生物技術(shù)實踐(建議用時：40分鐘)1如圖是植物組織培養(yǎng)過程示意圖，請回答有關(guān)問題：外植體愈傷組織長出叢芽生根移栽成活(1)外植體若是菊花莖段組織，則在配制MS固體培養(yǎng)基時，_(填“必需”或“不必”)添加植物激素。(2)外植體若是月季的花藥，則圖中的過程_(填“需要”或“不需要”)光照，而經(jīng)過程培養(yǎng)出的植物一般稱為_植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過_階段發(fā)育而來。(3)外植體若是菊花的根尖組織，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是_，該過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有_。(4)植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂和分化的關(guān)鍵性激素，在植物組織培養(yǎng)過程中：若先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，實驗結(jié)果是細(xì)胞_。當(dāng)同時使用這兩種激素時，生長素用量比細(xì)胞分裂素用量的比值_(填“高”、“低”或“適中”)時，促進(jìn)愈傷組織的形成。解析：(1)由于菊花莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此在配制MS固體培養(yǎng)基時，不必添加植物激素。(2)圖中的過程表示脫分化，花藥培養(yǎng)的脫分化過程中不需要光照。通過花藥離體培養(yǎng)獲得的是單倍體植株。該植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以是花粉通過胚狀體階段發(fā)育而來。(3)外植體若是菊花的根尖組織，由于植物細(xì)胞具有全能性，根尖細(xì)胞具有全套的遺傳物質(zhì)，則在正常環(huán)境下培養(yǎng)成的新菊花植株葉片的顏色是綠色。(4)植物中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢，分化頻率高。在植物組織培養(yǎng)過程中，若先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，實驗結(jié)果是細(xì)胞既分裂也分化。生長素用量與細(xì)胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化，抑制根的形成；比例適中時，促進(jìn)愈傷組織的形成。答案：(1)不必(2)不需要單倍體(花粉)胚狀體(3)綠色全能性(4)既分裂也分化適中2辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖：(1)圖中和分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的_和_過程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是_。培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)時，有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應(yīng)采取的滅菌方法是_。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是_。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時，常用的酶是_和纖維素酶。(4)提取辣椒素過程中，萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置，其目的是_。解析：(1)將外植體培養(yǎng)成愈傷組織，屬于脫分化過程，再生根、芽為再分化過程。(2)固體培養(yǎng)基的凝固劑多為瓊脂。利于芽分化的激素比例為生長素低于細(xì)胞分裂素，高壓蒸汽滅菌可以殺死環(huán)境中的一切細(xì)胞、芽孢、孢子。(3)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精可以殺死外植體表面的微生物。植物細(xì)胞間質(zhì)為果膠和纖維素，可以用果膠酶和纖維素酶使愈傷組織分散為單個細(xì)胞。(4)冷凝可以防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)。答案：(1)脫分化(或去分化)再分化(2)瓊脂低高壓蒸汽滅菌(3)70%果膠酶(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)3如圖表示金花茶莖段的離體培養(yǎng)過程。請回答下列問題：(1)金花茶組織培養(yǎng)利用的原理是_，常用的一種培養(yǎng)基是_。在該培養(yǎng)基配制好后，常需要添加_。(2)在接種前需要對金花茶莖段進(jìn)行_。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，檢測的方法是將未接種的培養(yǎng)基_。若用金花茶的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)，從花粉粒的選擇上看，應(yīng)選擇_期的花粉粒為宜。(3)某人在探究植物激素對細(xì)胞脫分化和再分化的影響實驗時，得到如下實驗結(jié)果：只有細(xì)胞分裂素時，組織塊產(chǎn)生愈傷組織；細(xì)胞分裂素生長素時，愈傷組織不分化；細(xì)胞分裂素>生長素時，愈傷組織分化出芽；細(xì)胞分裂素<生長素時，愈傷組織分化出根。由實驗結(jié)果，你能得出的結(jié)論是_。解析：(1)植物組織培養(yǎng)利用的原理是植物細(xì)胞的全能性，其常用的一種培養(yǎng)基是MS固體培養(yǎng)基。在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加植物激素，其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(2)接種前，需要對莖段(外植體)進(jìn)行消毒處理。為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底，可將未接種的培養(yǎng)基在適宜環(huán)境中放置一段時間，并觀察培養(yǎng)基上是否有菌落出現(xiàn)，若有則證明培養(yǎng)基滅菌不徹底。一般來說，在單核期，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)，花粉培養(yǎng)成功率最高。單核期以前的花藥質(zhì)地幼嫩，極易破碎；單核期以后的花藥所在植株的花瓣已有些松動，材料不易消毒。(3)根據(jù)結(jié)果，可知細(xì)胞分裂素可調(diào)節(jié)組織塊產(chǎn)生愈傷組織；根據(jù)結(jié)果，可知細(xì)胞分裂素和生長素含量不同，調(diào)節(jié)愈傷組織的分化方向不同。