(統(tǒng)考版)高考生物二輪復習 課后限時集訓18 基因工程和細胞工程-人教版高三全冊生物試題
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1、.. 課后限時集訓(十八) 基因工程和細胞工程 (建議用時:40 分鐘) (教師用書獨具) 非選擇題 1.(2018·全國卷Ⅰ)回答下列問題: (1)博耶 (H.Boyer)和科恩 (S.Cohen)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質粒重組后導入大腸 桿 菌 細 胞 中 進 行 了 表 達 。 該 研 究 除 證 明 了 質 粒 可 以 作 為 載 體 外 , 還 證 明 了 ____________________(答出兩點即可)。 (2)體外重組的質粒可通過 Ca2+參與的________方法導入大腸桿菌細胞;而體外重組的噬
2、菌體 DNA 通常需與________組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體 DNA 導入宿主細胞。在細菌、心肌細胞、葉肉細胞中,可作為重組噬菌體宿主細胞的是________。 (3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細胞內表達時,表達出的蛋白質可能會被降解。 為防止蛋白質被降解,在實驗中應選用 __________________的大腸桿菌作為受體細胞,在蛋 白質純化的過程中應添加________的抑制劑。 [解析 ] (1)兩位科學家將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質粒重組后導入大腸桿菌細胞中 并進行了表達,因此,該研究可以證明:質???/p>
3、以作為載體、真核細胞的基因在原核細胞中 也可以表達(不同生物共用一套密碼子)、體外重組的質??梢赃M入受體細胞等。(2)目的基因 進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程稱為轉化,將質粒導入大腸桿菌 時,常用的轉化方法是用 Ca2+處理大腸桿菌細胞,使其處于感受態(tài)。噬菌體 DNA 沒有侵染能 力,體外重組的噬菌體 DNA 通常需與外殼蛋白組裝成完整噬菌體后才能完成侵染過程。噬菌 體多寄生在細菌中,但不能寄生在心肌細胞和葉肉細胞中。(3)若要使蛋白質不被降解,則大 腸桿菌體內不能存在蛋白酶,因此,實驗中應選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細胞。 同理
4、,在蛋白質純化過程中,也不能使蛋白質降解,因此,應添加蛋白酶抑制劑。 [答案] (1)體外重組的質??梢赃M入受體細胞;真核生物基因可在原核細胞中表達 (2) 轉化 外殼蛋白(或噬菌體蛋白) 細菌 (3)蛋白酶缺陷型 蛋白酶 2.大腸桿菌 β半乳糖苷酶 (Z 酶)可催化底物(Xgal)水解產生藍色物質。 在 pUC18 質粒 中,lacZ ′編碼 Z 酶氨基端的一個片段(稱為 α肽 ),該質粒結構及限制酶識別位點如圖甲所 示。已知 α肽、缺失 α肽的 Z 酶片段單獨存在時均無 Z 酶活性,共同存在時就會表現出 Z 酶活性。利用圖乙中的 DNA 片段與 pUC18 質粒進行
5、基因工程操作。 DOC 版. .. 甲 乙 (1)限制酶能催化雙鏈 DNA 分子中______________(填化學鍵名稱)的斷裂。本實驗可使用 限制酶______________處理 pUC18 質粒和圖乙中的 DNA 片段,再通過 DNA 連接酶連接,獲得 含目的基因的重組質粒。 (2)用重組質粒轉化大腸桿菌,然后將大腸桿菌接種到含氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上進行 培養(yǎng),由于未發(fā)生轉化的大腸桿菌沒有該質粒,因而不具有 ________,在該培養(yǎng)基上不能生 長。從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。 (3)當上
6、述培養(yǎng)基中含有 Xgal 時,生長出的菌落有藍色和白色兩種類型,其中含有重組 質粒的大腸桿菌的菌落顏色為 _____________,這是因為 _________________。為保證能通過 菌落顏色辨別出含有重組質粒的大腸桿菌,本實驗作為受體細胞的大腸桿菌中 Z 酶基因應滿 足的條件是_______________。 [解析] (1)限制酶能催化雙鏈 DNA 分子中磷酸二酯鍵的斷裂,將 DNA 降解。從圖中可知, 限制酶 HindⅢ可破壞目的基因,而質粒和目的基因兩側都有限制酶 SalⅠ識別位點,因此本 實驗可使用限制酶 SalⅠ處理 pUC18 質粒和圖乙中的 DNA
7、片段。 (2)重組質粒上有氨芐青霉素抗性基因,由于未發(fā)生轉化的大腸桿菌沒有該質粒,因而不 具有氨芐青霉素抗性,在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上不能生長。從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于選 擇培養(yǎng)基,選擇了含重組質粒的大腸桿菌。 (3)從圖中可知,重組質粒是用酶 SalⅠ分別處理過的質粒和目的基因片段形成的,重組 質粒的 lacZ′基因被破壞,不能合成 β半乳糖苷酶 (Z 酶),不能催化底物(Xgal)水解產生 藍色物質,故菌落呈白色。已知 α肽、缺失 α肽的 Z 酶片段單獨存在時均無 Z 酶活性,共 同存在時就會表現出 Z 酶活性,為保證能通過菌落顏色辨別出含有重組質粒的大腸桿菌
