活頁作業(yè)(一)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用一、選擇題因為當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，而樣品稀釋度無論多高都很難使其中的細菌都單個分布于培養(yǎng)基上，故計數(shù)結(jié)果比實際值低。答案：B2用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時()可以用相同的培養(yǎng)基都需要使用接種針進行接種都需要在火焰旁進行接種都可以用來計數(shù)活菌ABC D解析：平板劃線法或稀釋涂布平板法都使用固體培養(yǎng)基，故正確；平板劃線法采用接種針進行操作，而稀釋涂布平板法采用涂布器進行操作，故錯誤；純化時，要進行無菌操作，需要在火焰旁接種，避免空氣中的微生物混入培養(yǎng)基，故正確；平板劃線法一般用于分離而不是計數(shù)，故錯誤。答案：C3細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精消毒、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌()A接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B高壓鍋、手、接種環(huán)C培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D接種環(huán)、手、高壓鍋答案：C4通過實驗測定土壤中的細菌數(shù)量，下列與此操作有關(guān)的敘述中，不正確的是()A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105倍的土壤稀釋液0.1 mL，分別涂布于各組平板上C將培養(yǎng)皿倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時D選擇菌落數(shù)在300個以上的培養(yǎng)皿進行計數(shù)解析：檢測土壤中細菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上，將實驗組和對照組平板倒置，37恒溫培養(yǎng)2448小時，在確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)。答案：D5(2013·赤峰質(zhì)檢)下表為某培養(yǎng)基的配方，有關(guān)敘述正確的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊紅美藍青霉素瓊脂蒸餾水含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1萬單位適量1 000 mLA.能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因B此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基C此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細菌含量是否符合飲用水標(biāo)準D此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中解析：此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基?？剐曰蛞话阄挥诖竽c桿菌的質(zhì)粒上，而不是擬核上；此培養(yǎng)基只能用來檢測自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標(biāo)準。答案：D6下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，不正確的是()A剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入B剛果紅可以在菌落形成后加入C剛果紅在菌落形成前倒平板時加入，加入的剛果紅不需要滅菌D在菌落形成后加入剛果紅時，剛果紅不需要滅菌答案：C二、非選擇題7(2013·南昌模擬)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實驗步驟如下圖所示。請分析回答問題。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂1.4 g2.1 g0.2 g10 g1 g15g將上述物質(zhì)溶解后，用自來水定容到1 000 mL(1)此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？_，理由是_。(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是_，這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的_和_，實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是_。(4)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用_(方法)接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(5)下列材料或用具中：培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；玻棒、試管、錐形瓶和吸管；實驗操作者的雙手。需要滅菌的是：_；需要消毒的是：_。(填序號)(6)在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。A同學(xué)的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有_(填序號)。由于土樣不同由于培養(yǎng)基污染由于操作失誤沒有設(shè)置對照(7)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_，細菌合成的_將尿素分解為氨，pH增高，使指示劑變紅色。解析：(1)微生物與植物生長所需的營養(yǎng)不完全相同，培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不能用于組織培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基中加入尿素作唯一氮源，分解尿素的微生物可生長，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(3)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自尿素和葡萄糖。實驗需要振蕩培養(yǎng)增加溶氧量。(4)在固體培養(yǎng)基上接種用稀釋涂布平板法或平板劃線法。(5)滅菌要徹底消滅微生物及其芽孢，如和。實驗操作者的雙手要消毒。(6)A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出的菌落數(shù)與其他組相比，原因可能是土樣不同，培養(yǎng)基污染，操作失誤等。與是否設(shè)置對照無關(guān)。(7)由于細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，故在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑將變紅。答案：(1)不能缺少植物激素(或缺少植物需要的各種營養(yǎng))(2)篩選目的菌選擇(3)尿素葡萄糖為目的菌提供氧氣(4)稀釋涂布平板法(平板劃線法)(5)(6)(7)酚紅指示劑脲酶8如圖為分離并統(tǒng)計分解纖維素的微生物的實驗流程，據(jù)此回答有關(guān)問題：(1)要從富含纖維素的環(huán)境中分離纖維素分解菌，從高溫?zé)崛袑ふ夷蜔峋?，這說明 _。(2)某同學(xué)根據(jù)需要，配制了纖維素分解菌的培養(yǎng)基如下，整個實驗過程嚴格執(zhí)行無菌操作。纖維素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO45 g 1 g 1.2 g 0.9 gMgSO4·7H2OKCl酵母膏、水解酪素 0.5 g0.5 g適量如果將其中的纖維素粉換成_，菌落數(shù)_，即可說明選擇培養(yǎng)基的作用。(3)接種微生物最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實驗宜采用_法，原因是 _ _。9纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素?；卮鹣铝袉栴}：(1)在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用_染色法，這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對纖維素分解菌進行篩選。甲同學(xué)在實驗時得到了如圖所示的結(jié)果，則纖維素分解菌位于()ABC D(2)乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計數(shù)，與分離醋酸菌相比，進行培養(yǎng)時除了營養(yǎng)不同外，最主要的實驗條件差別是_，該同學(xué)采用活菌計數(shù)法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目_。(3)丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過程中，為了抵制外界酸和堿對酶活性的影響，采取的措施是向提取液和分離液中添加_。若探究纖維素酶活性的最適溫度，如何設(shè)置對照？_。解析：(1)剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成，則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。(2)牛胃是一個厭氧的環(huán)境，所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同。因是活菌計數(shù)法，所以部分死亡菌無法計數(shù)。另外當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時平板上只觀察到一個菌落，所以偏小。(3)探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對照，其他無關(guān)變量要適宜。答案：(1)剛果紅A(2)保證無氧環(huán)境小(低)(3)緩沖溶液不同的溫度梯度之間相互對照10氯苯化合物是重要的有機化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如表1。2可知，SP1菌在_培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是_。解析：配制固體培養(yǎng)基時應(yīng)在液體培養(yǎng)基的成分中再加入瓊脂作為凝固劑。在配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH，后進行滅菌，防止滅菌后在調(diào)節(jié)pH的過程中污染培養(yǎng)基。據(jù)表可知，培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，包括碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子，適用于多種微生物的培養(yǎng)。培養(yǎng)基不加牛肉膏和蛋白胨，以硝酸銨為氮源，可以選擇出以硝酸銨為氮源的微生物，是選擇培養(yǎng)基。在營養(yǎng)缺乏、環(huán)境惡劣時，微生物可以形成休眠體芽孢，來度過不良環(huán)境。據(jù)圖2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件下菌體數(shù)最早達到最大值，即最早停止生長，原因是在培養(yǎng)基中，氯苯是唯一碳源，由于20 mg/L氯苯培養(yǎng)條件氮源最少，因此也最早被耗盡，使SP1菌停止生長。答案：(1)瓊脂(2)先調(diào)pH，后滅菌(3)通用選擇硝酸銨(4)芽孢(5)20 mg/L氯苯碳源最早耗盡6