第4課時(shí) 植物的克隆,第二章 克隆技術(shù),選修3 現(xiàn)代 生物技術(shù)專題,一、植物細(xì)胞全能性和植物組織培養(yǎng),三、原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程,二、細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng),達(dá)標(biāo)檢測,內(nèi)容索引,一、植物細(xì)胞全能性和植物組織培養(yǎng),1.植物細(xì)胞的全能性 (1)概念：植物體的 都具有遺傳上的全能性，因而都具有發(fā)育成 的潛能。 (2)全能性的體現(xiàn) 植物體的每個(gè)生活細(xì)胞，即使是已經(jīng)高度成熟和分化的細(xì)胞，都保持了恢復(fù)到 的能力，都具有遺傳上的全能性。 由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間 的差異， 的表達(dá)程度大不相同。 植物細(xì)胞的全能性更容易體現(xiàn)，植物的組織培養(yǎng)比動(dòng)物更方便。,新知導(dǎo)學(xué),每個(gè)生活細(xì)胞,完整植株,分生狀態(tài),遺傳性,細(xì)胞全能性,(3)全能性下降的原因 在長期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原因有 、 等，而且其結(jié)果是不可逆的。 細(xì)胞或組織中 被打破，或細(xì)胞對(duì)外源生長物質(zhì)的 發(fā)生改變。 隨著時(shí)間推移，由于其他各種原因產(chǎn)生了缺乏 的細(xì)胞系。,染色體畸變,細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生,激素平衡,敏感性,成胚性,2.植物組織培養(yǎng) (1)理論基礎(chǔ)： 。 (2)一般程序：配制 培養(yǎng)基獲取 的植物組織塊組織培養(yǎng)，獲得 (創(chuàng)傷組織)以 的營養(yǎng)物質(zhì)和 誘導(dǎo)愈傷組織，直到再生出新植株。 (3)愈傷組織：在創(chuàng)傷表面形成一種由相對(duì)沒有分化的活的 組成的 。,植物細(xì)胞全能性,半固體,消毒,愈傷組織,生長調(diào)節(jié)劑,薄壁細(xì)胞團(tuán),適當(dāng)配比,新生組織,(4)胚性細(xì)胞的特征：將含有愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在 上，通過 培養(yǎng)可以分散成 。這種單細(xì)胞 、 小而 大。 (5)用 和 水解細(xì)胞壁，可以獲得分離的植物細(xì)胞原生質(zhì)體，用適當(dāng)方法培養(yǎng)原生質(zhì)體，也可以獲得新植株。,搖床,液體懸浮,單細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)豐富,液泡,細(xì)胞核,纖維素酶,果膠酶,細(xì)胞全能性大小的分析 (1)體細(xì)胞全能性與細(xì)胞分化程度：分化程度低的>分化程度高的。 (2)體細(xì)胞全能性與細(xì)胞分裂能力：分裂能力強(qiáng)的>分裂能力弱的。 (3)不同類型細(xì)胞的全能性：受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。 (4)不同生物細(xì)胞的全能性：植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞。,探究1實(shí)例分析 1.分析實(shí)例是否體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性并給出原因。 (1)植物花藥離體培養(yǎng)獲得植株。,互動(dòng)探究,答案 是。花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，體現(xiàn)了花藥細(xì)胞的全能性。,(2)利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草素。,答案 否。發(fā)育成完整生物個(gè)體才能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，而生產(chǎn)紫草素只是將紫草細(xì)胞培養(yǎng)成愈傷組織。,答案,(3)紫色糯性玉米種子培育成植株。,答案 否。種子的胚已是新植物的幼體，發(fā)育成完整植株的過程，相當(dāng)于植物長大。,2.配子(卵和精子)中染色體數(shù)比正常體細(xì)胞減少了一半，配子是否還有全能性？為什么？,答案 有。因?yàn)轶w細(xì)胞中染色體成對(duì)存在，配子染色體數(shù)雖減半，但仍含有完整的染色體組，具有控制生物性狀的全部基因。,答案,探究2實(shí)驗(yàn)探究 煙草植株的植物組織培養(yǎng)如圖所示。完善圖示內(nèi)容，思考回答相關(guān)問題：,煙草根,細(xì)胞,愈,傷組織,懸浮,培養(yǎng),單細(xì)胞,幼胚,1.理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞的全能性 物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體的體細(xì)胞通過有絲分裂形成的子細(xì)胞與母細(xì)胞(受精卵) 相同，即生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有_ 。 