第34講 酶的應(yīng)用 考綱要求1.果汁中的果膠和果膠酶(加試)。2.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)(加試)。考點(diǎn)一果汁中的果膠和果膠酶1果膠(1)果膠的化學(xué)組成：由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成，是植物細(xì)胞壁的主要成分。(2)果膠與果汁加工：果膠不僅影響出汁率，還會(huì)使果汁渾濁。2果膠酶(1)來(lái)源：黑曲霉、蘋(píng)果青霉等。(2)組成：果膠酶并不是特指某一種酶，而是分解果膠的一類(lèi)酶的總稱(chēng)，主要包括果膠酶和果膠甲酯酶。(3)作用：將果膠分解成可溶性的分子，使出汁率提高，也使渾濁的果汁變得澄清。3探究利用蘋(píng)果或山楂勻漿制作果汁的最佳條件的實(shí)驗(yàn)(1)實(shí)驗(yàn)原理果膠半乳糖醛酸半乳糖醛酸甲酯。果膠酶的活性受溫度(或pH)的影響，處于最適溫度(或pH)時(shí)活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比。果膠不溶于乙醇。(2)實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計(jì)思考診斷1探究溫度、pH對(duì)果膠酶活性的影響以及果膠酶用量的實(shí)驗(yàn)中，因變量都相同，該因變量是什么？提示三個(gè)實(shí)驗(yàn)的因變量都是果汁量或果汁的澄清度。2探究溫度、pH對(duì)果膠酶活性的影響以及果膠酶用量的實(shí)驗(yàn)中，都需要設(shè)置多組實(shí)驗(yàn)，相鄰兩組之間都有一定的“差值”(如“溫差”、“pH差”)，該“差值”的大小與實(shí)驗(yàn)的誤差大小有何聯(lián)系？提示該差值大小與實(shí)驗(yàn)誤差的大小成正相關(guān)，即差值越小則誤差越小，差值越大則誤差越大。3表格分析：下表是某小組利用部分材料進(jìn)行的有關(guān)實(shí)驗(yàn)(“/”表示不加)，提供材料如下?，F(xiàn)有磨漿機(jī)、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液、蒸餾水、一定濃度的鹽酸和氫氧化鈉溶液等實(shí)驗(yàn)材料及試劑。請(qǐng)答下列4個(gè)問(wèn)題：編號(hào)項(xiàng)目試管甲乙丙丁1在試管中加入蘋(píng)果泥2 mL2 mL2 mL2 mL22 mL/2 mL2 mL3加入不同的液體2 mL蒸餾水4 mL蒸餾水2 mL鹽酸2 mL氫氧化鈉4搖勻，恒溫處理15分鐘15分鐘15分鐘15分鐘(1)表中處的內(nèi)容是加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的果膠酶溶液。(2)若要驗(yàn)證果膠酶的作用，應(yīng)把甲與乙兩個(gè)試管同時(shí)取出并過(guò)濾相同時(shí)間，觀察并比較，預(yù)期的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象與結(jié)果是甲果汁比乙澄清。(3)比較試管甲、丙、丁可知，其實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄縫H對(duì)果膠酶活性的影響。為確保實(shí)驗(yàn)成功，請(qǐng)將表中的編號(hào)正確排序(用數(shù)字和箭頭表示)：2314。(4)如果要用此實(shí)驗(yàn)做“探究果膠酶的最適用量”，請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：配制不同濃度的果膠酶，恒溫下加入等量蘋(píng)果泥，觀察果汁的澄清度，果汁最澄清組對(duì)應(yīng)的酶用量即為酶的最適用量。1(2016魯迅中學(xué)期末測(cè)試)下列關(guān)于“探究果膠酶最適用量的實(shí)驗(yàn)”的敘述，錯(cuò)誤的是()A配制不同濃度的果膠酶溶液，并在各組中加入等量的該溶液B實(shí)驗(yàn)溫度為無(wú)關(guān)變量，要在相同的適宜溫度條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)C用玻璃棒攪拌加酶的果泥，攪拌時(shí)間可以不相同D調(diào)節(jié)pH，使各組中的pH相同而且處于適宜狀態(tài)答案C解析在探究果膠酶最適用量的實(shí)驗(yàn)中，果膠酶量為自變量，通過(guò)配制不同濃度的果膠酶溶液來(lái)控制；實(shí)驗(yàn)溫度、攪拌時(shí)間、pH為無(wú)關(guān)變量，需要控制等量、適宜，A、B、D項(xiàng)正確，C項(xiàng)錯(cuò)誤。