2013年高考生物：微生物的應(yīng)用考點(diǎn)匯總 1（2012北京理綜5,6分）高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，在接種時(shí)不進(jìn)  行嚴(yán)格無(wú)菌操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大的一項(xiàng)是    (    )  A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中  B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上  C將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上  D將土壤浸出液涂布在無(wú)菌的選擇培養(yǎng)基上 2（2012山東基本能力55.1分）除了高溫加熱以外，其它滅菌  方法還有    (    )  A紫外線照射    B真空包裝  C用保鮮膜密閉    D添加防腐劑  (1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有_，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)    色環(huán)帶。  (2)下列對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是_滅菌。    A高壓蒸汽    B紫外燈照射C.70%酒精浸泡    D過(guò)濾  (3)步驟X表示    。在無(wú)菌條件下操作時(shí)，先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕?#160;   一到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得_菌落。  (4)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不倒置培養(yǎng)，將導(dǎo)致_。  (5)臨床上用“C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將“C標(biāo)記的    分解為NH3和“CO2。42012上海單科（四）10分回答下列關(guān)于微生物和酶的  問(wèn)題。(1)過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)，過(guò)程是為了_。(2)I號(hào)培養(yǎng)基稱(chēng)為_(kāi)（按功能分）；該培養(yǎng)基  中除了加入淀粉外，還需加入另一種重要的營(yíng)養(yǎng)成分  -O   A瓊脂    B葡萄糖  C硝酸銨  D碳酸氫鈉(3)-般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了    。    在高溫淀粉酶運(yùn)用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對(duì)該酶的最佳溫度范圍進(jìn)行測(cè)定。圖中的曲線表示酶在各種溫度下酶活性相對(duì)最高酶活性的百分比。將酶在不同溫度下保溫足夠長(zhǎng)的時(shí)間，再在酶活性最高的溫度下測(cè)其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，即圖中的曲線。 (4)根據(jù)圖中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是-0A40  - 50    B50  - 60 C60  - 70    D70 一80   (5)據(jù)圖判斷下列敘述錯(cuò)誤的是_。    A該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測(cè)出活性B曲線35數(shù)據(jù)點(diǎn)是在80時(shí)測(cè)得的C曲線表明80 是該酶活性最高的溫度D曲線表明該酶的熱穩(wěn)定性在70 之后急劇下降5（2011課標(biāo)，39 ,15分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原  油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤巾篩  選出能高效降解原油的菌株。回答問(wèn)題：  (1)在篩選過(guò)程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以    為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。  (2)純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即    和    。  (3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周?chē)纸馊Φ拇笮。纸馊Υ笳f(shuō)明該菌株的降解能力    。  (4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、    和    。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈    附近進(jìn)行，以避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染。6（2010山東理綜，34,8分）生物柴油是一種可再生的清潔能  源，其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類(lèi)對(duì)化石燃料的消耗。  科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇  反應(yīng)能夠合成生物柴油（如下圖）。 (1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易揮發(fā)，宜選用    、方法從油料作物中提取。(2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供_，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是_ 法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用    法直接計(jì)數(shù)；從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測(cè)_，以確定其應(yīng)用價(jià)值；為降低生物柴油生產(chǎn)成本，可利用技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。(4)若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的一技術(shù)。7（2009寧夏理綜40 ,15分）(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考  慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮_、一    和滲透壓等條  件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、  _  _、_  _等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)  材料。  (2)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行    （消毒、滅菌）；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和    ；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能    。  (3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。  (4)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的    一。  (5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。    對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_-O  (6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)    處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案：1C本題主要考查幾種常見(jiàn)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)對(duì)無(wú)菌操作的要求。生產(chǎn)果  酒和腐乳時(shí)對(duì)無(wú)菌的要求不是很高，接種不需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操  作；土壤浸出液中含有多種雜菌，所以利用選擇培養(yǎng)基篩選土壤浸出  液中特定微生物時(shí)，不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作也不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；植物  組織培養(yǎng)技術(shù)成功的關(guān)鍵是無(wú)菌條件，若接種時(shí)不進(jìn)行嚴(yán)格無(wú)菌操作  將可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，故C項(xiàng)符合題意。