2.操作程序 (1)半固體培養(yǎng)基的配制：配制含有適當(dāng) 、 的含0.7%1%瓊脂的培養(yǎng)基，倒在 試管中凝固成 。 (2)小組織塊(即外植體)的切?。簭?的根、莖或葉上切取。,核內(nèi)的基因,本物種所特有的全套遺,傳物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì),植物生長調(diào)節(jié)劑,滅菌,半固體,消毒,(3)愈傷組織的獲得：植物組織塊切口處的細(xì)胞在創(chuàng)傷的刺激下發(fā)生_ 成為 的細(xì)胞。在創(chuàng)傷表面形成一種由相對(duì)沒有分化的活的_ 組成的新生組織，即為愈傷組織。 (4)新植株的再生 誘導(dǎo)愈傷組織：通過調(diào)節(jié) 和 的適當(dāng)配比，使其產(chǎn)生出芽和根的 ，并由此再生出新的植株。 將含有愈傷組織培養(yǎng)物的試管放在搖床上，通過 培養(yǎng)分散成單細(xì)胞，再在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)發(fā)育成 ，進(jìn)而發(fā)育成新的植株。,脫分,化,分裂,薄壁細(xì),胞團(tuán),營養(yǎng)物質(zhì),生長調(diào)節(jié)劑,頂端分生組織,液體懸浮,胚狀體,3.愈傷組織的脫分化(去分化)、再分化 (1)高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生 的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化，或者叫做去分化。 (2)脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以_ ，這個(gè)過程叫做再分化。,愈傷組織,重新分化成根或芽等器,官,4.在植物組織培養(yǎng)過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作？,答案 避免雜菌在培養(yǎng)基上迅速生長消耗營養(yǎng)，且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長。,5.若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位，愈傷組織中是否會(huì)含有葉綠體？,答案 培養(yǎng)物經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞，故愈傷組織中不會(huì)含有葉綠體。,答案,6.植物組織培養(yǎng)中的脫分化階段，培養(yǎng)的組織細(xì)胞是自養(yǎng)型還是異養(yǎng)型？為什么？,答案 脫分化過程中細(xì)胞營異養(yǎng)生活。因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞沒有葉綠體，并且一般要避光培養(yǎng)，無法進(jìn)行光合作用。,答案,例1 下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)技術(shù)的敘述中，錯(cuò)誤的是 A.培養(yǎng)基中添加營養(yǎng)物質(zhì)的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B.培養(yǎng)基中的植物生長調(diào)節(jié)劑影響愈傷組織的生長和分化 C.離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D.同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因型相同,答案,解析,解析 植物組織培養(yǎng)技術(shù)既可對(duì)植物體細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，也可對(duì)生殖細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)。假設(shè)某植株的基因型為Aa，取其根尖細(xì)胞離體培養(yǎng)形成的新植株基因型仍為Aa；若取該植株花藥細(xì)胞離體培養(yǎng)，形成的新植株基因型為A或a。,例2 (2017浙江莆田一中月考)下列關(guān)于植物細(xì)胞全能性的描述錯(cuò)誤的是 A.植物細(xì)胞的全能性比動(dòng)物細(xì)胞更容易表達(dá) B.不同種類的植物之間細(xì)胞全能性的表達(dá)程度不相同 C.同種植物的不同基因型個(gè)體之間細(xì)胞全能性的表達(dá)程度相同 D.某些植物的再生植株，多次繼代培養(yǎng)后會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力,答案,解析,解析 高度分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能，植物細(xì)胞的全能性比動(dòng)物細(xì)胞更容易表達(dá)，A正確； 植物種類不同，全能性的表達(dá)程度不同，B正確； 同種植物不同基因型的個(gè)體之間，細(xì)胞全能性的表達(dá)程度也不相同，C錯(cuò)誤； 小麥、玉米和水稻等作物的一些品種或品系的培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出的再生植株，在多次繼代培養(yǎng)后，會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力，D正確。