2(2016溫州中學(xué)測(cè)試)探究溫度對(duì)果膠酶活性影響的實(shí)驗(yàn)中，得到如下實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)此分析其中不正確的是()溫度()3035404550556065707580果汁量(mL)3.54.68.610.912.311.710.15.43.94.85.6A.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)先將蘋(píng)果泥和果膠酶分別調(diào)節(jié)到對(duì)應(yīng)溫度后再混合B為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性，各組混合處理時(shí)間和過(guò)濾果汁時(shí)間均應(yīng)相同C應(yīng)在5055 設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，探究果膠酶的最適溫度D該實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明高溫能使果膠酶失活，但高溫也可能促進(jìn)果膠分解答案C解析實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)先將蘋(píng)果泥和果膠酶分別調(diào)節(jié)到對(duì)應(yīng)溫度后再混合，A項(xiàng)正確；為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和控制單一變量，各組混合處理時(shí)間和過(guò)濾果汁時(shí)間均應(yīng)相同，B項(xiàng)正確；實(shí)驗(yàn)中的溫度梯度跨度較大，要想確定最適溫度，需要設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析數(shù)據(jù)可知，應(yīng)在4555 設(shè)置更細(xì)溫度梯度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，探究果膠酶的最適溫度，C項(xiàng)錯(cuò)誤；高溫可以使酶失活，由表格數(shù)據(jù)可以看出，高溫也可能促進(jìn)果膠分解，D項(xiàng)正確。考點(diǎn)二淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的檢測(cè)1淀粉酶的固定化(1)固定化酶概念：將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。方法：吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。(2)淀粉酶的固定化淀粉酶作用的最適條件：最適pH為5.57.5；最適溫度為5075。方法：吸附法。淀粉的水解作用淀粉糊精麥芽糖葡萄糖遇碘顯藍(lán)色遇碘顯紅色遇碘不顯色2淀粉水解的測(cè)定實(shí)驗(yàn)固定淀粉酶滴管滴加淀粉溶液加KII2溶液觀察洗滌幾天后重復(fù)實(shí)驗(yàn)。3淀粉酶固定化實(shí)驗(yàn)過(guò)程固定化淀粉酶，裝入注射器中以0.3 mL/min的流速滴加淀粉溶液過(guò)柱流出5 mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液滴加KII2溶液，觀察顏色，用水稀釋1倍后再觀察顏色以10倍柱體積的蒸餾水洗滌固定化柱，放置在4 冰箱中，幾天后重復(fù)實(shí)驗(yàn)思考診斷1固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是什么？提示固定化酶能夠連續(xù)使用，但不是永久使用。酶是具有生物活性的大分子，因此隨著使用次數(shù)的增多，酶活性也會(huì)降低，如果酶活性降低到一定程度，就會(huì)失去使用價(jià)值。2科研人員利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑(使酶相互連接)，海藻酸鈉作為包埋劑來(lái)固定小麥酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對(duì)其最佳固定條件進(jìn)行了探究。