2A此題考查滅菌的方法。滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)  外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。本題中真空包裝、添加防腐劑、  用保鮮膜密閉都起到了抑菌作用，紫外線照射使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性，  核酸受破壞，是滅菌方法。3答案(1)脲酶紅  (2)D  (3)接種涂布單  (4)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)法形成單菌落  (5)尿素  解析此題考查微生物的分離與培養(yǎng)知識(shí)。(1)幽門(mén)螺桿菌(Hp)  含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培  養(yǎng)Hp，由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3，NH，能使培養(yǎng)基中  的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿  素加熱會(huì)分解，對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌最好用C6玻璃砂漏斗過(guò)濾。  (3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基一滅菌、倒平板一接種  一培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋?zhuān)缓髮⒕和?#160; 布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在  恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無(wú)法形成單菌落。(5)幽門(mén)螺桿菌  能將“C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14 CO：，故臨床上常用14C呼氣試驗(yàn)  檢測(cè)人體內(nèi)幽門(mén)螺桿菌的存在。4答案(1)稀釋單個(gè)菌落的篩選（或篩選）  (2)選擇培養(yǎng)基C  (3)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢  (4)C  (5)A  霉解析本題主要考查微生物培養(yǎng)及酶的相關(guān)知識(shí)。欲培養(yǎng)和分離  嗜熱菌單個(gè)菌落可采用稀釋涂布平板法；為稀釋過(guò)程，為篩選過(guò)  程；I號(hào)培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，加入硝酸銨的目的主要是補(bǔ)充氮元素；  高溫滅菌的目的是殺死包括細(xì)菌芽孢等在內(nèi)的全部生物；據(jù)圖可知，  工業(yè)生產(chǎn)中該酶的最佳溫度范圍為60qC -70C。5霉答案(1)原油選擇  (2)平板劃線法稀釋涂布平板法  (3)強(qiáng)  (4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰  霉解析(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株，  使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，通過(guò)控制碳源這  種營(yíng)養(yǎng)成分，來(lái)促進(jìn)能高效降解原油的菌株的生長(zhǎng)，抑制其他微生物  的生長(zhǎng)。(2)菌種純化培養(yǎng)時(shí)，常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法  接種。(3)當(dāng)固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出單菌落后，可通過(guò)比較菌落周?chē)纸?#160; 圈的大小，來(lái)判斷菌株降解原油能力的大小。一般來(lái)說(shuō)，分解圈越大  說(shuō)明該菌株的降解能力越強(qiáng)，反之則越弱。(4)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的  過(guò)程中，常用灼燒滅菌法對(duì)接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進(jìn)行滅菌；  用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基、試管等進(jìn)行滅菌；用于熱滅菌法對(duì)玻璃  器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈  火焰旁進(jìn)行，因?yàn)榫凭珶艋鹧媾钥尚纬梢粋€(gè)無(wú)菌環(huán)境，可防止微生物  的污染。6裙答案(1)壓榨萃取（注：兩空順序無(wú)先后）  (2)碳源高壓蒸汽滅菌  (3)顯微鏡直接計(jì)數(shù)酶活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化細(xì)  胞）  (4) PCR（或：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）  醵解析(1)因?yàn)橹参镉筒灰讚]發(fā)，不能選用蒸餾法，可以用壓榨法、  萃取法從油料作物中提取。(2)微生物的生長(zhǎng)需要水、碳源、氮源和  無(wú)機(jī)鹽等，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供碳源。分析  灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌等實(shí)驗(yàn)室常用滅菌方法的特點(diǎn)可  知，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是高壓蒸汽滅菌法。(3)測(cè)定培養(yǎng)液  中微生物的數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法直接計(jì)數(shù)。提取的脂肪酶  在應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)之前，要先檢測(cè)其活性，以確定其應(yīng)用價(jià)值。固  定化酶技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)酶的反復(fù)利用，降低了生產(chǎn)成本。(4)在應(yīng)用  PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)，DNA合成（延伸）時(shí)溫度要控制在72aC，  需要具有較強(qiáng)的耐熱性的DNA聚合酶催化。7露答案(1)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短  (2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)  (3)比例合適  (4)鑒定（或分類(lèi)）  (5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基  上是否有菌落產(chǎn)生  (6)滅菌  罐解析(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類(lèi)型容易選擇、易  培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮  溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物  體內(nèi)外所有的微生物，所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒是用較  為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害  的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變  性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列  的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的  表而，進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。(4)對(duì)獲得的純菌種  還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。  （5、培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固  體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放  置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。(6)因?yàn)橛械拇竽c桿  菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的  培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的  擴(kuò)散。