.ASE 200 加速溶劑萃取機操作手冊戴安中國有限公司技術服務中心2002，7第一章 簡介ASE200加速溶劑萃取機是一臺可從各種固體或半固體樣品中萃取有機組分的自動系統(tǒng)。ASE200通過提高溶劑溫度的方法加速傳統(tǒng)的萃取處理。在萃取池中加壓以使萃取過程中萃取池中填充的溶劑始終處于液體狀態(tài)。加熱后，提取物從樣品池中沖到標準的收集瓶中以備分析使用。圖1. ASE200 加速溶劑萃取機1.1ASE200選配件ASE200選配件有ASE200溶劑控制器AutoASE軟件。當ASE200與溶劑控制器聯(lián)機使用時，ASE200具有如下功能： 在萃取切換溶劑；同一樣品使用不同的溶劑或不同的樣品使用不同的溶劑； 最多可四種不同溶劑； 一、二、三或四種溶劑混合使用；ASE200溶劑控制器可以通過ASE200前面板或AutoASE軟件控制，詳見ASE200溶劑控制安裝說明書（Document No. 031277）。計算機通過AutoASE軟件可對多達八臺ASE200和ASE200溶劑控制器，可從面板設置的參數(shù)均可通過AutoASE軟件設置。ASE200和AutoASE軟件之間的通訊需要DX-LAN接口卡和DX-LAN電纜。AutoASE軟件用戶手冊（Document No. 031259）詳細地介紹了軟件的安裝和操作。欲定購上述可選件，請與Dionex辦事處聯(lián)系。1.2 關于本手冊第一章簡介 介紹ASE200說明書的習慣用法及一些安全提示；第二章描述 描述了ASE200的外形和萃取過程；第三章操作與保養(yǎng) 討論了操作的步驟，并提供幾個實際樣品的萃取方法和任務順序表的建立方法，以及儀器的日常養(yǎng)護；第四章故障排除指南 列出一些主要的常見故障，以及分步進行分析判斷故障來源和處理辦法；第五章維修 分步介紹一些常規(guī)維修和常見零件的更換步驟；附錄 A 技術指標 列出ASE200的技術指標和安裝所需的設備。附錄 B 安裝 描述任何安裝ASE200附錄 C 自檢屏幕 介紹ASE200 的自檢屏幕的具體內(nèi)容；附錄 D 記錄信息 零部件清單；附錄 E TTL 和Relay 控制 描述了TTL和Relay伸入和輸出型號的功能。1.2.1 字體l 大寫字母開頭的黑體英文字表示前面板上的鍵；如：按Start鍵，開始運行方法。l 全部大寫的黑體英文字表示屏幕上的菜單；如：顯示METHOD EDITOR屏幕1.2.2 安全提示信息為了確保操作者的安全，請操作者不要超出說明書的規(guī)定操作！如用戶的操作在說明書中沒有詳細的說明，請與Dionex公司聯(lián)系。本手冊含有一些警示和預防信息；它將盡量避免操作者和儀器受到損壞或傷害。黑體字的安全警示配有明顯的圖標。表示現(xiàn)有一個緊急的情況存在，如不能立即終止，將會致命的傷害；表示可能將來會產(chǎn)生冒險的操作，如不能終止，可能會引起致命的傷害；表示可能將來會產(chǎn)生冒險的操作，如不能終止，可能會引起較弱的或中等的傷害；表示此功能或處理可能會對儀器的功能有削弱，并不過程傷害；本手冊中還用黑體字顯示一些注釋，如：1.2.3 符號 交流電 接地點 電源開 電源關第二章 描述2.1 節(jié)描述ASE200各部件的工作特征；2.2 節(jié)描述了萃取的工作過程；2.3 節(jié)描述了ASE200的兩種工作模式；2.4 節(jié)描述了ASE200的方法控制和計劃表控制的工作方式；2.1 工作特征圖2.1描述的是ASE200的主要工作特征。圖2.1 ASE200的主要工作特征Power Switch（電源開關）電源開關位于儀器前面板門的左下方，前面板門關閉時電源開關方可使用，當前面板門處于打開狀態(tài)時，主電源開關位于前面板門后，按下主電源開關即可控制儀器的通電與否。Control Panel（控制面板）控制面板位于前面板門上，面板上包括液晶顯示和薄膜鍵盤（見圖2.2），前面板門與ASE200的電路相連。Solvent Reservoir Compartment（溶劑瓶倉）溶劑瓶、廢液瓶和壓力表放置在儀器下半部的溶劑倉內(nèi)。Cell Tray and Extraction Cells（萃取池和萃取池托盤）萃取池托盤位于ASE200右半部上方，放置樣品萃取池。欲出區(qū)的樣品放置在萃取池內(nèi)。Vial Tray and Collection Vials（收集瓶和收集瓶托盤）收集瓶托盤位于ASE200右半部下方，放置收集瓶。萃取完成后，這些收集瓶保存從樣品中采取出的提取物和溶劑。Oven Area（爐體）爐體藏在ASE200的后部。將萃取池拉入或送出爐體，并保證萃取池在萃取過程中密封的自動密封臂也藏在這里。Needle Mechanism（收集針裝置）收集針裝置位于收集瓶托盤的左側。收集針刺破收集瓶隔膜，將萃取池中的提取物流到收集瓶中。2.1.1 控制面板顯示液晶顯示屏顯示儀器工作的狀態(tài)。面板上反色的區(qū)域（藍字白底）的內(nèi)容可編輯，正色的區(qū)域為只讀信息。圖 2.2 ASE200控制面板調(diào)節(jié)以下內(nèi)容可改善屏幕顯示： 調(diào)節(jié)鍵盤下部凸旋鈕改變屏幕的對比度； 設置MODULE SETUP屏幕中的SCRN BACKLIGHT值調(diào)節(jié)顯示屏背景的亮度。 控制面板可傾斜四個角度。穩(wěn)定用力地拉動控制面板下方的突出部位，即可調(diào)節(jié)面板的傾斜角度。