如圖顯示的是部分研究結(jié)果(注：酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量)，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：(1)從對(duì)溫度變化的適應(yīng)性和應(yīng)用范圍的角度分析，圖甲所示結(jié)果可以得出的結(jié)論是固定化酶對(duì)溫度變化的適應(yīng)性更強(qiáng)且應(yīng)用范圍更廣。(2)圖乙曲線表明包埋效果最好時(shí)海藻酸鈉溶液濃度是多少？當(dāng)海藻酸鈉溶液濃度較低時(shí)，酶活力低的原因是什么？提示3%；海藻酸鈉溶液濃度較低時(shí)包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足。1下列關(guān)于固定化酶的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()A固定化酶的不足之處是不能催化一系列反應(yīng)B固定化酶可再次利用，降低了生產(chǎn)成本C固定后的酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與反應(yīng)物分離D固定化酶易溶于水答案D解析由于酶具有專(zhuān)一性，因此固定化酶不能催化一系列反應(yīng)，A項(xiàng)正確；固定化酶可反復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成本，B項(xiàng)正確；固定后的酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與反應(yīng)物分離，C項(xiàng)正確；固定化酶不易溶于水，易與反應(yīng)物分離，D項(xiàng)錯(cuò)誤。2(2015舟山中學(xué)測(cè)試)某校學(xué)生嘗試用瓊脂作載體，用包埋法固定淀粉酶來(lái)探究固定化酶的催化效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表(假設(shè)加入試管中的固定化淀粉酶量與普通淀粉酶量相同)。實(shí)驗(yàn)表明1號(hào)試管中淀粉未被水解，最可能的原因是()1號(hào)試管2號(hào)試管固定化淀粉酶普通淀粉酶淀粉溶液60 保溫5 min，取出冷卻至室溫，滴加碘碘化鉀溶液現(xiàn)象變藍(lán)不變藍(lán)A.實(shí)驗(yàn)中的溫度過(guò)高，導(dǎo)致固定化淀粉酶失去活性B淀粉是大分子物質(zhì)，難以通過(guò)瓊脂與淀粉酶接觸C水浴保溫時(shí)間過(guò)短，固定化淀粉酶未將淀粉水解D實(shí)驗(yàn)程序出現(xiàn)錯(cuò)誤，試管中應(yīng)先加入碘碘化鉀溶液后保溫答案B解析由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物質(zhì)，它不能通過(guò)瓊脂與酶充分接觸，導(dǎo)致淀粉不能被水解而遇碘碘化鉀溶液呈現(xiàn)藍(lán)色。歸納提升直接使用酶和固定化酶的比較比較項(xiàng)目直接使用酶固定化酶制作方法吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法、包埋法等是否需要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)否否酶的種類(lèi)一種或多種一種催化反應(yīng)單一或多種單一反應(yīng)底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)缺點(diǎn)對(duì)環(huán)境條件非常敏感，易失活；難回收，成本高，影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列反應(yīng)優(yōu)點(diǎn)催化效率高、耗能低、低污染既能與反應(yīng)底物接觸，又能與產(chǎn)物分離；可以重復(fù)使用做模擬練預(yù)測(cè)1下列有關(guān)果膠酶及果膠酶實(shí)驗(yàn)探究的敘述，正確的是()A探究果膠酶的用量時(shí)，pH、溫度不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果B果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和葡萄糖異構(gòu)酶等C探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響時(shí)，溫度、蘋(píng)果泥、果膠酶的用量及反應(yīng)時(shí)間等都是自變量D可以用相同時(shí)間內(nèi)過(guò)濾得到的果汁體積來(lái)確定果膠酶的用量答案D解析探究果膠酶的用量時(shí)，pH、溫度會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；葡萄糖異構(gòu)酶不屬于果膠酶；探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響實(shí)驗(yàn)中，溫度為單一變量，其他因素保持不變。