四、加試非選擇題(3233題)專(zhuān)練加試特訓(xùn)1生物技術(shù)實(shí)踐(A)1尿素是一種高濃度氮肥且長(zhǎng)期施用沒(méi)有不良影響，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌的分解作用，才能被植物吸收利用。某同學(xué)要分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并嘗試進(jìn)行計(jì)數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚紅瓊脂0.12 g0.12 g15 mL0.025 g2.0 g0.25 mg0.5 g(1)分解尿素的細(xì)菌都能合成_，該種細(xì)菌在生態(tài)平衡中起到_的作用。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？_(填“能”或“不能”)，原因是_。(3)分離得到分解尿素的細(xì)菌后，如果要擴(kuò)大培養(yǎng)，則應(yīng)選擇_培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)一段時(shí)間后，使用_對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)過(guò)程中，下列哪種行為會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性_。A計(jì)數(shù)時(shí)直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)B如果方格內(nèi)微生物細(xì)胞數(shù)量多于300個(gè)，培養(yǎng)液先稀釋后再計(jì)數(shù)C如果微生物細(xì)胞有粘連，要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個(gè)細(xì)胞D壓在方格線(xiàn)上的細(xì)胞只計(jì)左線(xiàn)和上線(xiàn)上的細(xì)胞數(shù)答案(1)脲酶參與氮循環(huán)(或維持氮平衡)(2)不能瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物(3)液體血細(xì)胞計(jì)數(shù)板A解析分解尿素的細(xì)菌都能合成脲酶，因此可以選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基來(lái)分離尿素分解菌，并且用瓊脂糖來(lái)代替瓊脂作為微生物培養(yǎng)基的固化劑，這樣就使培養(yǎng)基中只含有尿素這一種含氮化合物，有利于對(duì)這種細(xì)菌的篩選。(1)含有脲酶的細(xì)菌將尿素降解為氨作為其生長(zhǎng)的氮源，從而也起到維持生物圈氮元素平衡的作用。(2)因?yàn)榄傊且环N未被純化的混合物，內(nèi)含一定量的含氮化合物，不利于目的菌的篩選，所以該培養(yǎng)基不能分離出分解尿素的細(xì)菌。(3)擴(kuò)大培養(yǎng)需要使用液體培養(yǎng)基，微生物的計(jì)數(shù)可以采用涂布分離法或利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行顯微計(jì)數(shù)，結(jié)合后續(xù)選項(xiàng)可以看出本題采用的是后者。計(jì)數(shù)過(guò)程需要注意操作規(guī)范，如A選項(xiàng)所述的操作會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性，計(jì)數(shù)前應(yīng)該把試管上下倒轉(zhuǎn)數(shù)次，使細(xì)菌分布均勻，再取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)。2某市葡萄種植基地為解決葡萄滯銷(xiāo)易腐爛問(wèn)題，引進(jìn)果酒、果醋生產(chǎn)線(xiàn)進(jìn)行葡萄的深加工，獲得了較好的效益，其生產(chǎn)流程如圖所示，據(jù)圖回答：(1)在篩選菌種A時(shí)，需要在接種前用_法對(duì)葡萄果汁進(jìn)行滅菌。(2)在純化菌種A時(shí)接種了5個(gè)平板，每個(gè)平板均接種了0.1 mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖，純化菌種A的接種方法是_，推測(cè)出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是_。(3)與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和_。(4)將葡萄加工成果汁時(shí)，為提高果汁的產(chǎn)量和品質(zhì)，應(yīng)加入適量的_酶，該酶能破壞植物細(xì)胞的_(填細(xì)胞結(jié)構(gòu))。