè) B1 200個(gè)C2107個(gè) D2106個(gè)解析：從本題的圖中可看出，每次都是稀釋10倍，總共稀釋6次，即稀釋106倍，最后一個(gè)試管為20個(gè)，即原來菌液中應(yīng)該有細(xì)菌2107個(gè)。答案：C10為了保持菌種的純凈需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述不正確的是()A對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法B臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上C臨時(shí)保藏菌種容易被污染或產(chǎn)生變異D對(duì)于需要長期保存的菌種，可以采用低溫4 保藏的方法解析：低溫4 保藏屬于臨時(shí)保藏的方法。答案：D11為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟：計(jì)算稱量_倒平板。(2)稱量時(shí)，由于牛肉膏比較黏稠，可以用_挑取，放在_上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨_，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速，稱量后要及時(shí)蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌能生長，說明培養(yǎng)基含有_等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如_和_等，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)_，從而獲得純菌株。解析：配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基的基本步驟：計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板。稱量時(shí)，可用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量，稱量時(shí)動(dòng)作要迅速。牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中含有大腸桿菌所需要的碳源、氮源、無機(jī)鹽、水等營養(yǎng)要素，所以常用來培養(yǎng)大腸桿菌。微生物純化培養(yǎng)的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，可使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落，從而獲得純菌株。答案：(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落12下表為牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，據(jù)此回答：牛肉膏蛋白胨NaClH2O瓊脂0.5 g1.0 g0.5 g100 mL2.0 g(1)蛋白胨在培養(yǎng)基中的作用是_。(2)此培養(yǎng)基如要培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH值調(diào)至_。(3)從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌感染的方法有：_。(4)在培養(yǎng)基凝固前要擱置斜面，其目的是_。(5)若用此培養(yǎng)基純化大腸桿菌，最常用的方法是_、_，最終，使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個(gè)_，從而獲得純菌株。答案：(1)提供碳源、氮源、生長因子(2)酸性(3)高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉擦手、棉塞塞試管口、在火焰旁接種(4)擴(kuò)大接種面積(5)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落13下圖是倒平板操作示意圖，請(qǐng)回答下列問題：(1)正確的操作順序是_。(2)平板冷凝后將平板倒置原因是_。(3)在倒平板過程中如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的部位，這個(gè)平板還能培養(yǎng)微生物嗎？_，原因是_。答案：(1)ACBD(2)利于水蒸氣的散發(fā)、防止雜菌污染(3)不能這樣容易被雜菌污染