2某同學(xué)為探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響，在不同溫度條件下，將等量的果膠酶加入到等量的蘋(píng)果泥中，在反應(yīng)同樣時(shí)間后，再將反應(yīng)液過(guò)濾同樣時(shí)間，用量筒測(cè)定濾出蘋(píng)果汁的體積。下列曲線圖能正確反映實(shí)驗(yàn)結(jié)果的是()答案B解析果膠酶在0 時(shí)活性較低，但也能催化蘋(píng)果泥形成果汁，果汁量不為0；隨著溫度升高，果膠酶的活性先升高后下降，果汁量也是先升高后降低。正確的應(yīng)是B曲線。3利用紫甘薯制酒可提高其附加值。請(qǐng)回答：(1)為提高紫甘薯的利用率，工廠化生產(chǎn)時(shí)，可加入果膠酶和淀粉酶，其中果膠酶可來(lái)自_等微生物。由于酶在水溶液中不穩(wěn)定，因此常將酶固定在某種介質(zhì)上制成_。(2)果膠酶可將紫甘薯勻漿中的果膠水解成_。A半乳糖醛酸和葡萄糖B半乳糖和果糖C半乳糖醛酸甲酯和果糖D半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯(3)紫甘薯勻漿流經(jīng)淀粉酶柱后，取適量流出的液體，經(jīng)脫色后加入KII2溶液，結(jié)果液體呈紅色，表明該液體中含有_。A淀粉 B糊精 C麥芽糖 D葡萄糖答案(1)黑曲霉(或蘋(píng)果青霉)固定化酶(2)D (3)B解析(1)、(2)果膠酶可將紫甘薯勻漿中的果膠水解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯，以提高紫甘薯的利用率；有些微生物，如黑曲霉、蘋(píng)果青霉都可用于生產(chǎn)果膠酶；由于酶在水溶液中不穩(wěn)定，所以常將酶固定在某種介質(zhì)上制成固定化酶。(3)紫甘薯勻漿流經(jīng)淀粉酶柱后，淀粉會(huì)被水解成糊精，糊精經(jīng)脫色后加入KII2溶液后呈紅色。4(2016浙江4月選考)請(qǐng)回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題：(1)果膠是細(xì)胞壁的重要組成成分，其化學(xué)本質(zhì)是_(A.蛋白質(zhì)B脂質(zhì)C核糖D多糖)，它在細(xì)胞壁形成過(guò)程中的主要作用是將相鄰的細(xì)胞_在一起。(2)制取果汁時(shí)，先用果膠酶將果膠分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，再用_酶處理，可得到比較澄清的果汁，用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的_高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行_處理，從而得到干制品。答案(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果膠甲酯活性(3)脫水(沉淀)解析(1)果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成的，其化學(xué)本質(zhì)屬于多糖。果膠起著將植物細(xì)胞粘合在一起的作用。(2)果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)。要使果汁更澄清，應(yīng)同時(shí)使用果膠酶和果膠甲酯酶。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的活性高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行沉淀處理，從而得到干制品。課時(shí)訓(xùn)練一、選擇題1(2015紹興中學(xué)期末測(cè)試)下列關(guān)于果膠酶作用的敘述，錯(cuò)誤的是()A分解水果細(xì)胞壁中的果膠，從而瓦解細(xì)胞壁B可將果膠分解成半乳糖醛酸，使果汁變清C分解水果細(xì)胞壁中的纖維素和果膠D可使果汁榨取變得容易，提高出汁率答案C解析果膠酶可將果膠分解為半乳糖醛酸，從而使果汁榨取的時(shí)候比較容易，并使果汁變清。要分解纖維素，需要纖維素酶。