當接通電源后，儀器的版權和微處理器的代碼顯示幾秒鐘后，屏幕菜單MENU OF SCREENS出現(xiàn)，從此菜單可選擇進入操作屏幕或自檢菜單屏幕。有兩種方法對菜單屏幕進行選擇： 擇按下希望進入的菜單所相應的數(shù)字鍵； 將光標移至希望進入的菜單行，按Enter鍵。2.1.2 控制面板鍵盤除非ASE200是在計算機控制下，通過按下面板上各鍵可直接控制儀器的操作。各鍵的功能示于表2-1。鍵功 能Trays鍵用于萃取池與收集瓶托盤的對位鎖定和解鎖的切換。按鍵左部指示燈亮時，表示托盤處于解鎖狀態(tài)，托盤可自由轉動，此時可方便裝取萃取池和收集瓶。按鍵右部指示燈亮時，萃取池與收集瓶托盤自動對位并鎖定，此時無法手動移動托盤。當一次萃取在進行中，Trays暫時失效。開始一次沖洗程序。通常在啟動ASE200和更換新的萃取溶劑時使用。托盤將旋轉至清洗液收集瓶和最近的清洗管的位置。大約4 mL的溶劑被泵沖進清洗液收集瓶。此鍵只有在系統(tǒng)IDLE（空閑等待）狀態(tài)下方可使用。開始運行當前裝載的方法（Method）或任務順序表（Schedule）。當系統(tǒng)空閑時，左側指示燈亮；當運行裝載進行中時，右側指示燈亮；此鍵在計算機控制方式下失效。中斷當前的運行。泵停止運行，閥關閉，所有的流速停止。屏幕顯示一個可選擇的清單，詳細見3.4.3節(jié)。在計劃表編輯器SCHEDULE EDITOR中，同時按下Alt鍵和Select刪除計劃表當前行，下行自動上移；同時按下Alt 和Select插入新行。當儀器被計算機控制時，此鍵失效。刪除選定區(qū)域中設定的數(shù)值。 當儀器被計算機控制時，此鍵失效。按下此鍵，被選定的區(qū)域內(nèi)預定的內(nèi)容循環(huán)跳轉。確認所選定的值后，按Enter鍵或將光標移出該編輯區(qū)即可確認選擇。在需要輸入數(shù)字類型的區(qū)域內(nèi)按Select和Select鍵一次，該區(qū)域的數(shù)值向上或向下跳動一個單位。按住Select和Select鍵可連續(xù)滾動。方向鍵用來移動光標，左右方向鍵可自動換行，上下鍵不能自動換行。顯示一個相關的幫助屏幕。顯示可供選擇的屏幕的清單。數(shù)字鍵用來往選定的區(qū)域內(nèi)鍵入數(shù)值，也可通過數(shù)字來選擇某一屏幕。保存選定區(qū)域內(nèi)的修改。當菜單屏幕顯示時，按下光標選定的屏幕。用光標移動至相應的位置并按Enter鍵；表2.12.1.3 樣品池，沖洗管和樣品池托盤樣品池托盤可放置24個樣品池和4個沖洗管11mL,5mL,11mL, 22mL和33mL樣品池均可放置在此托盤上。只需手即可將可更換的帽擰緊到池體的兩端，每個池帽內(nèi)部均配有不銹鋼的濾芯和PEEK材料的密封圈，在整個運行期間，池子兩端被加壓以保證池體和池帽之間緊密密封。每個池帽外部均有一個O型圈。一種為標準型（Teflon O-ring P/N049457），另一種為高溫型（Viton O-ring P/N056325）。樣品池可任意位置放置，運行期間傳感器可自動識別各個位置的池體積。沖洗管是放置在托盤四個沖洗位置的金屬下管，如圖2.3所示。在沖洗時，托盤自動旋轉至最近的沖洗管位置，以保證剛從爐子退出的加熱的池子停留在安全防護蓋下（見圖2-1）。溶劑在沖洗過程中直接流過沖洗管。圖232.1.4 收集瓶，沖洗瓶和瓶托盤收集瓶托盤可放置26個收集瓶和4個沖洗瓶。收集瓶為標準的揮發(fā)性有機分析用玻璃瓶。下表中列出了戴安公司使用的收集瓶的型號和產(chǎn)品號：收集瓶 產(chǎn)品號40 mL, 透明玻璃收集瓶（72個/包裝） 04878340 mL, 棕色玻璃收集瓶（72個/包裝） 04878040 mL, 透明玻璃帶刻度收集瓶（6個/包裝） 05544260 mL, 透明玻璃收集瓶（72個/包裝） 04878460 mL, 棕色玻璃收集瓶（72個/包裝） 048783其中40mL透明玻璃帶刻度收集瓶可與Organomation Associates, Inc. 生產(chǎn)的N-EVAP工作臺或Zymarl TurboVap工作臺配合使用。該瓶副符合A級標準（誤差<5%）。收集瓶蓋中加有抗有機溶劑的隔片，在運行期間針頭機構刺穿該隔片， 使樣品瓶與收集瓶之間形成液體通路。標有R1、R2、R3和R4的四個沖洗瓶的位置可放置40 mL或60 mL的收集瓶。在一次沖洗過程中，托盤旋轉至沖洗位置，開始沖洗之前，如收集瓶傳感器檢測到?jīng)_洗瓶的位置空缺或沖洗瓶已滿，托盤自動轉向下一個沖洗瓶的位置，然后將溶劑泵入系統(tǒng)并收集在沖洗瓶中。對于標準的40 mL收集瓶需要在托盤中防入抬高填充物（P/N 049348）；對于40 mL帶刻度收集瓶需要放置瓶套圈（P/N 055444）。對于60 mL的收集瓶不需要任何填充物。2.1.5 溶劑瓶單元此單元位于下部前門內(nèi)（見圖2-1），內(nèi)中放有溶劑瓶，廢液瓶和壓力表。ASE200 Ship Kit中包括一個2L的敷有防碎塑料的玻璃瓶（P/N 045901）和瓶蓋總成（P/N 049496）以及連接所需的管線接頭等。使用一個40 mL或60 mL的收集瓶作廢液瓶，該廢液瓶放置在溶劑瓶單元內(nèi)右側的支架上。廢液瓶頂端有兩條廢液管，一條來自加壓釋放閥，另一條來自針頭機械裝置。該廢液瓶用來收集溶劑放氣時兩條管道帶出的很少量的溶劑。一個排氣出口管也連接在廢液瓶的上方，氣體可通過此管排出后面板的小孔。