2.生物技術(shù)實(shí)踐(B)1.(2018·杭州學(xué)軍中學(xué)模擬)回答下列有關(guān)果膠、果汁和果膠酶等相關(guān)的問(wèn)題：(1)果膠是植物細(xì)胞壁的主要成分，起著將植物細(xì)胞_在一起的作用。制作果汁時(shí)可加入果膠酶和_以分解果膠，提高果汁出汁率和澄清度。(2)果膠酶可從黑曲霉中提取，下列適于黑曲霉擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)基是_(A.蛋白胨和酵母提取物培養(yǎng)基B.尿素固體培養(yǎng)基C.MS 培養(yǎng)基D.添加蔗糖的豆芽汁培養(yǎng)基)。由于果膠酶溶于水，不利于重復(fù)使用，可通過(guò)物理或化學(xué)方法將果膠酶固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有_的制劑。(3)用果汁制作果酒，以果汁為原料，加入一定比例的蔗糖的目的是_。最后倒入酵母懸液，混勻，加蓋；發(fā)酵開(kāi)始時(shí)，由于微生物的需氧呼吸會(huì)使發(fā)酵瓶?jī)?nèi)出現(xiàn)_，原因是_。答案(1)粘合果膠甲酯酶(2)D酶活性(3)提高果酒的酒精和糖的含量負(fù)壓需氧呼吸消耗氧氣，產(chǎn)生的二氧化碳比氧氣易溶于水2.(2018·寧波鎮(zhèn)海中學(xué)期中)請(qǐng)回答與“大腸桿菌的培養(yǎng)與分離”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題：(1)大腸桿菌是革蘭氏 _、兼性厭氧的腸道桿菌，一般對(duì)人無(wú)害。實(shí)驗(yàn)室利用_培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌，培養(yǎng)后使用灼燒、冷卻后的_進(jìn)行劃線分離，這種_的分離是用于篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。(2)若要將大腸桿菌臨時(shí)保存，一般接種在_上，37 培養(yǎng) 24 h 后，置于_(A.20 B.4 C.4 D.37 )環(huán)境條件下保存。答案(1)陰性LB 液體接種環(huán)單菌落(2)斜面C解析(1)大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌；在實(shí)驗(yàn)室中擴(kuò)大培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)常用 LB 液體培養(yǎng)基；接種時(shí)需對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌；采用劃線分離法篩選出高表達(dá)量單菌落。(2)若要將大腸桿菌臨時(shí)保存，一般接種在斜面培養(yǎng)基上，37 培養(yǎng)24 h 后，并置于 4 環(huán)境條件下保存。3.在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中先將 10 升湖水水樣濃縮至 10 毫升，然后各取濃縮水樣 1 毫升，涂布到多個(gè)培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)可以通過(guò)提高培養(yǎng)基中 _的濃度，篩選被調(diào)查細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為 _培養(yǎng)基。(2) 要提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應(yīng)該設(shè)置的對(duì)照組是_。為檢驗(yàn)(1)中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對(duì)照組是_。(3)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室對(duì)培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。為防止冷凝水影響細(xì)菌的生長(zhǎng)需將培養(yǎng)皿_培養(yǎng)。1(4)根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)，可以計(jì)算湖水中該種細(xì)菌的密度，但計(jì)算的數(shù)據(jù)要比實(shí)際活菌的數(shù)目少，原因是_。答案(1)鹽(或 NaCl)選擇(2)未接種(或接種等量無(wú)菌水 )的培養(yǎng)皿未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)(3)高壓蒸汽滅菌倒置(4)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，在平板上觀察到的是一個(gè)菌落4.(原創(chuàng))釀酒、造醋是我國(guó)的傳統(tǒng)技藝，為了探究與改進(jìn)制造工藝，進(jìn)行了相關(guān)研究。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：(1)目的菌株篩選后應(yīng)該利用_培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，_是消除污染雜菌的通用方法。(2)制作葡萄酒過(guò)程中，為了使酵母菌迅速發(fā)生作用，可加少量_混勻。將葡萄漿放入發(fā)酵瓶，裝量不超過(guò)_(A.1/2B.2/3C.3/4D.100%)，當(dāng)發(fā)酵瓶_表示發(fā)酵完畢。(3)醋的制作中發(fā)酵瓶中裝鋸末至_，將適量的醋化醋桿菌培養(yǎng)物加在酒水混合物中混勻，并調(diào) pH 至_后，倒入發(fā)酵瓶。答案(1)液體單菌落的分離(2)蔗糖B停止出現(xiàn)氣泡(3)八分滿7.05.下圖為葡萄酒生產(chǎn)工藝流程簡(jiǎn)圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問(wèn)題：(1)流程中“方框”處的內(nèi)容依次為_(kāi)、_。(2)果酒釀造過(guò)程中如果果汁滅菌不合格，含有醋化醋桿菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋化醋桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸？說(shuō)明理由：_。(3)果酒制作離不開(kāi)酵母菌，與醋化醋桿菌比，酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要特點(diǎn)是_(A.有細(xì)胞壁B.有細(xì)胞膜C.有核糖體D.有成形的細(xì)胞核)。