41 西 壯 族 自 治 區(qū) 地 方 標(biāo) 準(zhǔn) 5/T 2017 病死豬無(wú)害化處理堆肥技術(shù)操作規(guī)程 of by 征求意見稿） 2017 - 布 施 廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局 發(fā)布 2017 I 目 次 前言 . 范圍 . 1 2 術(shù)語(yǔ)和定義 . 1 3 病死豬無(wú)害化堆肥技術(shù)前期準(zhǔn)備 . 1 4 堆肥工藝 . 1 5 堆肥時(shí)間控制 . 2 6 無(wú)害化判定 . 2 7 注意事項(xiàng) . 2 附錄 A . 3 附錄 B（規(guī)范性附錄） 菌株及培養(yǎng)基要求 . 4 附錄 C . 5 2017 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)按照 2009給出的規(guī)則起草。 本標(biāo)準(zhǔn)由廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局提出。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)良圻原種豬場(chǎng)、賀州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、南寧市武鳴區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、河池市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、桂林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：熊 毅、伍少欽、顏健華、馮淑萍、李軍、郭建剛、胡巧云、何奇松、胡麗萍、 張浩、于俊勇、王孝德、凌丹、韋建華、韋達(dá)有、楊威、彭昊、陳澤祥 。 2017 1 病死豬無(wú)害化處理堆肥技術(shù)操作規(guī)程 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了病死豬無(wú)害化處理的堆肥前期準(zhǔn)備、堆肥過程中影響因素控制、無(wú)害化判定。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于病死豬無(wú)害化堆肥處理。 2 術(shù)語(yǔ)和定義 下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。 病死豬 指飼養(yǎng)在養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）內(nèi)因病原微生物或不明原因引起發(fā)病而導(dǎo)致的 淘汰豬或 死亡豬。 無(wú)害化處理 指將養(yǎng)殖廢棄物（病 死豬等 ）內(nèi)生物性有害物質(zhì)殺滅或降解成無(wú)害物質(zhì)、消除其危害的一種技術(shù)。 3 病死豬無(wú)害化堆肥技術(shù)前期準(zhǔn)備 肥地點(diǎn)選擇 肥地點(diǎn) 要求地形平坦，地勢(shì)稍高，利于排水， 距離居民區(qū)、生活飲用水源地、公路及鐵路等主要交通干線 1000m 以上，距離養(yǎng)殖區(qū) 500應(yīng)位于居民區(qū)和公共建筑群常年主導(dǎo)風(fēng)向的下風(fēng)向。 肥房要求 肥房選址 堆肥房 選址 應(yīng)符合動(dòng)物防疫條件要求，應(yīng)建在相對(duì)獨(dú)立的隔離地方，凈、污通道分離，進(jìn) 、 出口分開并安裝有消毒裝置，場(chǎng)面硬化、平滑易于清潔消毒。 肥房要求 堆肥間建于防雨棚內(nèi)，棚屋檐高應(yīng)不少于 風(fēng)良好。堆肥間應(yīng)不少于 4間，每間長(zhǎng)、寬、高分別為 U”型布局，即三面圍墻，一面開口，場(chǎng)面和墻面用水泥砂漿硬化。 肥原料準(zhǔn)備 堆肥主料為甘蔗渣或木屑，輔料可選擇畜禽糞便、氮肥、豆渣、微生物菌劑等。 4 堆肥工藝 2017 地面上鋪一層甘蔗渣或木屑做主料，厚約 20 料上放置病死豬，對(duì)死亡的基礎(chǔ)公母豬和育肥大豬，應(yīng)預(yù)先進(jìn)行碎尸處理后再堆放（離墻壁 20 大豬尸體、尸塊每個(gè)間隔 15 豬尸體、尸塊上鋪一層 2025度為 60%的甘蔗渣或木屑，甘蔗渣或木屑中可添加一定量的輔料。