ASE200 Ship Kit中附有排氣管，可將廢氣排出室外。廢液瓶需每日檢查，需要時將其排空。2.1.6 電子學部分ASE200的電子學部分位于前門后方（見圖2-1）。向后拉動電源開關右側的拉手即可打開前門。CPU板上一排八個兩針的插座用來使ASE200與其它外部樣品準備裝置通信使用，其中兩個TTL輸出，兩個Relay輸出和四個TTL輸入。3.1.8節(jié)將詳細介紹此功能。2.2 萃取過程在開始萃取之前，需完成以下步驟：（參照第三章介紹的內(nèi)容）l 將準備好的樣品裝入樣品萃取池；l 將萃取池放置在池托盤上；l 放置收集瓶于瓶托盤上l 建立一個方法l 裝載這個方法以下步驟當按下START鍵后，ASE將自動完成萃取過程。該過程包含八個步驟。l 裝載池子進入爐體；l 填充溶劑；l 加熱萃取池l 靜態(tài)萃取l 用新溶劑沖洗l 用惰性氣體將系統(tǒng)中溶劑吹掃出來l 結束釋放壓力l 推出萃取池圖2-4展示ASE200中溶劑和氣體流路中主要部件。圖2-4 溶劑和氣體流路中主要部件在萃取過程中， CURRENT STATUS屏幕顯示正在運行的儀器狀態(tài)，以及操作參數(shù)。圖2-5是CURRENT STATUS屏幕的一個實例。圖2-5參 數(shù)描 述SYSTEM STATUS當前步驟（Load, Fill, Heat, Static, Flush, Purge, Unload.）CONTROL當前控制類型（Method 或 Schedule）STEP TIME前部為程序中設定的時間，后部為已執(zhí)行的時間；TEMPERATURE前部為程序中設定的爐子溫度，后部為實際的溫度；PRESSURE前部為程序中設定的壓力，后部為實際的壓力；STATIC PUMP閥的狀態(tài)（C=關閉，O=打開）PURGE RELIEFSCHEDULE當前的計劃表METHOD當前的方法CELL當前的池子CELL SIZE池體積尺寸（1mL.5mL 11mL,22mL,33mL）*VIAL當前瓶VOLUME(mL)泵輸送的溶劑的大致體積；* 當使用1mL,5mL萃取池時CELL SIZE顯示11，因為1mL,5mL萃取池的長度與11mL相同。如果在一個指定的時間內(nèi)沒有任何鍵按下，將有一個替換屏幕取代CURRENT STATUS屏幕（見圖2-6）。按下任意鍵即返回CURRENT STATUS屏幕。改變延遲的顯示替換屏幕的時間的方法見附錄B.3。圖2-6以下的內(nèi)容詳細地描述萃取步驟：第一步：裝載萃取池l 萃取池和收集瓶托盤旋轉至方法或計劃表中指定的初始位置針頭機構刺入收集瓶l 自動密封臂抬起萃取池并移進加熱爐內(nèi)l 加熱爐施加壓力密封萃取池圖圖第二步：填充萃取池l 泵將溶劑泵入萃取池l 當萃取池填滿且收集瓶內(nèi)充有大約mL溶劑，靜態(tài)萃取閥關閉，溶劑流動停止。 圖圖注意：如果萃取池在100秒鐘內(nèi)未填充滿，ASE200將停止運行并自動轉向下一個萃取池和收集瓶；如果第二個萃取池在一定的時間內(nèi)仍未充滿，ASE200將再轉向下一個萃取池和收集瓶；當?shù)谌齻€萃取池在規(guī)定的時間內(nèi)還未充滿，所有運行停止，系統(tǒng)顯示出錯信息。此情況通常由于溶劑流路堵塞引起（詳細見第四章）。第三步和第四步：加熱和靜態(tài)萃取l 萃取池被加熱一個固定的時間，以保證萃取池中的樣品達到溫度平衡。l 進入靜態(tài)萃取周期，本周期的時間選擇在方法編輯中修改，通常選擇5分鐘。l 在加熱和靜態(tài)萃取過程中，靜態(tài)閥定期打開以維持所設定的萃取池壓力。圖211圖212注意：當萃取池壓力超過設定值 1.4Mpa (200psi)，靜態(tài)萃取閥打開，釋放壓力。所有防出的溶劑均直接進入收集瓶。第五步 沖洗l 靜態(tài)閥打開，萃取液流到收集瓶l 泵入池體積50%100%的新溶劑沖洗萃取池內(nèi)部。圖2-13圖2-14第六步 吹掃l 用惰性氣體將剩余的溶劑吹出。l 收集瓶中收集了所有溶劑和樣品中萃取出的成分。圖2-15圖2-16第七步 結束和釋放l 將萃取池中剩余的壓力釋放掉。圖217圖2-18第八步 退出萃取池l 將系統(tǒng)壓力卸掉l 萃取池從加熱爐中退出，放置在托盤上。l 針頭機構從收集瓶上拔起l 托盤旋轉到下一個位置，下一次運行開始l 當所有樣品運行結束，ASE200停止。圖2-19圖2-20警告：請勿用手觸摸剛剛結束萃取的萃取池。該池需要15分鐘冷卻。在萃取過程中電磁閥控制泵溶劑流動的開關。另外，流動閥控制系統(tǒng)溶劑的流動。l 靜態(tài)萃取閥控制流到收集瓶的溶劑流動。在泵工作和靜態(tài)萃取閥關閉的情況下，壓力增加。l 吹掃閥控制池中氣體的壓力；l 壓力釋放閥釋放萃取完成后殘留在池中的氣體；l 加壓閥控制溶劑瓶中的壓力；圖2-21描述了萃取過程中各閥門在各步驟時的狀態(tài)。圖2-212.3 工作方式ASE200有兩種工作方式，手動和自動。工作方式可通過MODULE SETUP屏幕中設定。（詳見B.3節(jié)）2.3.1 手動方式當ASE200電源接通后，系統(tǒng)默認進入手動方式。在手動方式下，直接從棉板鍵盤輸入命令控制儀器工作。2.3.2 自動方式在自動方式下，ASE200經(jīng)由DX-LAN接口接受來自AutoASE軟件的命令。當自動方式被選中后，REMOTE字樣顯示在CURRENT STATUS屏幕的右上角。在自動方式下，將有下列情況發(fā)生：l 面板上除Trays、Rinse和Abort三個鍵之外，其余鍵均失效。