2在用果膠酶處理蘋(píng)果泥時(shí)，為了使果膠酶能夠充分地催化反應(yīng)，應(yīng)采取的措施是()A加大蘋(píng)果泥用量B加大果膠酶用量C進(jìn)一步提高溫度D用玻璃棒不時(shí)地?cái)嚢璺磻?yīng)混合物答案D解析在用果膠酶處理蘋(píng)果泥時(shí)，若讓果膠酶充分發(fā)生反應(yīng)，則需擴(kuò)大果膠酶和蘋(píng)果泥的接觸面積，盡量使果膠酶和蘋(píng)果泥充分接觸，因此可用玻璃棒不時(shí)地?cái)嚢璺磻?yīng)混合物。對(duì)蘋(píng)果泥用量、酶用量及反應(yīng)所需的溫度和pH的調(diào)整，在一定范圍內(nèi)只能加快反應(yīng)速度，而不能使果膠酶充分地催化反應(yīng)。3(2015寧波鄞州中學(xué)期末測(cè)試)下圖為某同學(xué)探究溫度對(duì)果膠酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)操作流程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是()底物酶液 在所控制溫度下處理一段時(shí)間底物與酶混合在所需溫度下保溫一段時(shí)間 檢測(cè)A底物為蘋(píng)果泥，酶液為果膠酶溶液B底物與酶混合前的同溫處理可以取消C實(shí)驗(yàn)的自變量為底物與酶混合后的溫度D檢測(cè)的是果汁的體積或果汁的澄清度答案B解析探究溫度對(duì)酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)步驟：取10支試管，5支放入等量的蘋(píng)果泥，另5支中放入等量果膠酶；將盛蘋(píng)果泥和果膠酶的試管分別放在5個(gè)溫度梯度下進(jìn)行保溫；一段時(shí)間后，再將酶加入對(duì)應(yīng)溫度下的蘋(píng)果泥中；觀察試管中渾濁程度的變化情況或果汁的澄清度。4下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是()A可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞B反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化酶的活性沒(méi)有影響C葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專(zhuān)一性不同D固定化細(xì)胞可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)答案A解析細(xì)胞體積相對(duì)較大，宜采用包埋法固定，A正確；若反應(yīng)產(chǎn)物包含酸或堿性物質(zhì)，可能會(huì)影響酶的活性，B錯(cuò)誤；葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專(zhuān)一性不變，C錯(cuò)誤；固定化細(xì)胞固定的是一系列酶，催化一系列反應(yīng)，不能催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)，D錯(cuò)誤。二、非選擇題5(2015浙江自選)某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑，開(kāi)展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)土壤懸液首先經(jīng)80 處理15分鐘，其目的是篩選出_。(2)在無(wú)菌條件下，將經(jīng)過(guò)處理的土壤懸液進(jìn)行_，然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到_，其周?chē)霈F(xiàn)透明水解圈，圈的直徑大小與_強(qiáng)弱相關(guān)。(3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是_。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比，不含有的成分是_。(4)溫度與植酸酶相對(duì)酶活性的關(guān)系如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是_。