貝諾酯原料藥的質(zhì)量檢驗(yàn),一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.熟悉貝諾酯的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)。 2.掌握貝諾酯的鑒別、檢查與含量測定的方法、原理及結(jié)果處理方法。,二.實(shí)驗(yàn)原理,本品的化學(xué)名為4-乙酰胺本基水楊酸脂，是對乙酰氨基酚與阿司匹林的酯化產(chǎn)物。本品為白色結(jié)晶或晶性粉末，無臭無味。在沸乙醇中易溶，在沸甲醇中溶解，在甲醇中微溶，在水中不溶。貝諾酯有潛在芳伯胺基，可發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)，具有紫外和紅外特征吸收光譜。按干燥品計(jì)，C17H15NO5不得少于98.5%。 (C17H15NO5，F(xiàn)w=313.31),三.鑒別,1.化學(xué)鑒別 取本品約0.2g，加氫氧化鈉試液5ml，煮沸，放冷，濾過，濾液加鹽酸適量至顯微酸性，加三氯化鐵試液2滴。即顯紫堇色。 2.光譜鑒別 紫外：取含量測定項(xiàng)下的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄 A）測定，在240nm的波長處有最大吸收；在240nm的波長處測定吸光度，按干燥品計(jì)算，吸收系數(shù)（E 1%1cm）為730760。 紅外:本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。,四. 檢查,氯化物 供試品溶液： 取本品2.0g，加水100ml，加熱煮沸，放冷，加水至100ml，搖勻，過濾，取續(xù)濾液25ml，再加稀硝酸10ml，置50ml比色管中，加水使成約40ml，搖勻，即得供試品溶液。 對照品溶液：另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（每1ml相當(dāng)于10g 的Cl）20ml，置50ml比色管中，再加稀硝酸10ml，加水使成約40ml，搖勻，即得對照品溶液。 原理：Cl-Ag+ AgCl 結(jié)果判斷：搖勻后，在暗處放置5分鐘，同置于黑色背景上，從上向下觀察，依法檢查（附錄 A），與對照品溶液比較，不得更濃（0.01）,硫酸鹽 供試品溶液：取氯化物項(xiàng)下剩余的濾液25ml，加水使成約40ml，置50ml比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得供試溶液。 對照品溶液：另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1ml，置50ml納比色管中，加水使成約40ml，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得對照溶液。 于供試溶液與對照溶液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml，用水稀釋使成50ml，搖勻。 結(jié)果判斷：搖勻后，在暗處放置10分鐘，同置于黑色背景上，從上向下觀察， 依法檢查（附錄 B）。與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1ml制成的對照液比較，不得更濃（0.02）。,對氨基酚 操作：取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml，搖勻，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1ml，搖勻，放置30分鐘，不得顯藍(lán)綠色 結(jié)果判斷：搖勻后，放置30分鐘，不得顯藍(lán)綠色，則符合規(guī)定，反之，不符合規(guī)定。,游離水楊酸 取本品0.1g，加乙醇5ml溶解后，加水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻，3s內(nèi)如顯色，與對照液（精密量取水楊酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml，搖勻，精密量取1ml，加乙醇5ml、水44ml與上述新制的新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻）比較，不得更深（0.1%）。 供試品溶液：取本品0.1g，加乙醇5ml溶解后，加水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml。 對照品溶液：取水楊酸溶液1ml+乙醇5ml+水44ml+新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml。 結(jié)果判斷：搖勻后，放置一段時(shí)間，同置于黑色背景上，從上向下觀察，比較產(chǎn)生的渾濁。供試品溶液所顯渾濁淺于對照品溶液的渾濁，則符合規(guī)定，反之，則不符合規(guī)定。,干燥失重 操作：取本品1.0g，平鋪在已于105干燥至恒重的扁形稱量瓶中，加蓋，精密稱定。放于烘箱中，將瓶蓋取下，置稱量瓶旁，于105干燥恒重。減失重量不得過9.5%。 計(jì)算：(W1-W2)/W1*100% 注：W1為干燥前供試品；W2為干燥后供試品。 結(jié)果判斷：干燥失重的數(shù)值小于或等于限度，則為符合規(guī)定，反之，不符合規(guī)定。,有關(guān)物質(zhì) 取本品2.0g，精密稱取，置于50ml量瓶中，加入三氯甲烷-甲醇（9:1）適量，溶解后，再加至刻度，搖勻，即得供試品溶液。另精密稱取本品0.02g、0.004g，對乙酰氨基酚0.004g，分別置于3個(gè)50ml量瓶中，加入三氯甲烷-甲醇，溶解，定容，即得對照品溶液、。照薄層色譜法（附錄VB）試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，用二氯甲烷-乙醚-冰醋酸（80:15:4）為展開劑，展開后，取出晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液顯示雜質(zhì)斑點(diǎn)不得多于4 個(gè)，與對照溶液(3) 相同位置上所顯的斑點(diǎn)比較，不得更深；如顯其他比主斑點(diǎn)位置稍高的雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對照溶液(1) 所顯的主斑點(diǎn)與對照溶液(2) 所顯的主斑點(diǎn)比較，均不得更深。 結(jié)果判斷 （1）供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)不得多于4個(gè)，與對照溶液 相同位置上所顯的斑點(diǎn)比較，不得更深； （2）如顯其他雜質(zhì)斑點(diǎn)，高于主斑點(diǎn)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對照溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，其他雜質(zhì)斑點(diǎn)與對照溶液所顯的主斑點(diǎn)比較，均不得更深。,五.含量測定,操作：取本品約3.75mg，精密稱定，置于500ml量瓶中，加入無水乙醇適量，溶解后，再加至刻度，搖勻，即得供試品溶液。另精密稱取貝諾酯對照品對乙酰氨基酚3.75mg，置于500ml量瓶中，加入無水乙醇適量溶解后，再加至刻度，搖勻，即得對照品溶液。置1cm吸收池中，在240nm的波長處分別測定吸收度。計(jì)算，即得。 計(jì)算： 注：Ax為供試品溶液的吸光度；Cr為對照品溶液的濃度；Ar為對照品溶液的吸光度；D為稀釋倍數(shù)；ms為供試品取樣量（g）。 結(jié)果判斷：計(jì)算出的含量98.5%，則符合規(guī)定；反之，則不符合規(guī)定。,六.思考題,1.如何選擇貝諾酯的檢測波長？,