薄層色譜中展開(kāi)劑的選擇2007-04-05 02:03（一）有機(jī)合成中展開(kāi)劑的選擇 做有機(jī)合成時(shí)走板子是常有的事，展開(kāi)劑的選擇就至關(guān)重要了。選擇適當(dāng)?shù)恼归_(kāi)劑是首要任務(wù).一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用單一溶劑，往往不能達(dá)到很好的分離效果，往往使用混合溶劑通常使用一個(gè)高極性和低級(jí)性溶劑組成的混合溶劑，高極性的溶劑還有增加區(qū)分度的作用，展開(kāi)劑的比例要靠嘗試.一般根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類(lèi)化合物用什么樣的展開(kāi)劑，就首先嘗試使用該類(lèi)展開(kāi)劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好的展開(kāi)劑。展開(kāi)劑的選擇條件：對(duì)的所需成分有良好的溶解性；可使成分間分開(kāi)；待測(cè)組分的Rf在0.20.8之間，定量測(cè)定在0.30.5之間；不與待測(cè)組分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；沸點(diǎn)適中，黏度較??；展開(kāi)后組分斑點(diǎn)圓且集中；混合溶劑最好用新鮮配制。 一般來(lái)說(shuō)，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入甲醇、乙醇，乙酸乙酯來(lái)調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于生物堿、黃酮、萜類(lèi)等的分離；中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來(lái)調(diào)節(jié)，適合于蒽醌、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和萜類(lèi)的分離；強(qiáng)極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來(lái)調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類(lèi)化合物的分離。很多時(shí)候,展開(kāi)劑的選擇要靠自己不斷變換展開(kāi)劑的組成來(lái)達(dá)到最佳效果。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中，為了實(shí)現(xiàn)一個(gè)配體與其他雜質(zhì)有效分離，曾經(jīng)嘗試了很多種的溶劑組合，最后才找到石油醚EtOAcHCOOH（5.5：3.5：0.1）混合溶劑。一般把兩種溶劑混合時(shí),采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑,如果有分開(kāi)的跡象,再調(diào)整比例（或者加入第三種溶劑）,達(dá)到最佳效果；如果沒(méi)有分開(kāi)的跡象（斑點(diǎn)較“拖”），最好是換溶劑。對(duì)于在硅膠中這種酸性物質(zhì)上易分解的物質(zhì)，在展開(kāi)劑里往往加一點(diǎn)點(diǎn)三乙胺，氨水，吡啶等堿性物質(zhì)來(lái)中和硅膠的酸性。（選擇所添加的堿性物質(zhì)，還必須考慮容易從產(chǎn)品中除去，氨水無(wú)疑是較好的選擇。）分離效果的好壞和所用硅膠和溶劑的質(zhì)量很有關(guān)系：不同廠家生產(chǎn)的硅膠可能含水量以及顆粒的粗細(xì)程度，酸性強(qiáng)弱不同，從而導(dǎo)致產(chǎn)品在某個(gè)廠家的硅膠中分離效果很好，但在另一個(gè)廠家的就不行。溶劑的含水量和雜質(zhì)含量對(duì)分離效果都有明顯的影響。溫度，濕度對(duì)分離效果影響也很明顯，在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)有時(shí)同一展開(kāi)條件，上下午的Rf截然不同 。 展開(kāi)劑的選擇主要根據(jù)樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來(lái)考慮，在進(jìn)行薄層層析時(shí)，首先應(yīng)該知道未知化學(xué)成分的類(lèi)型，其極性的大致歸屬，從提取液或從色譜柱的流動(dòng)相極性可知，另外某樣品里含多種化學(xué)成分先按極性不同大致分，然后細(xì)分，對(duì)于分離未知的化學(xué)物質(zhì)，展開(kāi)劑的選擇也是一個(gè)摸索的過(guò)程，不應(yīng)該僅僅從展開(kāi)劑考慮，多因素綜合衡量！溶劑：層析過(guò)程中溶劑的選擇，對(duì)組分分離關(guān)系極大。在柱層析時(shí)所用的溶劑（單一劑或混合溶劑）習(xí)慣上稱(chēng)洗脫劑，用于薄層或紙層析時(shí)常稱(chēng)展開(kāi)劑。洗脫劑的選擇，須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來(lái)加以考慮在用極性吸附劑進(jìn)行層析時(shí)，當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)，一般選用弱極性溶劑為洗脫劑；被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。