答案：(1)植物細(xì)胞的全能性MS固體培養(yǎng)基 植物激素(2)消毒在37 恒溫箱中放置24小時(或在適宜溫度下放置一段時間)后，觀察是否有菌落出現(xiàn)單核(3)植物激素的種類和含量不同，對愈傷組織的形成和分化的影響不同4請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題：(1)提取植物芳香油時可采用的方法有萃取法、_和_。(2)玫瑰油被稱為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)中不可取代的原料，多用于制造高級香水等化妝品。下圖表示提取玫瑰油的流程，其中A表示_；B表示_，其中加入NaCl的作用是_。(3)植物芳香油溶解性的特點是不溶于_，易溶于_，因此可用其作為提取劑來提取植物芳香油。(4)檸檬油是一種廣譜性的殺蟲劑，通常以檸檬花與檸檬果皮為原料進(jìn)行提取，但方法不同，其中以檸檬果皮為原料時常采用_法提取檸檬油。解析：(1)提取植物芳香油時可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。(2)因為水和芳香油沸點不同，可利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層，因此，一般采用的提取玫瑰油的方法是水蒸氣蒸餾法。A表示水蒸氣蒸餾，B表示無水硫酸鈉，加入NaCl會增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層。(3)植物芳香油不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑。(4)以檸檬果皮為原料時常采用壓榨法。答案：(1)蒸餾法壓榨法(兩空答案順序可顛倒)(2)水蒸氣蒸餾無水硫酸鈉增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層(3)水有機(jī)溶劑(4)壓榨5回答下列有關(guān)從生物材料中提取某些特定成分的問題：(1)薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似，因此適合選用_法來提取。用此方法收集到的液體_(是/不是)純的薄荷油，原因是_。在此過程中，影響薄荷油提取量的主要因素有_和_。(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是_法。用這種方法提取胡蘿卜素的主要步驟是：粉碎、干燥、萃取、_、_。(3)如圖是某同學(xué)對萃取的胡蘿卜素樣品所做的鑒定實驗的結(jié)果。圖中實驗組是_，實驗得出的結(jié)論是_。解析：(1)薄荷油和玫瑰精油都是芳香油，易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，因此可用水蒸氣蒸餾法進(jìn)行提取。由于薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物，不是純的薄荷油。蒸餾溫度太高、時間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。(2)胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑，可用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，步驟是：粉碎干燥萃取過濾濃縮。(3)胡蘿卜素萃取后溶于有機(jī)溶劑，圖中實驗組是B、C，對照組是A、D。答案：(1)水蒸氣蒸餾不是薄荷油隨水蒸氣一起蒸餾出來，所得到的是油水混合物蒸餾時間蒸餾溫度(2)萃取過濾濃縮(3)B、C萃取樣品中不含胡蘿卜素6將植物中的有效成分提取出來，有很多用途，可顯著提高其利用價值。請結(jié)合所學(xué)知識回答：(1)許多植物芳香油的提取在原理和程序上具有相似性，某同學(xué)結(jié)合玫瑰精油的提取，設(shè)計提取茉莉油的實驗流程如下：茉莉花水A油水混合物B加CD茉莉油流程圖中的A表示_過程，B過程常需要用到的儀器是_，C物質(zhì)是_，加C的目的是_。茉莉油的提取能否采用這一流程進(jìn)行生產(chǎn)，應(yīng)該考慮茉莉油是否像玫瑰油一樣具有較強的_，還應(yīng)考慮茉莉花在水中蒸餾是否會出現(xiàn)_等問題。(2)辣椒素的提取與胡蘿卜素的提取有類似之處?？刹捎幂腿》ㄟM(jìn)行提取。提取時若需要加熱，應(yīng)采用水浴加熱的方法，原因是_；加熱時，還要在瓶口安裝冷凝回流裝置，其目的是_。解析：(1)玫瑰精油的提取方法為水蒸氣蒸餾法。流程圖中的A過程為水蒸氣蒸餾過程。蒸餾獲得的油水混合物需借助分液漏斗分離油層和水層。油水分層后需用無水Na2SO4除水。水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理是利用了植物芳香油所具有的揮發(fā)性，隨水蒸氣一起蒸餾，但是對原料易焦糊和有效成分易水解的植物芳香油則不能用該方法提取。(2)用有機(jī)溶劑萃取時，由于有機(jī)溶劑易揮發(fā)，且易燃易爆，因此不能直接使用明火加熱，應(yīng)采用水浴加熱的方法，否則容易引起燃燒、爆炸。萃取時冷凝回流裝置的作用是防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)。答案：(1)水蒸氣蒸餾分液漏斗無水Na2SO4除水揮發(fā)性原料焦糊和有效成分水解(2)有機(jī)溶劑都是易燃物，直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)7自印度科學(xué)家培養(yǎng)曼陀羅花藥獲得單倍體植株后，花藥離體培養(yǎng)技術(shù)迅速發(fā)展，據(jù)記載，現(xiàn)在已經(jīng)有250多種高等植物的花藥培養(yǎng)成功。(1)細(xì)胞分裂素和生長素的使用順序和用量會影響到植物細(xì)胞的發(fā)育方向。如為了有利于細(xì)胞分裂而不分化，兩種激素的使用順序為：_。花粉植株產(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成_。(2)進(jìn)行月季花藥離體培養(yǎng)一般選擇在五月初到五月中旬。對于花粉而言，要采用_期的花粉，為了鑒定該時期的花粉，常采用醋酸洋紅法進(jìn)行染色鑒定。若是某些植物花粉細(xì)胞不易著色，常采用_法染色，能將花粉的細(xì)胞核染成_色。(3)消毒后的花蕾，在無菌條件下除去萼片與花瓣，剝離花藥時，盡量不要損傷花藥，同時要將_徹底去除。解析：(1)先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素，有利于細(xì)胞分裂而不分化。花粉植株產(chǎn)生的途徑有兩種：一種是花粉脫分化形成愈傷組織，另一種是形成胚狀體。(2)單核期的花粉對離體刺激比較敏感，因此一般選擇單核期的花粉作為外植體。鑒定花粉發(fā)育時期的方法有醋酸洋紅法和焙花青鉻礬法。焙花青鉻礬法可以將不易著色的花粉細(xì)胞的細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。(3)花絲影響外植體的發(fā)育，因此剝離花藥時要將花絲徹底去除。答案：(1)先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素胚狀體(2)單核焙花青鉻礬藍(lán)黑(3)花絲