l LOAD METHOD OR SCHEDULE 屏幕不允許進入。雖然其它屏幕可以顯示，但屏幕中只有一個區(qū)域可進行編輯，在MODULE SETUP屏幕上可觸發(fā)切換工作方式。ASE200的AutoASE軟件一經(jīng)啟動即自動傳送一個操作命令，將ASE200切換至REMOTE方式，無論是否已經(jīng)選擇使用該軟件，而且該軟件不能將ASE200切換回LOCAL方式。只能從MODULE SETUP屏幕切換回LOCAL方式。2.4 方法和計劃表控制本節(jié)討論了如何使用面板或AutoASE軟件建立和編輯方法和計劃表。在運行萃取操作之前，你必須建立一個方法，該方法中包含儀器運行的條件參數(shù)，其中包括：l 池加熱時間l 爐溫l 池子壓力l 沖洗萃取池的溶劑量l 溶劑的種類和百分比l 吹掃時間ASE200可存儲24個方法。3.2.1節(jié)介紹了如何通過前面板建立方法。對于多個樣品萃取，可定義一個運行計劃表。計劃表中須指定每個樣品使用的方法，收集瓶的位置，每個樣品運行后的沖洗狀態(tài)等。ASE200可存儲24個計劃表。3.2.3節(jié)討論如何通過ASE200前面板建立計劃表。ASE200提供兩種控制方式：l 方法控制托盤上所有的樣品使用相同方法萃??；l 計劃表控制按計劃表中指定的方法運行樣品；第三章操作和保養(yǎng)3.1 準備運行3.1.1 溶劑的選擇和準備在設計一個萃取方法時，選擇溶劑或溶劑的混合，可從樣品基體中有效地提取出所感興趣的組分。如你已有其它的萃取方法（如索氏萃取等），所用的溶劑可繼續(xù)在ASE200上使用。警告：不可使用自燃點在40200范圍內(nèi)的溶劑。下表中列出幾種不能在ASE200中使用的溶劑。如您有任何關于溶劑適用性方面的問題，請與戴安公司聯(lián)系。不能使用的溶劑自燃點二硫化碳）CS2100（二）乙醚（C2H5）2O1801,4二氧雜環(huán)己烷 C4H8O2180以下為選擇和準備溶劑的原則：l 使用HPLC或農(nóng)藥級溶劑l 使用有機和含水的溶劑l 使用單或多成分溶劑l 弱酸或堿（如乙酸或氫氧化鉀等）或其它非腐蝕性填加劑，但其含量不能超過溶劑的5%。注意：當使用了酸或堿做萃取后，在放置過夜之前，必須用100%有機溶劑或蒸餾水沖洗系統(tǒng)。l 溶劑通常不需要脫氣，但對于萃取易氧化的組分時，溶劑需要預先脫氣。l 如萃取池外部O-型圈采用合成橡膠材料，不可使用丙酮作萃取溶劑。3.1.2 裝填溶劑注意：如使用ASE200溶劑控制器，忽略本節(jié)內(nèi)容，此部分內(nèi)容見溶劑控制器手冊。1將準備好的溶劑裝填在溶劑瓶內(nèi)，并將溶劑瓶放置在溶劑單元內(nèi)。（見圖2-1）警告：溶劑瓶內(nèi)壓力不得超過10psi。2將出口管線從溶劑瓶蓋中間穿過，進入溶劑瓶（見圖3-1）。確認管端過濾頭已放抵瓶底。如需要可拉此管，以保證管端的長度。3確認溶劑液面低于加壓氣路的管口，以防止溶劑倒流至壓力調(diào)節(jié)閥。4手擰溶劑瓶帽直至緊固。5當重新裝填溶劑時，只需取下溶劑瓶帽，取出溶劑瓶。不必拆除所有管線。圖3-13.1.3 準備樣品有些樣品在裝載進萃取池之前，需要與干燥或分散劑混合。如你已有成熟的、特殊的萃取樣品處理方法，仍可繼續(xù)使用。但如準備萃取一個從未做過的樣品，可按如下步驟進行處理。干燥劑和分散劑的選擇指南l 推薦使用兩種常見干燥劑和分散劑：無水硫酸鈉和顆粒狀硅藻土。硅藻土可非常迅速地干燥樣品，操作非常容易，是一種較好的萃取混合填充物。雖然無水硫酸鈉也是較常使用的，但它容易結塊，傳輸較為困難。l 使用無水硫酸鈉與含水分30%以上的樣品混合使用時，特別是混合溶劑中使用丙酮，由于硫酸鈉結晶容易引起萃取池過濾砂芯堵塞。對于這種情況，建議使用硅藻土作干燥劑與樣品混合。硅藻土代替無水硫酸鈉作干燥劑可適用于任何濕度的樣品。l 對于非常濕的樣品，無論使用那種干燥劑，在樣品采集完成后,你必須向樣品瓶中加入硫酸鈉，然后將待萃取物通過一干燥柱或干燥倉，使其徹底干燥。ASE200萃取時采用加溫處理將使得較多的水分共萃取。為保證較好的分析回收率，須徹底地從樣品瓶中沖洗硫酸鈉和清洗干燥柱。l 使用極性溶劑，如甲醇，不能使用硫酸鈉作為干燥劑。硫酸鈉可溶解極性溶劑。樣品準備指南以下的步驟僅作為建議，適當?shù)恼{(diào)整是需要的。l 較干燥的樣品：4克樣品加1克硅藻土4克樣品加4克硫酸鈉l 較濕的樣品4克樣品加2克硅藻土4克樣品加8克硫酸鈉l 純液體樣品5克樣品加3克硅藻土將樣品與硅藻土或硫酸鈉防在一個小瓶、燒杯或研缽中充分混合，攪拌。3.1.4萃取池的選擇和填充池體積共分5種：1mL，5mL，11mL，22mL，33mL。池體積的大小并不影響萃取的時間，但可決定溶劑的使用量。較大的池子需要使用較多的溶劑；部分填充的池子比充滿池子所需更多的溶劑。一般情況下選擇池體積時：l 萃取較小的體積的樣品即可獲得較好的萃取結果時選擇較小的萃取池；l 由于干燥劑和分散劑會占據(jù)一定的體積，在選擇萃取池體積時應給予考慮；l 當做樣品準備時，應確保樣品與干燥劑和分散劑充分混合。萃取池濾紙?zhí)畛湓谔畛錁悠分?，須先放置一片濾紙，以防止堵塞萃取池底部的不銹鋼過濾砂芯。纖維素濾紙可適用于所有萃取池。另外玻璃纖維濾紙可適用于11mL，22mL，33mL萃取池。玻璃纖維濾紙常用來做含水樣品的萃取過濾，而纖維素濾紙在含水樣品萃取時常引進一些干擾。