,植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件及下降原因,(1)表達(dá)條件,離體狀態(tài)(必要)，無菌操作(防止雜菌的污染)； 有一定的營養(yǎng)物質(zhì)； 植物生長調(diào)節(jié)劑； 一定的外界環(huán)境條件(溫度、酸堿度、光照的控制等,(2),遺傳物質(zhì)變化,下降原因,染色體畸變 細(xì)胞核變異 非整倍體產(chǎn)生,生長發(fā)育條件變化,激素平衡被打破 對(duì)外源生長物質(zhì)敏感性發(fā)生改變 其他原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系,二、細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng),1.過程：單個(gè)植物細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，依次發(fā)育成細(xì)胞團(tuán)、 、心形胚和 ，最后再生出完整的植株。 2.方法或措施：主要通過平衡的 進(jìn)行調(diào)控。 (1)適量的 和 配比，可誘導(dǎo)芽的分化。 (2)適量的 及適當(dāng)減除其他某些激素，可誘導(dǎo)生根。,新知導(dǎo)學(xué),球形胚,胚狀體,植物激素配比,激動(dòng)素,吲哚乙酸,細(xì)胞分裂素,3.意義 (1)可以在實(shí)驗(yàn)室、試管等器皿中進(jìn)行植物的 過程和自受精卵進(jìn)行的植物 過程，以及調(diào)節(jié)控制這些過程的環(huán)境因素、遺傳基礎(chǔ)和分子及生理生化機(jī)理研究。 (2)可以進(jìn)行遺傳工程的操作，完成與植物生長發(fā)育有關(guān)的 或 的研究。 (3)可以方便地通過實(shí)驗(yàn)手段培育 。,受精,胚胎發(fā)育,重要基因,影響因素,植物新品種,例3 下列關(guān)于植物細(xì)胞工程的有關(guān)敘述，正確的是 A.植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的可能原 因有染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，但其結(jié)果是可逆的 B.處于適當(dāng)液體培養(yǎng)條件的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可 發(fā)生類似受精卵發(fā)育成胚的過程，即從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、心形胚、 球形胚和胚狀體，最后再生出完整植株 C.植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)物缺乏成胚性細(xì)胞系的原因可能是細(xì)胞或組織中激 素平衡被破壞，或細(xì)胞對(duì)外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變 D.植物器官培養(yǎng)方面，器官發(fā)生和形態(tài)建成主要是通過平衡的植物激素配 比進(jìn)行調(diào)控，適量的生長素和細(xì)胞分裂素配比可以誘導(dǎo)根的分化,答案,解析,解析 植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力下降的原因可能是染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是不可逆的，也可能是細(xì)胞或組織中激素平衡被破壞，或細(xì)胞對(duì)外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變，A錯(cuò)誤，C正確； 處于適當(dāng)液體培養(yǎng)條件的單個(gè)植物細(xì)胞，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)生類似受精卵發(fā)育成胚的過程，即從單細(xì)胞依次到細(xì)胞團(tuán)、球形胚、心形胚和胚狀體，最后再生出完整植株，B錯(cuò)誤； 植物器官培養(yǎng)方面，器官發(fā)生和形態(tài)建成主要是通過平衡的植物激素配比進(jìn)行調(diào)控的，例如，適量的生長素和細(xì)胞分裂素配比可以誘導(dǎo)芽的分化，適量的生長素(吲哚乙酸)及適當(dāng)減除其他某些激素可誘導(dǎo)生根，D錯(cuò)誤。,A.從愈傷組織中分散得到的單細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡大且核也大 B.將愈傷組織培養(yǎng)成植株還是特定細(xì)胞系要通過平衡生長調(diào)節(jié)劑的配比 進(jìn)行調(diào)控 C.在選擇紅豆杉時(shí)除了要考慮其優(yōu)良性狀外還需考慮細(xì)胞全能性的表達(dá) 能力 D.