8、,本 實驗作為受體細胞的大腸桿菌中 Z 酶基因應滿足的條件是編碼 α肽的 DNA 序列缺失,其他序 列正常。 [答案] (1)磷酸二酯鍵 SalⅠ (2)氨芐青霉素抗性 選擇 (3)白色 目的基因與質 粒連接后使 lacZ′被破壞,不能合成 α肽 編碼 α肽的 DNA 序列缺失,其他序列正常 3.(2019·全國卷Ⅲ)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如圖所示。 切取潔凈的 對根段進 切取1 cm3左右?guī)в? → → → 胡蘿卜根段 行消毒 形成層的組織塊 DOC 版. .. ① ② ③ 接種
9、組 誘導組織塊形 誘導愈傷組織 → → 織塊 成愈傷組織 形成試管苗 ④ ⑤ ⑥ 回答下列問題。 (1)利用胡蘿卜根段進行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的 植株,這是因為植物細胞具有__________________。 (2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是__________________。 (3) 從 步 驟 ⑤ 到 步 驟 ⑥ 需 要 更 換 新 的 培 養(yǎng) 基 , 其 原 因 是 ________________________________________ 。 在 新 的 培 養(yǎng) 基 上 愈 傷 組 織 通
10、 過 細 胞 的 ________過程,最終可形成試管苗。 (4)步驟⑥要進行照光培養(yǎng),其作用是___________________。 (5) 經組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的 __________ ,這種繁殖方式屬于 ________繁殖。 [解析] (1)分化的植物細胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因為植物細胞具有全能性。(2) 在本實驗中,切取胡蘿卜塊時要切取含有形成層的部分,原因是形成層容易誘導形成愈傷組 織。 (3)決定植物細胞脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例,步驟⑤(誘導愈 傷組織形成 )和步驟⑥(誘導愈傷組織分化形成試管苗
11、) 所需的生長素和細胞分裂素的比例不 同,故從步驟⑤到步驟⑥需更換培養(yǎng)基。愈傷組織通過細胞的再分化過程形成試管苗。(4)步 驟⑥需要進行光照培養(yǎng),其作用是誘導葉綠素的形成,使試管苗能夠進行光合作用。(5)組織 培養(yǎng)沒有經過兩性生殖細胞的結合,因此屬于無性繁殖,組織培養(yǎng)得到的植株保持了原品種 的遺傳特性。 [答案] (1)全能性(或形成完整植株所需的全部基因) (2)形成層容易誘導形成愈傷組 織 (3)誘導愈傷組織形成和誘導愈傷組織分化形成試管苗所需的生長素和細胞分裂素的比 例不同 性 無性 分化 (或再分化) (4)誘導葉綠
12、素的形成,使試管苗能夠進行光合作用 (5)遺傳特 4.下表表示高等動植物親代個體產生新個體的 3 種不同途徑,請據表分析并回答問題: 生物 動植物 植物 DOC 版. 途徑 甲 乙 主要流程 親代個體→受精卵→胚→新個體 親代個體→體細胞→胚狀體→新個體 .. 動物 丙 親代個體→核移植細胞→早期胚胎→新個體 (1)甲、乙、丙途徑中屬于有性生殖的是________,三種途徑中由胚(胚狀體或早期胚胎) 發(fā)育成新個體都需要經過細胞的________________。 (
13、2)相比于甲,乙、丙途徑在應用上的優(yōu)點是__________________。乙途徑依據的原理是 ____________________________,動物一般采用丙而不采用乙途徑繁殖新個體的原因是 ________________________________________。 (3) 丙 途 徑 中 , 從 早 期 胚 胎 → 新 個 體 的 流 程 中 還 需 要 進 行 的 生 物 工 程 技 術 是 ______________________。該途徑獲得的新個體與供核的親代個體性狀不完全相同的原因是 _________________________。
14、 (4)若從乙、丙途徑獲得的新個體中各取一小塊組織進行體外培養(yǎng)。下列敘述錯誤的有 ________(填字母)。 a.前者需先用鹽酸解離,后者需先用胰蛋白酶處理 b.前者培養(yǎng)基中一般加入蔗糖,后者一般加入葡萄糖 c.前者培養(yǎng)過程需要持續(xù)光照,后者可在暗處培養(yǎng) d.兩者培養(yǎng)過程中均需要保證無菌條件防止雜菌污染 [解析] (1)分析題表可知:甲表示動植物正常有性生殖的過程;乙表示植物組織培養(yǎng)產 生新個體的過程,為無性繁殖;丙表示通過核移植產生新個體的方式,生殖方式為無性繁殖。 三種途徑中由胚(胚狀體或早期胚胎 )發(fā)育成新個體都需要經過細胞的分裂、分化才能完成
15、新 個體的發(fā)育過程。(2)相比于甲,乙、丙途徑在應用上的優(yōu)點是快速繁殖優(yōu)良品種。乙途徑為 植物組織培養(yǎng),該過程的原理是植物體細胞的全能性,由于高度分化的動物體細胞的全能性 受到限制,分化潛能弱,故動物繁殖新個體一般采用丙途徑。(3)丙途徑中,從早期胚胎→新 個體的流程中還需要進行的生物工程技術是胚胎移植。胚胎移植是動物細胞工程產生新個體 的最后一步,該途徑獲得的新個體的遺傳物質由供核親代的核基因和供質親代的質基因共同 組成,進而卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響,故新個體性狀與 供核親本不完全相同。(4)植物組織離體后直接進行組織培