安裝濾紙需要一個特殊的工具，對于11mL，22mL，33mL萃取池，該工具包括在ASE200隨箱備件中。其它工具需要另外定購。對于纖維素濾紙和玻璃纖維濾紙所使用的工具相同。池體積安裝工具1 mLP/N 0553965mLP/N 05539711,22,33 mLP/N 049495安裝濾紙在安裝濾紙之前，先將萃取池底部的帽用手擰緊，再使用填充濾紙的工具安裝濾紙。切不可將濾紙直接防在底部的帽中，再安裝池帽，否則會引起泄漏。注意：萃取池上印有Dionex的標識和系列號，它將有助于用戶識別池體的方向。例如常把靠近Dionex的標識和系列號的一邊作為池子的頂部，以次作為安裝濾紙和放置萃取池到托盤上的依據(jù)。當然，你也可以用記號筆在池體上畫出記號以保證池體的方向。1 從池體頂端擰下池帽；2 在池內(nèi)放置一片纖維素濾紙或玻璃纖維濾紙，稍微傾斜一個角度，如圖所示；3 將安裝工具放在濾紙上；4 緩慢均勻地向池體內(nèi)推動濾紙。5 確認濾紙已完整的與池壁接觸。填充萃取池1. 將樣品填充進萃取池時須十分小心，保持萃取池池體上的螺紋和池帽的清潔。這將防止池體螺紋的沾污，影響池子的使用壽命。2 需要，可使用填充物將池內(nèi)的空體積，如Ottawa沙（ Fisher S23-3）。這將減少萃取中使用的溶劑量。3. 用手擰緊池體頂部的池帽，不必使用扳手或其它工具。重要：用手擰緊池帽即可。使用扳手或其它工具會損傷池體。4. 檢查萃取池兩端的池帽上白色O型圈外型完好（見圖3-2）。如該O型圈變色或小孔的尺寸小于0.5毫米，則需要更換此O型圈。用一個小的平頭螺絲刀將壞的O型圈取下；將新的O型圈放在池帽的小孔處，使用專用工具（P/N049660）將O型圈壓入小孔內(nèi)。重要：不要在池體外粘貼標簽。萃取池在萃取過程中，與爐內(nèi)腔配合緊密,任何標簽都可能引起配合不好導致麻煩。另外由于爐內(nèi)溫度較高，萃取 過程中標簽可能會被燒毀。為了識別樣品，可用池體外的系列號或直接用記號筆在池體外做記號。 圖3-2裝載萃取池托盤1按順序將裝填好樣品的萃取池放置在托盤上。垂直懸掛萃取池時應保證裝有過濾膜片的一端向下。萃取池的先后順序沒有任何要求。在默認的控制方式下（方法控制），ASE200從第一號萃取池開始萃取，收集在第一號收集瓶內(nèi)，然后逐個執(zhí)行，直到找到萃取池或收集瓶托盤上出現(xiàn)空的位置，ASE200自動停止。建立一個運行的計劃表，萃取操作可更具靈活性。詳見3.2節(jié)。注意：當托盤旋轉時，注意碰傷。2檢查每個沖洗管的兩端，確保O型圈完好，否則須更換。3將沖洗管放置在沖洗位置，124，67，1213和1819之間。3.1.5收集瓶的選擇和放置收集瓶的選擇以萃取池的體積確定。小于11mL的萃取池采用40mL收集瓶；大于22mL的萃取池采用60mL收集瓶。收集瓶的標簽在萃取過程中，傳感器將檢測收集瓶是否存在，是否裝有1mL溶劑或是否已滿。所以收集瓶的標簽必須粘貼在不能遮擋傳感器的位置上。圖3-3中顯示可貼標簽或書寫記號標記的位置。圖33取下收集瓶托盤只有當ASE200在“idle”狀態(tài)時才可取下收集瓶托盤。（在“idle”狀態(tài)時，“Start”鍵左側的發(fā)光二極管亮）抓住托盤中間的提梁向上提起，使托盤與底座分離，將托盤取出。重新安裝收集瓶托盤將托盤放置在托盤底座的上方，注意一定要居中。用手任意方向旋轉托盤直至聽到“咔”的一聲，表明托盤已鎖定在正確的位置。放置收集瓶放置收集瓶時注意以下內(nèi)容：l 使用普通40mL收集瓶時須在托盤槽內(nèi)放置抬高塊（P/N 049348）以補償40mL收集瓶較短的問題；當使用帶刻度的40mL收集瓶時須在托盤槽內(nèi)放置填充塊，以填補該收集瓶較細的空間。l 當使用方法控制時，放置收集瓶應與萃取池的位置相對應。例如，萃取池放置在110的位置，收集瓶的位置也應放置在相應的110的位置上。l 當使用計劃表控制時，收集瓶的放置應與計劃表中編輯的位置相符。l 收集瓶的尺寸應與萃取池相匹配。1.在收集瓶托盤的R1R4的位置上放置四個收集清洗廢液的60mL收集瓶。注意：每次萃取前應注意觀察清洗廢液收集瓶是否仍有足夠的空間。2.確認所有放置在托盤內(nèi)的收集瓶都保持在相同的高度。3.檢查收集瓶的尺寸與萃取池相匹配。注意：如收集瓶的尺寸與萃取池不匹配，系統(tǒng)運行將自動退出。3.1.6 清洗和啟動系統(tǒng)按下面板上的Rinse清洗鍵，系統(tǒng)完成一次清洗或啟動注液操作。在操作過程中，萃取池托盤旋轉至最近的清洗管位置，收集瓶托盤旋轉至清洗位置，系統(tǒng)將泵出大約4mL溶劑，清洗系統(tǒng)。通常在下列情況中需要進行清洗和啟動注液操作：l 系統(tǒng)初始化后；注意：系統(tǒng)配置溶劑控制器時，當按下Start鍵后，或在計劃表中有溶劑變化時，系統(tǒng)會自動泵出8mL溶劑清洗系統(tǒng)。l 在溶劑管道中含有氣泡或停機時間超過24小時；l 更換或重新填充溶劑時；l 更換溶劑時，應至少清洗兩次如希望在兩次萃取間插入清洗步驟，見3.1.7節(jié)。3.1.7 萃取間自動清洗萃取運行中可以加入自動清洗操作。自動清洗操作只泵出1mL溶劑，其余與手動清洗操作完全相同。l 在方法控制時，可在每個樣品萃取完成后，自動執(zhí)行清洗程序。l 在計劃表控制時，必須在計劃表中的每一行指定該樣品萃取時，何時執(zhí)行清洗程序。在方法中設定自動清洗步驟1.確定清洗管和清洗廢液收集瓶已正確放置在各自的位置。收集瓶最好使用60mL收集瓶以提供足夠的收集容量。