通過培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)重要次生代謝產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn),例4 (2018淳安中學(xué)檢測)從紅豆杉的樹皮和樹葉中提煉出來的紫杉醇屬于植物的次生代謝產(chǎn)物，它對(duì)多種晚期癌癥療效突出。下列有關(guān)紫杉醇獲取途徑的敘述錯(cuò)誤的是,答案,解析,解析 從愈傷組織中分散得到的單細(xì)胞屬于胚性細(xì)胞，特點(diǎn)是細(xì)胞核大、細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小，A錯(cuò)誤； 將愈傷組織培養(yǎng)成植株還是特定細(xì)胞系需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)物中激素配比，B正確； 選擇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，為增加成功概率需考慮其全能性表達(dá)能力，C正確； 紫杉醇是細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物，通過特定細(xì)胞系的培養(yǎng)，可實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，D正確。,植物細(xì)胞培養(yǎng)的過程,大規(guī)模植物細(xì)胞培養(yǎng) 液體培養(yǎng)基 細(xì)胞篩選 次生代謝產(chǎn)物含量高，生長迅速 單細(xì)胞無性繁殖系 擴(kuò)大培養(yǎng) 大量植物細(xì)胞 分離有用物質(zhì),三、原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程,1.植物原生質(zhì)體的獲得方法 在0.50.6 mol/L的 溶液環(huán)境(較高滲透壓)下用 和_ 混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，除去 ，獲得球形的原生質(zhì)體。,新知導(dǎo)學(xué),甘露醇,纖維素酶,果膠酶,細(xì)胞壁,2.植物細(xì)胞工程的操作過程,基因工程,轉(zhuǎn)基因,3.多途徑的植物克隆實(shí)踐 (1)將外源遺傳物質(zhì)(DNA)導(dǎo)入 ，可以培育出抗逆、高產(chǎn)及優(yōu)質(zhì)的轉(zhuǎn)基因植株。 (2)植物細(xì)胞培養(yǎng)的其他多種研究和應(yīng)用廣泛開展。,宿主細(xì)胞,獲得重要次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥)需要將外植體培養(yǎng)到哪個(gè)階段？,答案 應(yīng)讓外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，培養(yǎng)特定細(xì)胞系。,思考,答案,(1)獲取原生質(zhì)體時(shí)，加入高濃度高滲甘露醇溶液的作用是防止原生質(zhì)體吸水脹破。 (2)獲得次生代謝產(chǎn)物時(shí)，一般將細(xì)胞培養(yǎng)至愈傷組織階段即可，因此不涉及再分化過程。 (3)原生質(zhì)體培養(yǎng)成功的表現(xiàn)是細(xì)胞壁再生。,A.過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理 B.過程能定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性 C.過程需要通過液體懸浮培養(yǎng) D.過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理,例5 (2017浙江紹興高二質(zhì)檢)如圖表示利用植物細(xì)胞工程對(duì)棉花進(jìn)行改良的過程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是,答案,解析,解析 過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理去掉細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，A正確； 過程為轉(zhuǎn)基因技術(shù)，能定向改變原生質(zhì)體的遺傳特性，B正確； 過程需要在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，C錯(cuò)誤； 過程需用適宜濃度的生長調(diào)節(jié)劑處理，促進(jìn)根、芽的發(fā)育，D正確。,植物組織培養(yǎng)會(huì)涉及固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。獲取愈傷組織都是在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的，而獲取胚性細(xì)胞，需將原生質(zhì)體進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)(液體培養(yǎng)基)。,例6 (2016浙江10月選考節(jié)選)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)的研究。