(4)若要提高果酒的產(chǎn)量，發(fā)酵過(guò)程中關(guān)鍵要控制好哪些條件？_(至少填寫 2 項(xiàng))。答案(1)沖洗滅菌(2)不能。因醋化醋桿菌是好氧型細(xì)菌，而果酒發(fā)酵時(shí)是無(wú)氧環(huán)境(3)D(4)適宜的溫度、pH、通氣量6.尿素是一種高濃度氮肥，長(zhǎng)期施用沒(méi)有不良影響，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌分解為氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4·7H2O0.2 g蛋白胨1.0 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂糖15.0 g(1)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)_(填“能”或“不能”)分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，原因是_。(2)要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中活菌數(shù)目，宜采用_法接種。2(3)接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行 _處理。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在_條件下進(jìn)行。(4) 某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_，應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_。答案(1)不能培養(yǎng)基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源(2)涂布分離(3)滅菌無(wú)菌(4)菌液濃度過(guò)高對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋(加大稀釋倍數(shù))7.請(qǐng)回答下列與微生物培養(yǎng)、發(fā)酵過(guò)程相關(guān)的問(wèn)題：(1)在“分離以尿素為氮源的微生物”的實(shí)驗(yàn)中，配制好的尿素固體培養(yǎng)基加上封口膜后用_方法滅菌，冷卻后加入用 G6 玻璃砂漏斗過(guò)濾的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用_浸泡，并抽濾去酸，再用_沖洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)中，可以用 _(A.50%乙醇B.70%乙醇C.90%乙醇D.95%乙醇)鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或_中提取，配制這些微生物的培養(yǎng)基時(shí)需要將 pH 調(diào)至_。(3)在“用果汁制作果酒”實(shí)驗(yàn)中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的_。答案(1)高壓蒸汽滅菌1 mol/L 的 HCl蒸餾水(2)D蘋果青霉中性偏酸(3)蔗糖8.生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)培養(yǎng)大腸桿菌所用的 LB 培養(yǎng)基一般用_法滅菌。檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常用_將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋。(2)將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀_到 LB 固體培養(yǎng)基，_于恒溫培養(yǎng)箱，在_ 條件下進(jìn)行培養(yǎng)。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí) _(填“需要”或“不需要”)設(shè)置對(duì)照組。(3)下圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述正確的是_。A.步驟倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過(guò)來(lái)放置B.步驟接種環(huán)在火焰上灼燒后迅速蘸取菌液劃線C.步驟多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落D.步驟恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來(lái)對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)答案(1)高壓蒸汽滅菌無(wú)菌水(2)涂布倒置37需要(3)C9.請(qǐng)回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)有關(guān)的問(wèn)題：(1)果膠是細(xì)胞壁的重要組成成分，其化學(xué)本質(zhì)是_(填寫如下選項(xiàng))，它在細(xì)胞壁形成過(guò)程中的主要作用是將相鄰的細(xì)胞_在一起。3A.蛋白質(zhì)C.核酸B.脂質(zhì)D.多糖(2)制取果汁時(shí)，先用果膠酶將果膠分解成 _和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)，再用_酶處理，可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的_高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行_處理，從而得到干制品。答案(1)D粘合(2)半乳糖醛酸果膠甲酯活性(3)脫水(沉淀)解析(1)果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成的，其化學(xué)本質(zhì)屬于多糖。果膠起著將植物細(xì)胞粘合在一起的作用。(2)果膠酶能將果膠分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯等物質(zhì)。要使果汁更澄清，應(yīng)同時(shí)使用果膠酶和果膠甲酯酶。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時(shí)，果汁的出汁率、澄清度與酶的活性高低成正相關(guān)。(3)由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對(duì)果膠粗提取物(經(jīng)酶處理后的混合物)進(jìn)行沉淀處理，從而得到干制品。1104