A測(cè)試溫度中，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60 和45 B測(cè)試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)低于非固定化植酸酶C固定化與非固定化植酸酶相比，相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬D65 時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)答案(1)耐高溫菌株(2)稀釋單菌落植酸酶的活性(3)供氧瓊脂(4)D解析(1)欲獲得“耐高溫”的植酸酶產(chǎn)酶菌株，需在“高溫”條件下篩選目的菌株。(2)欲對(duì)產(chǎn)生植酸酶的菌株進(jìn)行選擇培養(yǎng)，在無(wú)菌條件下，將經(jīng)過(guò)處理的土壤懸液進(jìn)行稀釋?zhuān)缓笥猛坎挤蛛x法將菌液涂布于含有植酸鈉的固體選擇培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)以植酸酶合成菌菌落為中心的透明圈，圈的直徑大小與植酸酶活性成正相關(guān)。(3)對(duì)篩選獲得的優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)，為滿足菌株需氧呼吸對(duì)O2的需求，宜進(jìn)行振蕩處理，與固體培養(yǎng)基相比，液體培養(yǎng)基中不需要添加瓊脂等凝固劑。(4)圖示曲線變動(dòng)趨勢(shì)表明，相對(duì)于非固定化植酸酶，固定化植酸酶的活性波動(dòng)明顯較低，且酶活性溫度范圍更加寬泛；非固定化酶的最適溫度為45 ，而固定化酶的最適溫度為60 ；圖中65 并非固定化植酸酶活性的最低點(diǎn)。由以上分析可知，AD中A、B、C均正確，D錯(cuò)誤。6(2016溫州中學(xué)檢測(cè))在果汁生產(chǎn)中需用到果膠酶，某課題研究小組為了探究果膠酶的某些特性，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：(1)實(shí)驗(yàn)方法：請(qǐng)將圖1中所示的操作進(jìn)行排序：_。(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行了相同時(shí)間的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖2中曲線甲所示：圖2中自變量是溫度，除此之外還可用 _表示。A酶的濃度 B蘋(píng)果泥的量C水的加入量 DpH圖2中的縱坐標(biāo)還可用_來(lái)表示。實(shí)驗(yàn)步驟中，在果膠酶和蘋(píng)果泥混合前，將二者分裝在不同試管中并進(jìn)行恒溫的目的是_。實(shí)驗(yàn)小組改變了實(shí)驗(yàn)條件后重復(fù)做實(shí)驗(yàn)，得到曲線乙，蘋(píng)果汁的澄清度最高點(diǎn)對(duì)應(yīng)的橫坐標(biāo)是同一位置的原因是_。引起曲線乙下移的原因是_(至少答出兩條)。答案(1)a、c、d、b(2)D蘋(píng)果汁的體積保證底物和酶在混合時(shí)的溫度是相同的同一種酶的最適溫度是一定的，不會(huì)因酶的濃度、底物量的不同而改變pH、酶的濃度和蘋(píng)果泥的量等因素不同解析(1)實(shí)驗(yàn)順序：準(zhǔn)備蘋(píng)果泥和配制果膠酶蘋(píng)果泥和果膠酶分別水浴保溫蘋(píng)果泥和果膠酶混合保溫過(guò)濾果汁后用量筒計(jì)量。(2)果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響，而與底物的量、酶的濃度和水的加入量沒(méi)有關(guān)系；每一種酶都有一個(gè)最適溫度和最適pH，且該值恒定。衡量實(shí)驗(yàn)結(jié)果的指標(biāo)有兩個(gè)：一個(gè)是蘋(píng)果汁的體積，另一個(gè)是蘋(píng)果汁的澄清度。為了保證實(shí)驗(yàn)在相應(yīng)溫度下進(jìn)行，必須使酶和底物分別保溫達(dá)到要求后再混合。在相同溫度條件下，pH、酶的濃度和底物的濃度也會(huì)改變反應(yīng)速率。7葡萄收獲的季節(jié)性較強(qiáng)，并且不易運(yùn)輸，易造成積壓，腐爛變質(zhì)。為了解決上述問(wèn)題且滿足不同人群的需求，可以將其加工制作成果汁、果酒、果醋等。如圖1是簡(jiǎn)單的生產(chǎn)流程圖，結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題：圖1圖2(1)果膠酶的使用過(guò)程中，需要對(duì)酶的活性、酶的用量進(jìn)行研究。在圖2甲、乙兩個(gè)曲線中，果膠酶活性受環(huán)境因素影響的變化曲線是_，縱軸還可以用_來(lái)表示，自變量X可以代表_等；自變量Y可代表_。