請(qǐng)回答： (1)原生質(zhì)體的分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗的葉片，放入含有0.5 mol/L甘露醇(維持較高滲透壓)的_混合液處理，經(jīng)過離心純化后獲得原生質(zhì)體。,答案,解析,纖維素酶和果膠酶,解析 去除植物細(xì)胞壁，獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，常用的方法是利用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞。,(2)原生質(zhì)體的培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該_培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條途徑形成再生植株。途徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、_和胚狀體，最后發(fā)育成植株。途徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高的激素是_。胚性細(xì)胞的主要特點(diǎn)是_(A.液泡小、細(xì)胞核小 B.液泡大、細(xì)胞核大 C.液泡大、細(xì)胞核小 D.液泡小、細(xì)胞核大)。,答案,解析,降低,心形胚,細(xì)胞分裂素,D,解析 在獲取原生質(zhì)體時(shí)甘露醇是作為維持細(xì)胞膜內(nèi)外滲透壓平衡的穩(wěn)定劑使用的。其具體作用是提高滲透壓，防止水分滲入細(xì)胞內(nèi)部，造成細(xì)胞破裂。在原生質(zhì)體形成新細(xì)胞壁后，細(xì)胞壁有支持與保護(hù)作用，所以要降低甘露醇的濃度；由細(xì)胞團(tuán)形成再生植株，途經(jīng)：從胚性細(xì)胞細(xì)胞團(tuán)球形胚心形胚胚狀體，然后再生出完整的小植株；為快速誘導(dǎo)芽的分化，培養(yǎng)基中往往添加細(xì)胞分裂素；胚性細(xì)胞的特點(diǎn)是液泡小、細(xì)胞核大。,(3)為了對(duì)煙草的某些性狀進(jìn)行改良，分離得到兩種煙草的原生質(zhì)體后，通過_方法將它們的遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)獲得具有新性狀的再生植株。提取再生植株的DNA，采用_擴(kuò)增相關(guān)基因，來鑒定遺傳物質(zhì)是否成功重組。,答案,解析,原生質(zhì)體融合,PCR,解析 植物細(xì)胞工程中，利用原生質(zhì)體融合的方法獲得雜種細(xì)胞；體外擴(kuò)增DNA技術(shù)常用的是PCR技術(shù)。,植物細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的關(guān)系,全能性,愈傷組織,胚狀體,學(xué)習(xí)小結(jié),達(dá)標(biāo)檢測,解析 卵細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，受精卵是未分化的細(xì)胞，受精卵在自然條件下能形成完整個(gè)體，全能性最高，A錯(cuò)誤，C正確； 高度分化的植物體細(xì)胞也具有全能性，B正確； 植物細(xì)胞在一定條件下經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到再生植株，是細(xì)胞全能性的表現(xiàn)，D正確。,1.下列有關(guān)細(xì)胞全能性的敘述，不正確的是 A.卵細(xì)胞與受精卵一樣，細(xì)胞未分化，全能性很高 B.大量的科學(xué)事實(shí)證明，高度分化的植物體細(xì)胞仍具有全能性 C.受精卵在自然條件下能使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體，因此全能性最高 D.通過植物組織培養(yǎng)得到的試管苗，是植物細(xì)胞在一定條件下表現(xiàn)全能 性的結(jié)果,答案,解析,1,2,3,4,5,2.植物細(xì)胞培養(yǎng)是在植物組織培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，下列有關(guān)植物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是 A.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的目的是為了獲得大量有生理活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物 B.植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)快速、高效，不受季節(jié)、外部環(huán)境等條件的限制 C.利用生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)人參細(xì)胞，提取人參皂甙，用于生產(chǎn)保健藥 品和美容護(hù)膚用品 D.