2013年高考生物：克隆技術(shù)考點(diǎn)匯總考點(diǎn)1  植物細(xì)胞工程 1（2012廣東理綜2,4分）培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)  是    (    )  A組織培養(yǎng)    B細(xì)胞雜交  C顯微注射    D核移植 2（2011江蘇單科，14，2分）關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯(cuò)  誤的是    (    )  A蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)  B體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體  C植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒  D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育 3（2011天津理綜8,14分）絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性  的高分子化合物，能與石油污水中的懸浮顆粒和有機(jī)物等形  成絮狀沉淀，起到凈化污水的作用。為進(jìn)一步提高對(duì)石油污  水的凈化效果，將絮凝性細(xì)菌和石油降解菌融合，構(gòu)建目的菌  株。其流程圖如下  據(jù)圖回答：  (1)溶菌酶的作用是_。  (2) PEG的作用是    一。  (3)經(jīng)處理后，在再生培養(yǎng)基上，未融合的A、B難以生長(zhǎng)。圖中AB融合菌能生長(zhǎng)和繁殖的原因是_。(4)目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有    一的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的AB融合菌，選擇效果最好的作為目的菌株。(5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果，將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，定時(shí)取發(fā)酵液，加入石油污水中；同時(shí)設(shè)置_    _為對(duì)照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后，分別測(cè)定上層水樣的石油濃度和COD值（COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高），計(jì)算石油去除率和COD去除率，結(jié)果如圖。  (6)目的菌的種群增長(zhǎng)曲線呈    型。在40。44小時(shí)，發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果最好，其原因是    。4（2010課標(biāo)40 ,15分）請(qǐng)回答：  (1)植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的_，繁殖種苗的速度_。離體的葉肉細(xì)胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說(shuō)明該葉肉細(xì)胞具有該植物的全部    一。  (2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時(shí)，需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其原因是避免    一的污染。  (3)微型繁殖過(guò)程中，適宜濃度的生長(zhǎng)素單獨(dú)使用可誘導(dǎo)試管苗_，而與    配比適宜時(shí)可促進(jìn)芽的增殖。若要抑制試管苗的生長(zhǎng)，促使愈傷組織產(chǎn)生和生長(zhǎng)，需要使用的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是    （脫落酸、2，4-D）。(4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時(shí)間后，單株鮮重和光合作用強(qiáng)度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強(qiáng)度的變化趨勢(shì)是，單株鮮重的變化趨勢(shì)是_。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物的量_    _（能、不能）滿足自身最佳生長(zhǎng)的需要。(5)據(jù)圖推測(cè)，若要在誘導(dǎo)試管苗生根的過(guò)程中提高其光合作用能力，應(yīng)    一（降低，增加）培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。 植物細(xì)胞工程答案 1A本題主要考查現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。由于植物分生組  織中病毒很少或沒(méi)有病毒，常用莖尖通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗；  細(xì)胞雜交通常用于培育雜種個(gè)體；顯微注射技術(shù)常用于基因工程，培  育轉(zhuǎn)基因生物；核移植技術(shù)常用于培養(yǎng)克隆動(dòng)物。故只有A選項(xiàng)符合  題意。2B克隆動(dòng)物是核移植工程的應(yīng)用；莖尖分生能力強(qiáng)，沒(méi)有病毒侵染，  以莖尖為外植體，通過(guò)植物組織培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒植株；導(dǎo)入目的基  因的受體細(xì)胞，需通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得早期胚胎，才能進(jìn)一步  培育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。3 答案(1)分解細(xì)胞壁(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合(3)兩親本失活  部位不同，融合后活性部位互補(bǔ)(4)石油  (5)不加發(fā)酵液的石油  污水(6)S此期間，目的菌及其產(chǎn)生的絮凝活性高分子化合物的  含量高   解析(1)絮凝性細(xì)菌與石油降解菌融合時(shí)，首先需要溶菌酶分解  細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體融合時(shí)，常用PEG誘導(dǎo)融合。  (3)兩種原生質(zhì)體A、B分別經(jīng)過(guò)熱處理和紫外線處理失活難以生長(zhǎng)，  但兩者失活部位不同，A、B融合后活性部位互補(bǔ)，故仍可在再生培養(yǎng)  基上生長(zhǎng)。(4)我們需要的目的菌株是既能分泌具有絮凝活性的化  合物，又能在含有石油的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(5)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究目的菌株  不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果時(shí)，實(shí)驗(yàn)變量是發(fā)酵液的有無(wú)，對(duì)照  組是不加發(fā)酵液的石油污水，實(shí)驗(yàn)組是添加發(fā)酵液的石油污水。  (6)據(jù)圖知，目的菌株呈“S”型增長(zhǎng)。40 44小時(shí)，目的菌株及其產(chǎn)生  的絮凝性高分子化合物的含量較高，發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果  最好。4 答案(1)遺傳特性快遺傳信息(2)微生物  (3)生根細(xì)胞分裂素2，4-D  (4)逐漸減小先增加后下降不能  (5)降低   解析(1)植物組織培養(yǎng)屬于無(wú)性繁殖，后代能夠保持親本的遺傳特  性。植物微型繁殖技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速繁殖。植物組織培養(yǎng)的原理是植  物細(xì)胞具有全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞，仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛  能。