2.按MENU鍵，顯示MENU OF SCREEN菜單屏幕，按下5鍵顯示MODULE SETUP屏幕；3.移動光標至METHOD RINSE位置，按下Select鍵至顯示ON（見圖3-4），按下Enter或將光標移至其它位置，方法將加入自動清洗程序，使用此方法萃取樣品時，每完成一次萃取，自動執(zhí)行一次清洗。Method Rinse默認設定為OFF。圖343.1.8外部控制設備的使用略。3.2 方法和計劃表注意：本節(jié)討論了如何通過面板建立用戶自己的方法和計劃表。如何使用系統(tǒng)中已有的默認方法。如何使用自動型ASE軟件建立方法和計劃表等。當運行多個樣品時，用戶可對每個樣品采用相同的方法萃取（Method Control），也可采用任務順序表對每個樣品使用不同的方法萃取(Schedule Control)。在任務順序表中可指定每個樣品所使用的方法，指定收集瓶的位置，萃取完成后的沖洗狀態(tài)等。每臺ASE200可存儲24個任務順序表。名 稱描 述Method方法為一次萃取定義一系列操作參數(shù)；（爐溫，時間，壓力，溶劑沖洗體積，吹掃時間，以及當使用溶劑控制器時溶劑的種類和比例等）Schedule計劃表為多個樣品的萃取定義操作參數(shù)；（萃取池的順序，各萃取樣品所使用的方法，系統(tǒng)沖洗的狀態(tài)等）Method Control方法控制每個樣品都采用相同的方法時使用方法控制；在方法控制時，萃取從萃取池托盤1#位置，收集從1#瓶位置開始，順序執(zhí)行，直至所有樣品萃取結束為止。Schedule Control計劃表控制依照計劃表中的定義完成所有樣品的萃取。表3.13.2.1 建立方法表3.2描述了方法中主要參數(shù)；參考3.2.2和3.3節(jié)建立和編輯方法。1.按下Menu顯示MENU OF SCREEN，按3顯示METHOD EDITOR。如果是第一次打開電源，屏幕顯示默認的方法參數(shù)（見圖3-10）。以后將顯示上一次方法編輯時的參數(shù)。圖3-102.將光標移至EDIT#區(qū)域內(nèi)，輸入0，顯示默認參數(shù)。3. 建立一個新方法時，將光標移至各高亮區(qū)，輸入所需數(shù)據(jù)，并按Enter或將光標移至其它區(qū)域。參 數(shù)功 能取 值 范 圍PREHEAT加入溶劑之前，萃取池放置在加熱爐中預加熱的時間；預加熱期間吹掃閥在預加熱期間的狀態(tài)099 min默認=0C=關閉O打開默認CHeat加熱加熱萃取池中的樣品達到溫度平衡。加熱時間的長短取決于用戶設定的溫度的高低。當應用不需要加熱時，設置溫度為“0”設置溫度 加熱時間0（0ff） 040-100 5101-125 6126-150 7151-175 8176-200 959 分鐘Static靜態(tài)萃取溶劑靜態(tài)萃取時間0- 99分鐘默認=5Flush%沖洗靜態(tài)萃取結束后，有機溶劑沖洗萃取池的體積。通常以萃取池的體積的百分比計。0- 150%；5%增量Purge吹掃氮氣吹掃萃取池的時間0- 300秒；默認60秒Cycles循環(huán)加熱，靜態(tài)萃取和沖洗步驟的循環(huán)次數(shù)1-5；默認1次Temperature溫度萃取池加熱的溫度，該溫度也決定了加熱時間的長短0， 402000OFF；默認100Pressure壓力萃取池萃取過程中內(nèi)部溶劑的壓力500-3000 psi;默認1500psiSOL ASOL BSOL CSOL D所用溶劑的種類和濃度；（僅適用于配有溶劑控制器的儀器）此區(qū)域內(nèi)容僅用于報告，區(qū)域內(nèi)可設置為空白。5-100%；5%增量表3-2方法編輯參數(shù)4完成參數(shù)設置后，將光標移至SAVE區(qū)域，輸入一個未使用的方法號，或按下Select 鍵，顯示下一個未被使用的方法號，按Enter確認。注意：欲恢復默認的方法參數(shù)，將光標移至EDIT#區(qū)域，按Delete。當某個方法號已被使用，按下Select 鍵時，該方法號會被自動跳過。輸入溶劑的種類和百分比METHOD EDITOR屏幕中列出一些萃取中常用的有機溶劑，從該表中可選擇溶劑的種類和百分比；如所用溶劑沒有包括在此表中，可選擇OTHER。注意：請不要使用自燃點為40-200的有機溶劑作為萃取劑。當ASE200溶劑控制器處于工作狀態(tài)，選擇的內(nèi)容決定了溶劑的種類和輸送的量。如系統(tǒng)沒有配置溶劑控制器，上述信息出現(xiàn)在報告中，但對萃取沒有任何效果?？蛇x擇的溶劑種類1將光標移至SOL A區(qū)域內(nèi)，按Select 或 Select鍵滾動選擇溶劑，以下的溶劑可供選擇：Acetone Hexane MeCl2 TolueneAcetonitrile iso-Octane Pet Ether WaterChloroform iso-Propanol PERC Water/AcidEthanol Methanol THF Other2選擇溶劑完成后，將光標移至區(qū)域內(nèi)，輸入百分比例。當輸入100后，其它溶劑的比例自動設置為0。3如使用兩種以上的溶劑混合時，在SOL B，SOL C，SOL D的區(qū)域內(nèi)輸入相應的參數(shù)，切記所有溶劑的百分比之和應等于100。方法編輯建立一個新方法后，用戶可修改各參數(shù)值。修改后的參數(shù)可保存在正在編輯的方法中，也可作為另一個新方法保存。