答案(1)高壓蒸汽滅菌(2)涂布分離法涂布不均勻(3)細(xì)胞分裂素(4)果膠(果膠酶和纖維素)細(xì)胞壁解析(1)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。(2)分析圖乙中培養(yǎng)基培養(yǎng)結(jié)果，培養(yǎng)基中的菌落沒(méi)有呈線(xiàn)形分布，可以推知采用的純化方法是涂布分離法；由于菌落有聚集現(xiàn)象，可以推知平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻，導(dǎo)致菌落分布不均勻。(3)進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中常常添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。(4)果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等，它們能催化果膠的分解，水解植物細(xì)胞壁，從而使果汁變得澄清，提高產(chǎn)量和品質(zhì)。3(2017·浙江模擬)如圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)的基本流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)該實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基應(yīng)該含有_(多選)。A尿素B氯化鈉C葡萄糖D瓊脂糖(2)尿素溶液可用_使之無(wú)菌。若要檢查B過(guò)程滅菌是否徹底，可以采用的方法是_。(3)圖中步驟C為_(kāi)。相對(duì)于劃線(xiàn)分離法，過(guò)程D涂布分離法的優(yōu)點(diǎn)是_。(4)如果菌落周?chē)霈F(xiàn)_色環(huán)帶，說(shuō)明該菌落能分泌脲酶。答案(1)ABCD(2)G6玻璃砂漏斗過(guò)濾將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀(guān)察有無(wú)菌落出現(xiàn)(3)倒平板單菌落更易分開(kāi)(4)紅解析(1)分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)微生物，因此培養(yǎng)基中應(yīng)該加入有機(jī)碳源，如葡萄糖；分離分解尿素的細(xì)菌培養(yǎng)基從功能上分應(yīng)屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)該以尿素為唯一氮源；從物理性質(zhì)上分應(yīng)屬于固體培養(yǎng)基，因此應(yīng)加入凝固劑瓊脂糖。故選：ABCD。(2)尿素溶液可用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾使之無(wú)菌。若要檢查B過(guò)程滅菌是否徹底，可以采用的方法是將空白培養(yǎng)基放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀(guān)察有無(wú)菌落出現(xiàn)。(3)圖中步驟C為倒平板。相對(duì)于劃線(xiàn)分離法，過(guò)程D涂布分離法的優(yōu)點(diǎn)是單菌落更易分開(kāi)。(4)如果菌落周?chē)霈F(xiàn)紅色環(huán)帶，說(shuō)明該菌落能分泌脲酶，脲酶分解尿素產(chǎn)生氨，使pH升高，酚紅指示劑顏色發(fā)生變化。4多環(huán)芳烴菲在染料、殺蟲(chóng)劑等生產(chǎn)過(guò)程中被廣泛使用，是土壤、河水中常見(jiàn)的污染物之一。下圖表示科研人員從被石油污染的土壤中分離獲得能降解多環(huán)芳烴菲的菌株Q的主要步驟。請(qǐng)回答：(1)步驟的培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)液中加入多環(huán)芳烴菲作為唯一碳源，目的是_。(2)步驟的培養(yǎng)過(guò)程中，需將錐形瓶放在搖床上振蕩，一方面使菌株與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率；另一方面能_。(3)步驟用劃線(xiàn)分離法純化菌株Q的過(guò)程中，在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，原因是_。采用固體平板培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng)的目的是_。(4)接種環(huán)通過(guò)灼燒來(lái)滅菌，完成步驟中劃線(xiàn)操作，共需灼燒接種環(huán)_(A.4B5C6D7)次。(5)為了獲得分解多環(huán)芳烴菲能力更強(qiáng)的菌株，研究人員又對(duì)菌株Q進(jìn)行了誘變處理，得到突變株K。為了比較兩種菌株降解多環(huán)芳烴菲的能力，設(shè)計(jì)了下列實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)步驟：取9只錐形瓶均分成3組，編號(hào)A、B、C。