16、養(yǎng)操作,不需先用鹽酸解離,后者 為動物細胞需先用胰蛋白酶處理,分散成單個細胞再進行培養(yǎng),a 錯誤;前者培養(yǎng)過程為植物 組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中一般加入蔗糖,后者為動物細胞培養(yǎng),培養(yǎng)液中一般加入葡萄糖,b 正確; 前者為植物組織培養(yǎng),前期不需要光,后期需要持續(xù)光照,后者為動物細胞培養(yǎng),可在適宜 條件下培養(yǎng),c 錯誤;兩者培養(yǎng)過程中均需要保證無菌條件,這是實驗成功的關鍵,d 正確。 [答案] (1)甲 分裂和分化(或分裂、分化、衰老、凋亡等) (2)快速繁殖優(yōu)良品種 植 物體細胞的全能性 DOC 版. 高度分化的動物體細胞的全能性受到限制,分化潛能弱 (3
17、)胚胎移植 .. 卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產生影響 (4)ac 5.(2020·山東等級考)水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉,直鏈淀粉所占比例越小糯性 越強。科研人員將能表達出基因編輯系統(tǒng)的 DNA 序列轉入水稻,實現了對直鏈淀粉合成酶基 因(Wx 基因)啟動子序列的定點編輯,從而獲得了 3 個突變品系。 (1)將能表達出基因編輯系統(tǒng)的 DNA 序列插入 Ti 質粒構建重組載體時,所需的酶是 ________________,重組載體進入水稻細胞并在細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程稱為________。 (2)根據啟動子的作用推測,Wx 基
18、因啟動子序列的改變影響了 ________________,從而 改變了 Wx 基因的轉錄水平。與野生型水稻相比,3 個突變品系中 Wx 基因控制合成的直鏈淀粉 合 成 酶 的 氨 基 酸 序 列 ________( 填 “ 發(fā) 生 ” 或 “ 不 發(fā) 生 ”) 改 變 , 原 因 是 ______________________________________。 (3)為檢測啟動子變化對 Wx 基因表達的影響,科研人員需要檢測 Wx 基因轉錄產生的 mRNA(Wx mRNA)的量。檢測時分別提取各品系胚乳中的總 RNA,經________過程獲得總 cDNA。 通 過 PC
19、R 技 術 可 在 總 cDNA 中 專 一 性 地 擴 增 出 Wx 基 因 的 cDNA , 原 因 是 ____________________________。 (4)各品系 Wx mRNA 量的檢測結果如圖所示,據圖推測糯性最強的品系為________,原因 是____________________________。 [解析] (1)限制性核酸內切酶能夠識別雙鏈 DNA 分子的某種特定核苷酸序列,并且使每 一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開;DNA 連接酶能將 DNA 片段拼接起來。 將能表達出基因編輯系統(tǒng)的 DNA 序列插入 Ti 質粒構
20、建重組載體時,需要限制性核酸內切酶和 DNA 連接酶的參與。轉化是指目的基因進入受體細胞內,并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的 過程。(2)啟動子是 RNA 聚合酶識別和結合的部位,能驅動基因轉錄出 mRNA。Wx 基因啟動子 序列的改變影響了 RNA 聚合酶與啟動子的識別和結合,從而改變了 Wx 基因的轉錄水平,使直 鏈淀粉合成酶基因的表達量改變。根據題干信息可知,基因編輯系統(tǒng)是對啟動子序列進行定 點編輯,由于編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動子,所以與野生型水稻相比,3 個突 變品系中 Wx 基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列沒有發(fā)生變化。(3)用提取的各品 系胚
21、乳中的總 RNA 合成總 cDNA 的過程為逆轉錄,需要逆轉錄酶的參與。由于引物能與 Wx 基 因的 cDNA 特異性結合,故通過 PCR 技術可在總 cDNA 中專一性地擴增出 Wx 基因的 cDNA。(4)mRNA DOC 版. .. 是蛋白質合成的直接模板,根據題圖分析可知,4 個品系中品系 3 的 Wx mRNA 量最低,控制合 成的直鏈淀粉合成酶最少,直鏈淀粉合成量最少,糯性最強。 [答案] (1)限制性核酸內切酶和 DNA 連接酶 轉化 (2)RNA 聚合酶與啟動子的識別和 結合 不發(fā)生 編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動子 (3)逆轉錄(或:反轉錄) 引 物是根據 Wx 基因的一段已知序列設計合成的(或:引物能與 Wx 基因的 cDNA 特異性結合) (4) 品系 3 品系 3 的 Wx mRNA 最少,控制合成的直鏈淀粉合成酶最少,直鏈淀粉合成量最少,糯 性最強 DOC 版.
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