(2)植物組織培養(yǎng)接種和試管苗轉(zhuǎn)接過(guò)程中都需要無(wú)菌操作，以避  免微生物（雜菌）污染。(3)微型繁殖培養(yǎng)基中使用的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分  裂素比例不同，可以分別誘導(dǎo)根、芽的形成。使用高濃度的植物生長(zhǎng)素  類似物（如2，4-D）可以抑制試管苗的生長(zhǎng)。(4)(5)分析圖中曲線可  知：光合作用強(qiáng)度隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增大而下降，但單株鮮重的  變化趨勢(shì)是先增加后下降。培養(yǎng)基中不含蔗糖時(shí)，光合作用強(qiáng)度最大，  但由于該時(shí)期光合作用產(chǎn)生的有機(jī)物積累量較少，不能滿足自身最佳  生長(zhǎng)的需要。在蔗糖濃度為1%左右時(shí)，單株鮮重達(dá)到最大，此時(shí)有機(jī)  物的量能滿足自身最佳生長(zhǎng)需要?？键c(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞工程 1（2011上海單科15,2分）關(guān)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的難  易程度，下列表述正確的是    (    )  A乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞；胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞  B乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞；胚胎細(xì)胞易于脂肪細(xì)胞  C乳腺細(xì)胞易于乳腺癌細(xì)胞；脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞  D乳腺癌細(xì)胞易于乳腺細(xì)胞；脂肪細(xì)胞易于胚胎細(xì)胞 2（2010廣東理綜24，6分）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)  展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是（雙  選）    (    )  APCR技術(shù)-擴(kuò)增蛋白質(zhì)  B雜交瘤技術(shù)-制備單克隆抗體  C光學(xué)顯微鏡-觀察葉綠體的基粒  D花粉離體培養(yǎng)-培育單倍體植物 3（2010浙江理綜4,6分）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正  確的是    (    )   A培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞  B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變  C二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的 D惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng) 4（2009山東理綜，35,8分）人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為  RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：請(qǐng)回答：(1)過(guò)程代表的是一    。(2)過(guò)程構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用_和    兩種工具酶。(3)過(guò)程采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是    一，獲得的X是-O(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的    所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行_比較；或用圖中的    進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。 動(dòng)物細(xì)胞工程答案 1A哺乳動(dòng)物的乳腺細(xì)胞和脂肪細(xì)胞都是高度分化的細(xì)胞，體外培養(yǎng)  難度大，乳腺癌細(xì)胞能夠惡性增殖，容易進(jìn)行體外培養(yǎng)，胚胎細(xì)胞具有  很強(qiáng)的分裂增殖能力，容易進(jìn)行體外培養(yǎng)，故A正確。2BD本題主要考查技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用的匹配情況。A項(xiàng)，PCR技  術(shù)的應(yīng)用是擴(kuò)增基因，而不是蛋白質(zhì)；B項(xiàng)，雜交瘤技術(shù)的應(yīng)用是制備  單克隆抗體，雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體；C項(xiàng)，  葉綠體屬于顯微結(jié)構(gòu)，可用光學(xué)顯微鏡觀察，葉綠體中的基粒屬于亞  顯微結(jié)構(gòu)，則需電子顯微鏡才能觀察；D項(xiàng)，培育單倍體植物主要利用  的是花粉離體培養(yǎng)技術(shù)。3D由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞，A項(xiàng)錯(cuò)誤；克  隆培養(yǎng)法在培養(yǎng)時(shí)，由于所有子代細(xì)胞來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞，所以基  因型一般都相同，B項(xiàng)錯(cuò)誤；二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限  的，只有少數(shù)細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，才能無(wú)限增殖，C項(xiàng)錯(cuò)誤；惡性  細(xì)胞系的細(xì)胞具有癌變的特點(diǎn)，可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D項(xiàng)正確。4 答案(1)逆（反）轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶（限制性內(nèi)切酶、限制酶）DNA連接酶（注：兩空順序可顛倒）  (3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4)A蛋白核酸（基因）序列抗A蛋白的單克隆抗體 解析(1)以DNA為模板合成RNA的過(guò)程為轉(zhuǎn)錄，以RNA為模板合成DNA的過(guò)程為逆轉(zhuǎn)錄。圖中過(guò)程代表的是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程。(2)基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端或平末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。(3)過(guò)程是將瘤細(xì)胞與效應(yīng)B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程，獲得的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，其具備了瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖的特性和效應(yīng)B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。(4)本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì)，也可以利用單克隆抗體具備特異性，通過(guò)抗A蛋白的特異性單克隆抗體能否與已知病毒進(jìn)行特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在，進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。5