1顯示METHOD EDITOR屏幕，在EDIT#區(qū)域輸入欲編輯的方法號，或通過Select 或 Select鍵選擇欲編輯的方法號；2選擇方法號后，按Enter.該方法的參數(shù)顯示在屏幕上；3移動光標至欲修改的參數(shù)區(qū)域內(nèi)，輸入新參數(shù)，個參數(shù)的取值范圍列于標32。4當修改完成后，移動光標至SAVE TO區(qū)域內(nèi)，輸入一個未被使用的方法號，按Enter鍵保存該方法。3.2.2 方法實例方法1圖311圖311描述的是方法1的方法編輯器的屏幕。在運行時，方法按如下順序進行：l 爐溫加熱至75；l 當爐溫升至設置點后，儀器裝載萃取池和收集瓶。一個一分鐘的預加熱周期開始執(zhí)行，并且吹掃閥處于打開狀態(tài)；l 預加熱周期完成后，泵開始向萃取池內(nèi)填充萃取溶劑，并維持壓力在1500psi。l 初始期5分鐘，使萃取池溫度與爐溫一致。接下來開始5分鐘靜態(tài)萃取步驟；l 靜態(tài)萃取結束后，靜態(tài)閥打開，泵使用池體積13的溶劑沖洗通過萃取池。沖洗溶劑使用的體積近似等于設置的池體積40的三分之一，以使得三次循環(huán)結束后使用的溶劑總體積為池體積的40。l 靜態(tài)萃取和沖洗步驟再重復兩次；l 方法繼續(xù)完成下面的90秒吹掃；建立方法11.按Menu鍵顯示MENU OF SCREENS，按3進入METHOD EDITOR；2.將光標移至如下區(qū)域，并輸入如下參數(shù)；PREHEAT 1 minPURGE VALVE OFLUSH % 40 volCYCLES 3PRESSURE 1500 psiTEMPERATURE 75 CSOL A Methanol 100%PURGE 90 sec3.移動光標至SAVE TO區(qū)域，輸入3，按Enter鍵保存方法。方法實例2圖312是方法實例2的METHOD EDITOR屏幕。圖312在運行時，方法按如下順序進行：l 爐溫加熱至125；l 當爐溫升至設置點后，儀器裝載萃取池和收集瓶。一個一分鐘的預加熱周期開始執(zhí)行，并且吹掃閥處于打開狀態(tài)；l 預加熱周期完成后，吹掃閥關閉，泵開始向萃取池內(nèi)填充萃取溶劑，并維持壓力在1500psi。l 初始期6分鐘，使萃取池溫度與爐溫一致。接下來開始10分鐘靜態(tài)萃取步驟；l 靜態(tài)萃取結束后，靜態(tài)閥打開，泵使用池體積70的溶劑沖洗通過萃取池。l 方法繼續(xù)完成下面的60秒吹掃；方法實例3圖313是方法實例3的METHOD EDITOR屏幕圖313在運行時，方法按如下順序進行：l 爐溫加熱至150；l 當爐溫升至設置點后，儀器裝載萃取池和收集瓶。泵開始向萃取池內(nèi)填充萃取溶劑，并維持壓力在2000psi。l 初始期7分鐘，使萃取池溫度與爐溫一致。接下來開始5分鐘靜態(tài)萃取步驟；l 靜態(tài)萃取結束后，靜態(tài)閥打開，泵使用池體積25的溶劑沖洗通過萃取池。泵使用池體積沖洗溶劑使用的體積近似等于設置的池體積50的一半，以使得再次循環(huán)結束后使用的溶劑總體積為池體積的50。l 靜態(tài)萃取和沖洗步驟再重復一次；l 方法繼續(xù)完成下面的60秒吹掃；323建立任務順序Schedules表1按下Menu鍵,顯示MENU OF SCREENS;按下4,顯示SCHEDULE EDITOR.。當此屏幕是系統(tǒng)接通電源后第一次進入該屏幕，各區(qū)域內(nèi)顯示均為默認值（見圖314），否則顯示為上一次編輯的計劃表時的最終值。圖314在SCHEDULE EDITOR屏幕中的每一行代表一個萃取樣品，最多可輸入26個行，即26個樣品。在SCHEDULE EDITOR中的每一行中固定的分配一個收集瓶編號，對應的萃取池編號也預先給出，但取池編號不是固定不變的，用戶可改變池編號的順序，跳過某個池子或同一池子多次萃取。然而，收集瓶的順序不能改變。按下面板上的方向鍵，SCHEDULE EDITOR表中的行可向上或向下滾動。2計劃表中的每一行中輸入詳細的信息（見表33）。區(qū) 域描 述取 值 范 圍CELL開始時，萃取池編號與收集瓶編號是一一對應的。用戶可按自己的要求修改，調(diào)整萃取池編號，也可將一個萃取池指定給多個收集瓶。124METHOD輸入萃取使用的方法編號。由于爐溫加熱比制冷的速度快，建議在萃取計劃表中按從冷至熱的順序排列，可縮短爐溫等待的時間。124RINSE指定在每次萃取完成后是否執(zhí)行清洗步驟和清洗使用的溶劑。如系統(tǒng)使用溶劑控制器，設置為ON時，使用前次溶劑；否則需指定A，B，C或DOFF不清洗；ON使用前次溶劑ON A，ON B，ON C或ON D使用相應的溶劑清洗SAMPLE ID輸入一個唯一的樣品編號（可選）最多10個字符表333將光標移至SAVE TO區(qū)域，輸入一個計劃表編號（124），按Enter鍵保存修改。3.2.4 計劃表實例計劃表實例1每六樣品使用同一方法，各萃取間不清洗；VIAL#CELL#METHOD#RINSESAMPLE ID111OFF221OFF331OFF441OFF551OFF661OFF772OFF882OFF992OFF10102OFF11112OFF12122OFF13133OFF14143OFF15153OFF16163OFF17173OFF18183OFF19194OFF20204OFF21214OFF22224OFF23234OFF24244OFF2526建立計劃表實例11按Menu鍵顯示MENU OF SCREENS，按5進入MODULE SETUP屏幕；2確認METHOD RINSE區(qū)域全部為OFF，如需要可通過Select鍵選擇OFF并按Enter確認。