向9只錐形瓶中分別加入_為唯一碳源的培養(yǎng)液。向A、B、C 3組培養(yǎng)液中分別加入_。28恒溫培養(yǎng)3天后，測(cè)定錐形瓶中多環(huán)芳烴菲的降解率。答案(1)篩選出菌株Q(2)增加培養(yǎng)液中的溶氧量(3)線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處少(或能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落)防止冷凝后形成水珠滴在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基(4)C(5)等量的多環(huán)芳烴菲等量的無(wú)菌水、菌株Q菌液和突變株K菌液5回答下列關(guān)于微生物和酶的問(wèn)題。高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過(guò)程如圖所示：(1)過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)，過(guò)程是為了_。(2)號(hào)培養(yǎng)基稱(chēng)為_(kāi)(按功能分)；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分_(A.瓊脂B葡萄糖C硝酸銨D碳酸氫鈉)。(3)一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，其中“高壓”是為了_。在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶作用的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線(xiàn)表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線(xiàn)。(4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是_(A.4050 B5060 C6070 D.7080 )。(5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_。A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B曲線(xiàn)35 數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80 時(shí)測(cè)得的C曲線(xiàn)表明80 是該酶活性最高的溫度D曲線(xiàn)表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降答案(1)稀釋分離純化嗜熱菌(2)選擇培養(yǎng)基C(3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢(4)C(5)A6(2017·臺(tái)州模擬)某研究小組欲用蘋(píng)果汁為原料，利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋，請(qǐng)分析回答：(1)將蘋(píng)果汁放入發(fā)酵瓶時(shí)，要預(yù)留約_的空間。為得到酒精和糖含量較高的果酒，可在果汁中加入一定比例的_。若發(fā)酵瓶?jī)?nèi)持續(xù)無(wú)氣泡產(chǎn)生，則需加入更多的_，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。(2)變酸的果酒表面有一層醋化醋桿菌形成的菌膜，若要在該菌膜中篩選出高表達(dá)量的醋化醋桿菌菌株，可通過(guò)獲得_的方法來(lái)分離篩選。若要統(tǒng)計(jì)獲得菌種的數(shù)目，則常采用_法。對(duì)獲得的優(yōu)質(zhì)醋化醋桿菌菌種常用劃線(xiàn)法接種在固體培養(yǎng)基_上低溫保存。(3)如圖是果酒和果醋的發(fā)酵裝置，關(guān)于果醋發(fā)酵敘述錯(cuò)誤的是_。A發(fā)酵前，瓶?jī)?nèi)酒水混合物的pH需調(diào)至7.0B發(fā)酵過(guò)程中，充氣口要適時(shí)適量充氣C發(fā)酵過(guò)程中，排氣口排出醋酸發(fā)酵產(chǎn)生的CO2D發(fā)酵完成后，出料口的pH值不再減少答案(1)1/3蔗糖酵母菌(2)單菌落涂布分離斜面(3)C解析(1)將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留大約1/3的空間，并封閉充氣口。為得到酒精和糖含量較高的果酒，可在果汁中加入一定比例的蔗糖。若發(fā)酵瓶?jī)?nèi)持續(xù)無(wú)氣泡產(chǎn)生，則需加入更多的酵母菌，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。