考點 33觀察類實驗和鑒定提取類實驗直擊考綱能獨立完成“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實驗，包括理解實驗?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。1觀察類實驗操作流程模板2鑒定類實驗的操作流程模板1觀察類實驗細胞的實驗名稱觀察對象      染色劑      生物材料(及特殊要求)狀態(tài)觀察 DNA 和 RNADNA、RNA 同時DNA 和 RNA 的  吡羅紅甲基              存在時染色劑死細胞在細胞中的分布分布綠染色劑要混合使用且人的口腔現(xiàn)配現(xiàn)用上皮細胞用生理鹽水配觀察線粒體活細胞線粒體健那綠染液制健那綠染液，用顯微鏡觀察1觀察細胞的減數(shù)無(為固定裝死細胞蝗蟲精母細胞分裂低溫誘導(dǎo)染色體片)改良苯酚品紅死細胞加倍染色體染液洋蔥根染色前需漂洗龍膽紫溶尖分生觀察細胞的有絲干凈死細胞液(或醋酸區(qū)細胞分裂洋紅液)酵母菌細胞、水綿細胞、葉用顯微鏡觀察活或死細胞的多種多樣的細胞細胞保衛(wèi)細胞、魚的紅細胞等蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻觀察葉綠體活細胞葉綠體觀察植物細胞的紫色中央液泡的大小無(無需染色)  葉)紫色洋蔥鱗片葉外表皮細活細胞質(zhì)壁分離與復(fù)原2.鑒定提取類實驗實驗名稱試劑和原生質(zhì)層的位置顏色胞生物材料備注若材料有顏色，淀粉的鑒定碘液藍色脫色的葉片等磚紅色需先脫色現(xiàn)配現(xiàn)用、水浴還原糖的鑒定斐林試劑蘋果或梨勻漿等沉淀加熱需用高倍鏡觀察蘇丹(或)染花生種子切片脂肪的鑒定橘黃(或紅)色                   (勻漿不需用高液(或勻漿)倍鏡觀察)先加 A 液，后加蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑紫色豆?jié){、稀蛋清等B 液，搖勻使用綠葉中色素的提提取液：無水乙胡蘿卜素：橙新鮮的綠葉(如   加入二氧化硅是2取和分離醇；分離液：層析液DNA 的粗提取和黃色；葉黃素：黃色；葉綠素 a：藍綠色；葉綠素 b：黃綠色菠菜葉)         為了研磨得更充分；碳酸鈣可防止在研磨中色素被破壞沸水浴加熱二苯胺試劑藍色         雞血細胞等鑒定3.關(guān)注洋蔥在實驗中的“一材多用”取材部位實驗名稱植物細胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原5 min取材原因外表皮細胞含紫色大液泡細胞較大，外表皮細胞有大液泡，鱗片葉使用高倍顯微鏡觀察細胞的多樣性葉內(nèi)表皮細胞有明顯的細胞核觀察 DNA 和 RNA 在細胞中的分布         內(nèi)表皮細胞近于無色管狀葉       葉綠體中色素的提取和分離材料易得，且分生區(qū)細胞分裂能觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂力強，染色體數(shù)目少，易于觀察根材料易得，且低溫(4 )下根尖低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化也能分裂生長，誘導(dǎo)染色體變異率較高4.辨析有關(guān)顏色反應(yīng)類實驗的五種顏色顏色原理水浴加熱還原糖斐林試劑  磚紅色沉淀紅脂肪蘇丹染液紅色RNA吡羅紅溶液紅色3綠                               在酸性酒精橙色的重鉻酸鉀溶液條件下灰綠色染色體(質(zhì))醋酸洋紅液紅色脂肪蘇丹染液橘黃色黃葉綠體中色素分離的濾紙條中：胡蘿卜素橙黃色，葉黃素黃色DNA甲基綠染液綠色線粒體健那綠染液藍綠色葉綠體中色素分離的濾紙條中：葉綠素 b黃綠色，葉綠素 a藍綠色淀粉碘液藍色藍紫水浴加熱DNA二苯胺試劑  藍色染色體(質(zhì))龍膽紫溶液紫色蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色5.常用試劑的種類及作用體積分數(shù)或質(zhì)量試劑作用原理                 相關(guān)實驗濃度50%70%洗去浮色(溶劑)消毒脂肪的鑒定微生物的培養(yǎng)酒精觀察細胞的有絲分裂；低溫誘導(dǎo)染色95%100%5%8%解離溶解、提取色素營造酸性環(huán)境改變細胞膜通透性，使染色質(zhì)中體加倍葉綠體色素的提取和分離探究 pH 對酶活性的影響觀察 DNA 和 RNA 在細胞中的分布鹽酸DNA 與蛋白質(zhì)分離觀察細胞的有絲分裂；低溫誘導(dǎo)染色15%解離體加倍斐林試劑、雙縮脲NaOH0.1 g/mL檢測還原糖、蛋白質(zhì)試劑的成分4CuSO45%0.1%0.05 g/mL0.01 g/mL營造堿性環(huán)境遇酚酞呈紫紅色斐林試劑的成分雙縮脲試劑的成探究 pH 對酶活性的影響探究細胞表面積與體積的關(guān)系檢測還原糖檢測蛋白質(zhì)分6.