以此類推，層層堆放，可堆放到 ，最后一層甘蔗渣或木屑厚度為 3040自然通氣狀態(tài)下進(jìn)行發(fā)酵。 專用溫度計(jì)測(cè)定堆體 4080120溫度，必須保證堆體內(nèi)物料的溫度要達(dá)到 55以上、并持續(xù) 10d 以上。 5 堆肥時(shí)間控制 期堆肥 經(jīng)過 60d 90d，堆肥溫度下降 45以下，首次熱循環(huán)結(jié)束。此時(shí)病死豬尸體基本被化制，但降解還不夠完全。 期堆肥 溫度下降后將一期堆肥所有的殘余物轉(zhuǎn)移到另一個(gè)空的堆肥房，確保所有的殘余物都被覆蓋。二期堆制過程需要 60d 90d，經(jīng)過 60d 90d，溫度再次下降至 45以下，結(jié)束 堆肥 。 6 無(wú)害化判定 以大腸桿菌 109徑 50 密封于含培養(yǎng)基的 2別置于堆肥的上、中、下層，堆肥期到期的前一周取出進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，符合總大腸菌數(shù)量小于 1000 無(wú)害化合格的化尸堆可以用于農(nóng)作物施肥，也可以與新的甘蔗渣或木屑混合作為下一次堆肥處理中的碳基礎(chǔ)層。 7 注意事項(xiàng) 肥過程中注意水分控制。堆肥的起始含水率一般為 50% 65%，含水量不足，影響發(fā)酵速度，補(bǔ)入適量水分。過于潮濕，即用手?jǐn)D壓時(shí)有水分流出，則添加更多甘蔗渣或木屑。 重 大動(dòng)物疫病及人畜共患病死亡的病死豬尸體不得使用此種方式進(jìn)行處理。 酵過程中，應(yīng)做好防雨措施。 2017 3 附 錄 A （資料性附錄） 實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備配置 要儀器設(shè)備 恒溫?fù)u床； 電熱恒溫培養(yǎng)箱。 驗(yàn)工具 水份 測(cè)定儀； 專用溫度計(jì)； 移液器； 三角取樣器； 平板； 接種環(huán)； 酒精燈； 10µL、 200µ； 天平； 50 2017 附 錄 B （規(guī)范性附錄） 菌株及培養(yǎng)基要求 腸桿菌 0157:株轉(zhuǎn)基因抗萘啶酮酸 的大腸桿菌 0157:7)菌株，均為實(shí)驗(yàn)室保存菌株，由廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提供。 品及培養(yǎng)基 萘啶酮酸； 大腸桿菌 即磷酸鹽緩沖液； 溫 80的 即胰蛋白胨培養(yǎng)基； 即麥康凱瓊脂培養(yǎng)基； 即補(bǔ)充了 頭孢克肟 ,亞碲酸鉀， 50萘啶酮酸的山梨醇麥康凱培養(yǎng)基； ，即補(bǔ)充了 20新生霉素， 膽汁鹽 ,磷酸二甲鹽的 以上培養(yǎng)基按照生產(chǎn)廠家說(shuō)明書進(jìn)行配制，并按上述要求加入特殊物質(zhì)。 2017 5 附 錄 C （規(guī)范性附錄） 大腸桿菌 7的接種和總大腸菌的檢測(cè) 腸桿菌的接種 將三株抗萘啶酮酸的 7(7)菌株接種于 100 g/于 37培養(yǎng) 6h，隨后將三份培養(yǎng)液等體積混合 ,以備接種豬肉樣品，所用豬肉樣品經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定沒有抗萘啶 酮酸的 7菌株存在，接種濃度約達(dá) 109 品的采集 用三角形取樣器采集樣品進(jìn)行總大腸菌檢測(cè)。堆肥樣品在采集后即冰上保存 ,并于 6 7 的檢測(cè) 采用平板計(jì)數(shù)法 ,將樣品用 沖液 10 倍梯度稀釋 ,并涂在 板培養(yǎng)基上 ,37過夜培養(yǎng)后計(jì)數(shù) ,每個(gè)樣品兩個(gè)重復(fù)。每個(gè)平板上最多 3 個(gè)單克隆菌株。當(dāng)平板計(jì)數(shù)檢測(cè)不到 7時(shí) ,2 個(gè)重復(fù)的 1g 樣品被加入到 9 養(yǎng)基中 ,于 37富集 6h,并將富集液用 大 腸桿菌 疫磁珠分離檢測(cè)試劑盒 檢測(cè) ,最終確定 7 菌株是否存在。 大腸桿菌的檢測(cè) 將 28溫 80的 做 10倍梯度稀釋，隨后涂于麥康凱平板培養(yǎng)基上 ,于 37過夜培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。 _