(2)變酸的果酒表面有一層醋化醋桿菌形成的菌膜，若要在該菌膜中篩選高表達(dá)量的醋化醋桿菌菌株，可通過(guò)獲得單菌落的方法來(lái)分離篩選。接種微生物常用劃線(xiàn)分離法和涂布分離法，其中涂布分離法可以統(tǒng)計(jì)獲得菌種的數(shù)目。對(duì)獲得的優(yōu)質(zhì)醋化醋桿菌菌種常用劃線(xiàn)法接種在固體培養(yǎng)基斜面上低溫保存。(3)將酒水混合物pH調(diào)至7.0有利于醋化醋桿菌生長(zhǎng)與繁殖，縮短發(fā)酵時(shí)間，因此發(fā)酵前，瓶?jī)?nèi)酒水混合物的pH需調(diào)至7.0，A正確；醋化醋桿菌是嗜氧菌，因此發(fā)酵過(guò)程中，充氣口要適時(shí)適量充氣，B正確；醋化醋桿菌發(fā)酵不會(huì)產(chǎn)生二氧化碳，發(fā)酵過(guò)程中，排氣口排出含氧量較少的空氣，C錯(cuò)誤；發(fā)酵完成后，不會(huì)有醋酸再產(chǎn)生，因此出料口的pH值不再減少，D正確。7葡萄收獲的季節(jié)性較強(qiáng)，并且不易運(yùn)輸，易造成積壓，腐爛變質(zhì)。為了解決上述問(wèn)題且滿(mǎn)足不同人群的需求，可以將其加工制作成果汁、果酒、果醋等。圖1是簡(jiǎn)單的生產(chǎn)流程圖，結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題：圖1(1)果膠酶的使用過(guò)程中，需要對(duì)酶的活性、酶的用量進(jìn)行研究。在圖2甲、乙兩個(gè)曲線(xiàn)中，果膠酶活性受環(huán)境因素影響的變化曲線(xiàn)是_；乙曲線(xiàn)中縱軸還可以用_來(lái)表示。自變量X可以代表_；自變量Y可以代表_。圖2(2)果膠酶的最適用量是圖2中的_點(diǎn)對(duì)應(yīng)的量。(3)過(guò)程中不用滅菌一般也不會(huì)受到雜菌的污染，原因是_。(4)果酒和果醋的制作過(guò)程相比，從發(fā)酵條件來(lái)看，二者不同之處是_。A都需要氧氣B都不需要氧氣C前者需要氧氣，后者不需要氧氣D前者不需要氧氣，后者需要氧氣答案(1)甲過(guò)濾得到的果汁體積溫度、pH等果膠酶的濃度(或用量)(2)B(3)培養(yǎng)液中缺氧環(huán)境及酵母菌產(chǎn)生的乙醇能抑制絕大多數(shù)細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖(4)D解析(1)果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響，每一種酶的最適pH和最適溫度是一定的。衡量實(shí)驗(yàn)結(jié)果的指標(biāo)有兩種，一個(gè)是果汁的量，另一個(gè)是果汁的澄清度。(2)果膠酶的最適用量是過(guò)濾得到果汁澄清度最高時(shí)對(duì)應(yīng)的最小酶量，B點(diǎn)后酶量增加而澄清度不再增加，因此B點(diǎn)對(duì)應(yīng)的量為最適用量。(3)缺氧條件不利于大多數(shù)細(xì)菌的生存，同時(shí)乙醇有殺菌作用。(4)酒精發(fā)酵為厭氧發(fā)酵，醋酸發(fā)酵為需氧發(fā)酵。8請(qǐng)回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)、發(fā)酵過(guò)程中的相關(guān)問(wèn)題：(1)在“分離以尿素為氮源的微生物”的實(shí)驗(yàn)中，配制好的尿素固體培養(yǎng)基加上封口膜后用_方法滅菌，冷卻后加入用G6玻璃砂漏斗過(guò)濾的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需用適宜濃度的_浸泡，再用_沖洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)中，可以用_(A.50%的乙醇B70%的乙醇C90%的乙醇D95%的乙醇)鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或_中提取，配制這些微生物的培養(yǎng)基時(shí)需要將pH調(diào)至_。(3)在“用果汁制作果酒”實(shí)驗(yàn)中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的_。答案(1)高壓蒸汽滅菌HCl蒸餾水(2)D蘋(píng)果青霉中性偏酸(3)蔗糖解析(1)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。玻璃砂漏斗用后需用適宜濃度的HCl浸泡，再用蒸餾水沖洗，干燥后保存。(2)在“果汁中的果膠和果膠酶”實(shí)驗(yàn)中，可以用95%的乙醇鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或蘋(píng)果青霉中提??；黑曲霉或蘋(píng)果青霉都屬于真菌，配制真菌的培養(yǎng)基時(shí)需要將pH調(diào)至中性偏酸。(3)在“用果汁制作果酒”實(shí)驗(yàn)中，為了增加果酒的含糖量，可以在發(fā)酵瓶中加入一定量的蔗糖。