常見疑難辨析(1)在觀察類實驗中低倍鏡和高倍鏡的使用情況如何？除觀察類實驗外，還有什么實驗中也用到了顯微鏡呢？提示觀察類實驗中除了“觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”使用低倍鏡即可外，其余均需要使用高倍顯微鏡；還有“脂肪的切片法鑒定”“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”也用到了顯微鏡。(2)“觀察 DNA 和 RNA 在細胞中的分布”實驗中能否選用哺乳動物的成熟紅細胞？為什么？提示不能。因為哺乳動物的成熟紅細胞中無細胞核和眾多細胞器，幾乎不含有 DNA 和 RNA。(3)能否用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體？為什么？提示不能。因為葉綠體中的色素的顏色會掩蓋線粒體被健那綠染色后的顏色變化。(4)在“觀察細胞的有絲分裂”實驗中為什么應(yīng)注意觀察呈正方形的根尖分生區(qū)細胞？提示呈正方形的根尖分生區(qū)細胞分裂旺盛，而呈長方形的細胞可能是伸長區(qū)或成熟區(qū)的細胞，沒有分裂能力。(5)在觀察減數(shù)分裂實驗中為什么不宜選擇動物的卵巢或植物的雌蕊？提示因為雄配子的產(chǎn)生數(shù)量遠遠多于雌配子，更易觀察到減數(shù)分裂。(6)選用菠菜葉觀察葉綠體時，為什么要取稍帶些葉肉細胞的下表皮？提示因為靠近下表皮的葉肉細胞中的葉綠體較大而數(shù)目較少。(7)為什么應(yīng)選取成熟的植物細胞觀察質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗？提示因其含有中央大液泡，易于發(fā)生質(zhì)壁分離與復(fù)原的實驗現(xiàn)象。(8)斐林試劑能否用于蛋白質(zhì)的鑒定？為什么？提示不能，因為用于蛋白質(zhì)鑒定的雙縮脲試劑 B 液是 0.01 g/mL 的 CuSO4 溶液，兩種試劑的本質(zhì)不同。斐林試劑的本質(zhì)是新制的 Cu(OH)2，故應(yīng)將甲液和乙液等量混勻后使用，而雙縮脲試劑的本質(zhì)是堿性條件下的 Cu2，故應(yīng)先加 A 液 1 mL 造成堿性環(huán)境，再加 B 液 4 滴搖勻使用。(9)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？提示不一定，因為脂肪的鑒定有兩個方案，可磨碎后在試管內(nèi)鑒定，肉眼觀察即可，也可做切片借助顯微鏡觀察。(10)綠葉中色素的提取和分離有何區(qū)別？提示前者用無水乙醇提取法，原理是色素能夠溶于有機溶劑無水乙醇中；而后者用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素隨層析液在濾紙條上擴散得快，反5之?dāng)U散得慢。題組一觀察類實驗1(2018·濱海新區(qū)模擬)洋蔥是常用的生物學(xué)實驗材料。下列有關(guān)實驗中不能達到預(yù)期目的的是()A用洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮作實驗材料，觀察 DNA、RNA 在細胞中的分布B用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察植物細胞的質(zhì)壁分離C用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察細胞中的線粒體D用洋蔥根尖作為實驗材料，觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞答案C解析洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮有細胞核，無紫色的大液泡，不影響顏色，可以作實驗材料，觀察DNA、RNA 在細胞中的分布，A 正確；紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，觀察原生質(zhì)層的變化較容易，可以作為實驗材料，觀察植物細胞的質(zhì)壁分離，B 正確；觀察細胞中的線粒體，需要染色，紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，影響觀察效果，故觀察細胞中的線粒體不能用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料， C 錯誤；洋蔥根尖具有分生組織，能進行細胞分裂，可以作為觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞的實驗材料， D 正確。