(2)果膠酶的最適用量是圖2中的_點(diǎn)對(duì)應(yīng)的量。(3)過(guò)程中不用滅菌一般也不會(huì)受到雜菌的污染，原因是_。答案(1)甲過(guò)濾到的果汁的體積 溫度、pH等果膠酶的濃度(或用量)(2)B(3)培養(yǎng)液中缺氧環(huán)境及酵母菌產(chǎn)生的酒精能抑制絕大多數(shù)微生物的生長(zhǎng)繁殖解析(1)果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響，每一種酶的最適pH和最適溫度是一定的，衡量實(shí)驗(yàn)結(jié)果的指標(biāo)有兩個(gè)，一個(gè)是果汁的體積，另一個(gè)是果汁的澄清度。(2)果膠酶的最適用量是過(guò)濾得到果汁澄清度最高時(shí)對(duì)應(yīng)的最小酶量，B點(diǎn)后酶量增加而澄清度不再增加，因此B點(diǎn)對(duì)應(yīng)的量為最適用量。(3)缺氧條件不利于大多數(shù)細(xì)菌的生存，同時(shí)酒精有殺菌作用。8請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)在工業(yè)生產(chǎn)中，為提高酶的使用率和產(chǎn)品純度，一般需要將酶進(jìn)行固定化處理。利用石英砂固定淀粉酶的方法屬于_。A吸附法 B共價(jià)偶聯(lián)法C交聯(lián)法 D包埋法(2)一定濃度的淀粉溶液流過(guò)淀粉酶固定化柱后，被水解成_，遇KII2溶液顯_色。(3)淀粉酶可以通過(guò)枯草桿菌發(fā)酵生產(chǎn)，以下是利用誘變育種方法培育獲得產(chǎn)生較多淀粉酶的菌株的主要實(shí)驗(yàn)步驟。(原理：菌株生長(zhǎng)過(guò)程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周?chē)纬赏该魅Α?第一步：將枯草桿菌接種到_培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。第二步：將枯草桿菌分成兩組，A組用_處理，B組不處理(作對(duì)照)。第三步：制備多個(gè)含淀粉的固體培養(yǎng)基。第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用_法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。第五步：觀察A、B組各菌落周?chē)腳。實(shí)驗(yàn)結(jié)果預(yù)期：根據(jù)誘發(fā)突變率低的特點(diǎn)，預(yù)期_。根據(jù)誘發(fā)突變不定向性的特點(diǎn)，預(yù)期_。答案(1)A(2)糊精紅(3)液體誘變劑涂布透明圈大小A組中多數(shù)菌落周?chē)耐该魅εcB組差異不顯著A組有少數(shù)菌落周?chē)耐该魅Ρ菳組明顯小，有少數(shù)比B組明顯大(或A組透明圈大小不一，B組較一致)解析石英砂固定淀粉酶的方法為吸附法；淀粉流經(jīng)淀粉酶固定化柱后，被水解為糊精，遇KII2溶液呈紅色；獲得誘變菌株需進(jìn)行誘變劑處理，通過(guò)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組培養(yǎng)基中菌落周?chē)该魅Φ拇笮】纱_認(rèn)淀粉分解的程度。9如圖是固定化酶反應(yīng)柱，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)將淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，不時(shí)攪拌，這樣淀粉酶就可以固定在石英砂上。這種固定化的方法稱(chēng)為_(kāi)。30 min后，裝入如圖所示的反應(yīng)器中，構(gòu)成固定化酶反應(yīng)柱，并用10倍體積的蒸餾水洗滌此反應(yīng)柱，洗滌的目的是_。洗滌時(shí)，蒸餾水流速_(填“能”或“不能”)過(guò)快。(2)實(shí)驗(yàn)時(shí)，將此反應(yīng)柱固定在支架上，用滴管滴加可溶性淀粉溶液，并以0.3 mL/min的流速過(guò)柱，控制流速的目的是_。在流出5 mL后接收0.5 mL流出液，加入12滴_，觀察顏色。為了使觀察到的顏色變化明顯，可_后再觀察。如果溶液呈紅色，說(shuō)明淀粉水解成為_(kāi)。(3)實(shí)驗(yàn)后，用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此反應(yīng)柱，洗滌的目的是_。洗滌后，放置在4 冰箱中保存。幾天后，可重復(fù)使用。