植物細(xì)胞培養(yǎng)需要在一定的溫度、pH等條件下進(jìn)行，但不需要進(jìn)行無 菌操作,答案,解析,1,2,3,4,5,解析 植物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)一樣，整個(gè)培養(yǎng)過程必須在無菌條件下進(jìn)行，否則培養(yǎng)基內(nèi)將長出許多雜菌與離體細(xì)胞爭奪營養(yǎng)與生存空間，影響細(xì)胞增殖和細(xì)胞次級(jí)代謝產(chǎn)物的獲得。A項(xiàng)所述為植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的，B項(xiàng)為植物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)，C項(xiàng)為植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用。,1,2,3,4,5,3.(2018浙江名校協(xié)作體聯(lián)考)植物組織培養(yǎng)基中肯定沒有下列哪種物質(zhì) A.血清 B.生長素 C.無機(jī)鹽 D.蔗糖,解析 植物組織培養(yǎng)基中通常含有植物激素(如生長素、細(xì)胞分裂素等)、無機(jī)鹽(維持滲透壓)、蔗糖(提供能量)等，不含有血清。,答案,解析,1,2,3,4,5,4.(2017舟山中學(xué)期中)下列有關(guān)高等植物原生質(zhì)體制備和培養(yǎng)的敘述，正確的是 A.纖維素酶和果膠酶混合液可用于制備懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的原生質(zhì)體 B.加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保護(hù)纖維素酶和果膠酶 C.從不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小、形狀相同 D.所有植物的愈傷組織經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)均可得到再生植株,答案,解析,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,解析 植物細(xì)胞壁由纖維素和果膠構(gòu)成，因此可以采用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，A正確； 加入0.6 mol/L甘露醇的目的是防止原生質(zhì)體吸水脹破，B錯(cuò)誤； 不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小、形狀存在差異，C錯(cuò)誤； 不同植株或基因型個(gè)體，細(xì)胞全能性存在差異，愈傷組織經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)不一定能得到再生植株，D錯(cuò)誤。,解析 不同植株，全能性存在差異，即使同種植株，基因型不同個(gè)體之間全能性也存在差異。,(1)外植體a、b、c來自同種植株，植株A、B、C中的細(xì)胞，全能性表達(dá)程度_(填“相同”或“可能不同”)。,5.(2017金華一中期末)下圖中的代表通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育新植株的三條途徑，請(qǐng)回答：,1,2,3,4,5,答案,解析,可能不同,解析 分析題圖可知，途徑和均借助了搖床，即進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)，獲得單細(xì)胞，因此該途徑所用培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基。同時(shí)途徑和均涉及愈傷組織的獲得，需利用固體培養(yǎng)基(或半固體培養(yǎng)基)。,(2)途徑和需要用到_和_(填培養(yǎng)基的物理性質(zhì))培養(yǎng)基兩種。,1,2,3,4,5,答案,解析,液體培養(yǎng)基,固體(或半固體),解析 植物克隆工程中，去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，一般在高濃度甘露醇溶液中進(jìn)行，使用高濃度甘露醇的目的是維持滲透壓，防止原生質(zhì)體吸水脹破。原生質(zhì)體的培養(yǎng)成功，標(biāo)志著植物細(xì)胞工程的進(jìn)步。,(3)外植體c脫去細(xì)胞壁過程中需要加入適宜濃度的_(A.甘露醇 B.鹽酸 C.蒸餾水 D.氯化鈉)以保持一定的滲透壓。原生質(zhì)體培養(yǎng)成功標(biāo)志著_技術(shù)又向前邁進(jìn)了一步。,1,2,3,4,5,答案,解析,A,植物細(xì)胞工程,(4)通過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)能產(chǎn)生重要_(如某些中藥)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。,1,2,3,4,5,答案,解析,解析 通過培養(yǎng)大量特定細(xì)胞系，可以實(shí)現(xiàn)能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物(如某些中藥)的細(xì)胞的大量克隆和產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)。,次生代謝產(chǎn)物,