2(2018·榆林一模)下列用顯微鏡觀察的實驗中，細胞不需要染色的是 ()A觀察 DNA 和 RNA 在口腔上皮細胞中的分布B觀察口腔上皮細胞中的線粒體C觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂D觀察洋蔥表皮細胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原答案D解析觀察 DNA 和 RNA 在口腔上皮細胞中的分布，需要用吡羅紅甲基綠染色劑染色， A 錯誤；觀察口腔上皮細胞中的線粒體，需要用健那綠染液染色，B 錯誤；觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂，需要用龍膽紫溶液或者醋酸洋紅液使得染色體著色， C 錯誤；觀察洋蔥表皮細胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原，由于洋蔥表皮細胞的液泡有色素，因此不需要染色，可直接觀察， D 正確。3(2018·保定期末 )只有在保持細胞活性的條件下，才能顯示細胞中某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的實驗是()A蘇丹染色觀察花生種子子葉細胞中的脂肪B健那綠染色觀察動物細胞的線粒體C龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞的有絲分裂D用甲基綠、吡羅紅染液染色觀察動物細胞中的 DNA 和 RNA 的分布6答案B解析觀察花生子葉中脂肪時，無需保持細胞活性， A 錯誤；健那綠是活性染料，因此只有在保持細胞活性的條件下才能觀察到線粒體被染成藍綠色， B 正確；觀察細胞有絲分裂實驗，解離時已經(jīng)用鹽酸和酒精將細胞殺死，C 錯誤；觀察 DNA 和 RNA 在細胞內(nèi)的分布實驗中，已經(jīng)用鹽酸將細胞殺死，使細胞膜喪失選擇透過性，D 錯誤。題組二鑒定提取類實驗4(2018·廣東模擬)下列有關(guān)組織細胞中化合物鑒定實驗的敘述，正確的是 ()A蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后，會產(chǎn)生紫色反應(yīng)B將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)無色，水浴加熱后有磚紅色沉淀生成C觀察 DNA 與 RNA 在細胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于 DNA 與吡羅紅結(jié)合D酵母菌進行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定答案A解析蛋白酶本身就是蛋白質(zhì)，因此用雙縮脲試劑鑒定會產(chǎn)生紫色反應(yīng)， A 正確；斐林試劑本身具有藍色，因此將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)藍色， B 錯誤；觀察 DNA 與 RNA 在細胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于 DNA 與甲基綠結(jié)合，C 錯誤；酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精，酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精，D 錯誤。5(2018·旌陽區(qū)校級模擬)以下關(guān)于實驗步驟的敘述(試劑、藥品的濃度和用量符合要求)，正確的是()A鑒定蛋白質(zhì)：豆?jié){CuSO4 溶液NaOH 溶液觀察顏色變化B鑒定還原糖：蘋果勻漿CuSO4 溶液NaOH 溶液水浴加熱觀察顏色變化C提取綠葉中的色素：剪碎綠葉SiO2CaCO3無水乙醇研磨過濾D觀察 DNA 和 RNA 在細胞中的分布：制片解離漂洗染色顯微鏡觀察答案C解析蛋白質(zhì)的鑒定應(yīng)先加 NaOH 溶液，再加 CuSO4 溶液，A 錯誤；用斐林試劑鑒定還原糖時，應(yīng)將 NaOH 溶液和 CuSO4 溶液等量混合使用，B 錯誤；提取綠葉中的色素的流程為剪碎綠葉SiO 2CaCO3無水乙醇研磨過濾，C 正確；觀察 DNA 和 RNA 在細胞中的分布：取口腔上皮細胞涂片烘干水解沖洗涂片染色觀察，D 錯誤。6(2017·石家莊期末)現(xiàn)提供可配制斐林試劑的溶液：甲液(0.1 g·mL 1 的 NaOH 溶液)、乙液(0.05 g·mL1 的 CuSO4 溶液)以及蒸餾水，如果充分利用上述試劑及必需的實驗用具，可靈活性地鑒別出下列哪些物質(zhì)()葡萄糖蔗糖胃蛋白酶RNAA只有C和B和D、和答案C解析葡萄糖是還原糖，可以用斐林試劑鑒定，所以用上述試劑可以檢測，正確；蔗糖是非還原糖，不能用斐林試劑鑒定，錯誤；胃蛋白酶是蛋白質(zhì)，可以用雙縮脲試劑鑒定，71可以用上述試劑鑒定，但使用時需要將斐林試劑的乙液稀釋為質(zhì)量分數(shù)為 0.01 g·mL，正確；以上試劑只能鑒定還原糖和蛋白質(zhì)，而不能鑒定 RNA，錯誤。貫徹全國農(nóng)村衛(wèi)生工作會議精神，掌握新形勢8