(4)一段時(shí)間后，某同學(xué)從冰箱中取出此反應(yīng)柱，重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，卻沒(méi)有了相同的結(jié)果，試分析可能的原因。_。答案(1)吸附法除去未吸附的游離淀粉酶不能(2)使淀粉溶液與溶粉酶充分接觸充分反應(yīng)KII2溶液稀釋糊精(3)洗去殘留的反應(yīng)物和產(chǎn)物(4)從酶的活性、酶的數(shù)量、反應(yīng)條件等方面分析，合理答案均可。解析(1)固定化酶的制作方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法，本題所示為吸附法。洗滌是除去未吸附的一些游離的酶，在洗滌時(shí)流速不能過(guò)快，為1 mL/min。(2)以相對(duì)較慢的流速使淀粉溶液流過(guò)反應(yīng)柱，可以讓吸附著的酶與底物充分反應(yīng)。根據(jù)KII2溶液與淀粉反應(yīng)呈藍(lán)色，與糊精反應(yīng)呈紅色的原理來(lái)鑒定反應(yīng)情況。(3)實(shí)驗(yàn)完成后還需要對(duì)反應(yīng)柱進(jìn)行洗滌，以除去參與反應(yīng)的反應(yīng)物及生成的產(chǎn)物，以便重復(fù)使用。(4)一段時(shí)間后重復(fù)使用得不到相同的結(jié)果，排除反應(yīng)物本身，肯定是酶出了問(wèn)題，可能這些酶已經(jīng)失活，再次操作時(shí)相應(yīng)的反應(yīng)條件(如溫度)不適合等。10(2015寧波鄞州中學(xué)測(cè)試)果膠酶能分解果膠等物質(zhì)，澄清果蔬飲料，在食品加工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。某興趣小組的同學(xué)對(duì)三種不同品牌的果膠酶制劑(制劑中果膠酶濃度相同)進(jìn)行了探究，其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。分組蒸餾水(mL)緩沖液(mL)果汁(mL)果膠酶制劑(mL)果汁渾濁程度甲乙丙1225200222502032250024X25000Y注：“”越多表示果汁越渾濁。(1)表中X所代表的數(shù)值應(yīng)為_(kāi)，Y的果汁渾濁程度應(yīng)表示為_(kāi)(用若干個(gè)“”表示)。(2)除了觀察果汁渾濁程度外，還可以通過(guò)檢測(cè)_的變化量來(lái)判斷不同品牌果膠酶制劑的效果。若使用該方法，相關(guān)物質(zhì)變化量最大的是_組。(3)微生物是生產(chǎn)果膠酶的優(yōu)良生物資源。分離和篩選能產(chǎn)生果膠酶的微生物，使用的培養(yǎng)基應(yīng)以_為唯一碳源；如需進(jìn)一步純化果膠酶，可根據(jù)果膠酶分子的_(至少寫(xiě)出兩點(diǎn))等特性進(jìn)行分離提純。由于果膠酶的活性容易受到外界環(huán)境因素的干擾，所以應(yīng)利用_技術(shù)減少影響從而保護(hù)酶的活性。答案(1)4(或多于)(2)反應(yīng)物(或“果膠”“半乳糖醛酸”“生成物”“產(chǎn)物”)1(3)果膠形狀和大小(或“所帶電荷性質(zhì)和多少”“溶解度”“吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力”等)固定化酶解析(1)對(duì)照實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循單一變量原則，要嚴(yán)格控制無(wú)關(guān)變量適宜且相同。由題中實(shí)驗(yàn)分組處理可知，第4組實(shí)驗(yàn)中沒(méi)有添加果膠酶制劑，為保證各組實(shí)驗(yàn)溶液體積相同，X應(yīng)為4；果膠酶能分解果膠等物質(zhì)以澄清果蔬飲料，故沒(méi)有添加果膠酶制劑的第4組的果汁渾濁程度應(yīng)當(dāng)最高。(2)果膠酶可水解果膠，可通過(guò)反應(yīng)中反應(yīng)物的減少量或生成物的生成量來(lái)表示果膠酶的作用效果。(3)果膠可作為微生物培養(yǎng)的碳源，并且果膠的水解需要果膠酶，故在分離和篩選能產(chǎn)生果膠酶的微生物時(shí)，要使用果膠作為唯一碳源的培養(yǎng)基。分離提純物質(zhì)一般根據(jù)其物質(zhì)的相關(guān)特性設(shè)置分離提純方法，如：“形狀和大小”“所帶電荷性質(zhì)和多少”“溶解度”“吸附性質(zhì)和對(duì)其他分子的親和力”等。固定化酶技術(shù)能有效地減少外界環(huán)境對(duì)酶的影響。