3確認MODE區(qū)域全部LOCAL，如需要可通過Select鍵選擇LOCAL并按Enter確認。4按Menu鍵顯示MENU OF SCREENS，按4進入Schedule Editor屏幕；5將光標移至EDIT#區(qū)域，輸入0，使參數(shù)設置為默認值。6在計劃表中，方法號METHOD#區(qū)域內(nèi)16行，輸入1；712行輸入2；1318行輸入3；1924行輸入4；24，25行未用。7當修改完成后，移動光標至SAVE TO區(qū)域內(nèi)，輸入一個未被使用的方法號，按Enter鍵保存該方法。計劃表實例2每六樣品使用同一方法，最后一個樣品萃取三次，各萃取間采用清洗。VIAL#CELL#METHOD#RINSESAMPLE ID111ON1001221ON1002331ON1003441ON1004551ON1005661ON1006772ON1007882ON1008992ON100910102ON101011112ON101112122ON101213133ON101314143ON101415153ON101516163ON101617173ON101718183ON101819194ON101920204ON102021214ON102122224ON102223234ON101324244ON102425245ON102526245ON1026計劃表實例3每六樣品使用同一方法，每個樣品萃取三次，各樣品間采用清洗。VIAL#CELL#METHOD#RINSESAMPLE ID111OFF1211OFF311ON421OFF2521OFF621ON732OFF3832OFF932ON1042OFF41142OFF1242ON1353OFF51453OFF1553ON1663OFF61763OFF1863ON1974OFF72074OFF2174ON2284OFF82384OFF2484ON252633 方法研究指南對于新樣品的萃取方法研究建立，建議采用如下步驟：1選擇溶劑（詳見3.1.1節(jié)）2準備樣品（見4.X節(jié)）3選擇萃取池體積（見3.1.4）4使用默認參數(shù)建立一個方法。即在METHOD EDITOR屏幕中的EDIT#區(qū)域內(nèi)輸入0，在SAVE TO區(qū)域內(nèi)任意輸入一個數(shù)字，如2，按Enter鍵保存該方法。5一個計劃表，該計劃表對同一樣品萃取三次，分別收集在三個收集瓶內(nèi)，方法采用上一步中保存的方法號。見圖315圖3156運行計劃表并分析收集萃取物；7如在2或3號收集瓶中可檢測到用戶欲萃取的組分，可按如下方法調(diào)節(jié)萃取條件，每次修改一項。a)提高萃取溫度；通常提高溫度對萃取效果是非常明顯的。但一些組分在高溫下會分解，因此建議使用溫度在200以下。如果存在氧化，萃取溶劑在使用前需脫氣。b)采用兩次靜態(tài)萃取和沖洗步驟；延長靜態(tài)萃取的時間以增強萃取物向萃取溶劑的擴散。分兩次靜態(tài)萃取步驟，而不是簡單地延長靜態(tài)萃取時間是因為在新鮮的溶劑中萃取物更容易完成擴散。c)增加沖洗溶劑的體積可使得通過樣品的溶劑量更多，最大為萃取池體積的150%。注意：過大的沖洗體積和靜態(tài)萃取的次數(shù)過多會影響到溶劑使用更多，造成收集瓶溢出。8 每次調(diào)整完成后，重復運行本任務順序表，并分析萃取液，當在每組樣品的第二號瓶中不再出現(xiàn)欲萃取物質(zhì)，說明此類樣品萃取方法條件摸索完成。注意：ASE200使用壓力來快速填充萃取溶劑，并維持當溶劑加溫超過沸點時仍保持液態(tài)。9如在第二號瓶中欲萃取物仍可分析出，還在方法中需繼續(xù)做如下調(diào)整：l 運行三次靜態(tài)萃取和沖洗l 繼續(xù)升高萃取溫度l 增加靜態(tài)萃取時間l 更換其它的溶劑。34 運行萃取341 在方法控制下運行在運行一次萃取之前，用戶必須先建立一個方法，在這個方法中包含了萃取的條件。3.2.1節(jié)中描述了任何通過面板建立一個方法。任何通過AutoASE的軟件建立方法見軟件說明書。一次萃取完成后，可將本次萃取的報告打印出來（相詳見3.6節(jié)）。此報告只能在下次萃取運行之前打印，因為當下次運行開始后本次運行的所有信息即被從存儲器中刪除。在用戶建立自己的方法之前，儀器本身裝有一個默認的方法供用戶使用。在用戶使用默認的方法之前，需要給這個默認的方法指定一個方法號（名）。為默認的方法指定方法號1 按Menu鍵顯示MENU OF SCREEN,按3進入METHOD EDITOR；2 將光標移至EDIT區(qū)域，輸入0，儀器顯示默認方法的參數(shù)。（見圖316）；3 移動光標至SAVE TO區(qū)域，按Select 鍵，顯示一個尚未使用的一個方法號，按Enter鍵，此方法方可裝載并運行。圖316裝載并運行一個方法4 按Menu鍵顯示MENU OF SCREEN，按Enter或1顯示LOAD METHOD OR SCHEDULE屏幕；見圖317。圖3175 確定在 LOAD區(qū)域內(nèi)顯示METHOD，如沒有，按Select 至顯示METHOD。6 對于默認方法