在柱層操作時(shí)，被分離樣品在加樣時(shí)可采用于法，亦可選一適宜的溶劑將樣品溶解后加入。溶解樣品的溶劑應(yīng)選擇極性較小的，以便被分離的成分可以被吸附。然后漸增大溶劑的極性。這種極性的增大是一個(gè)十分緩慢的過(guò)程，稱(chēng)為“梯度洗脫”，使吸附在層析柱上的各個(gè)成分逐個(gè)被洗脫。如果極性增大過(guò)訣（梯度太大），就不能獲得滿(mǎn)意的分離。溶劑的洗脫能力，有時(shí)可以用溶劑的介電常數(shù)（）來(lái)表示。介電常數(shù)高，洗脫能力就大。以上的洗脫順序僅適用于極性吸附劑，如硅膠、氧化鋁。對(duì)非極性吸附劑，如活性炭，則正好與上述順序相反，在水或親水住溶劑中所形成的吸附作用，較在脂溶性溶劑中為強(qiáng)。 被分離物質(zhì)的性質(zhì)被分離的物質(zhì)與吸附劑，洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析中的三個(gè)要素，彼此緊密相連。在指定的吸附劑與洗脫劑的條件下，各個(gè)成分的分離情況，直接與被分離物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有關(guān)。對(duì)極性吸附劑而言，成分的極性大，吸附住強(qiáng)。當(dāng)然，中草藥成分的整體分子觀是重要的，例如極性基團(tuán)的數(shù)目愈多，被吸附的住能就會(huì)更大些，在同系物中碳原子數(shù)目少些，被吸附也會(huì)強(qiáng)些?？傊?，只要兩個(gè)成分在結(jié)構(gòu)上存在差別，就有可能分離，關(guān)鍵在于條件的選擇。要根據(jù)被分離物質(zhì)的性質(zhì)，吸附劑的吸附強(qiáng)度，與溶劑的性質(zhì)這三者的相互關(guān)系來(lái)考慮。首先要考慮被分離物質(zhì)的極性。如被分離物質(zhì)極性很小為不含氧的萜烯，或雖含氧但非極性基團(tuán)，則需選用吸附性較強(qiáng)的吸附劑，并用弱極性溶劑如石油醚或苯進(jìn)行洗脫。但多數(shù)中藥成分的極性較大，則需要選擇吸附性能較弱的吸附劑（一般級(jí)）。采用的洗脫劑極性應(yīng)由小到大按某一梯度遞增，或可應(yīng)用薄層層析以判斷被分離物在某種溶劑系統(tǒng)中的分離情況。此外，能否獲得滿(mǎn)意的分離，還與選擇的溶劑梯度有很大關(guān)系。現(xiàn)以實(shí)例說(shuō)明吸附層析中吸附劑、洗脫劑與樣品極性之間的關(guān)系。如有多組分的混合物，象植物油脂系由烷烴、烯烴、舀醇酯類(lèi)、甘油三酸醋和脂肪酸等組份。如對(duì)于C-27甾體皂甙元類(lèi)成分，能因其分字中羥基數(shù)目的多少而獲得分離：將混合皂甙元溶于含有5氯仿的苯中，加于氧化鋁的吸附柱上，采用以下的溶劑進(jìn)行梯度洗脫。如改用吸附性較弱的硅酸鎂以替代氧化鋁，由于硅酸鎂的吸附性較弱，洗脫劑的極牲需相應(yīng)降低，亦即采用苯或含5氯仿的苯，即可將一元羥基皂甙元從吸附劑上洗脫下來(lái)。這一例子說(shuō)明，同樣的中草藥成分在不同的吸附劑中層析時(shí)，需用不同的溶劑才能達(dá)到相同的分離效果，從而說(shuō)明吸附劑、溶劑和欲分離成分三者的相互關(guān)系。 （二）簿層層析：薄層層析是一種簡(jiǎn)便、快速、微量的層析方法。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上，形成一薄層進(jìn)行層析時(shí)一即稱(chēng)薄層層析。其原理與柱層析基本相似。 1薄層層析的特點(diǎn)：薄層層析在應(yīng)用與操作方面的特點(diǎn)與柱層析的比較。 2吸附劑的選擇：薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區(qū)別在于薄層層析要求吸附劑（支持劑）的粒度更細(xì)，一般應(yīng)小于250目，并要求粒度均勻。用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度不宜過(guò)高，以級(jí)為宜。而展開(kāi)距離則隨薄層的粒度粗細(xì)而定，薄層粒度越細(xì)，展開(kāi)距離相應(yīng)縮短，一般不超過(guò)10厘米，否則可引起色譜擴(kuò)散影響分離效果。 3展開(kāi)劑的選擇：薄層層析，當(dāng)吸附劑活度為一定值時(shí)（如或級(jí)），對(duì)多組分的樣品能否獲得滿(mǎn)意的分離，決定于展開(kāi)劑的選擇。中草藥化學(xué)成分在脂溶性成分中，大致可按其極性不同而分為無(wú)極性、弱極性、中極性與強(qiáng)極性。但在實(shí)際工作中，經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小，對(duì)展開(kāi)劑的極性予以調(diào)整。實(shí)例談薄層色譜展開(kāi)劑選擇2007/12/08 12:18 P.M.實(shí)例談薄層色譜展開(kāi)劑選擇     根據(jù)本人的幾年薄層層析經(jīng)驗(yàn)，參考藥典等國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)和有關(guān)文獻(xiàn)，將 2000版藥典一部里部分有代表性的對(duì)照品的薄層層實(shí)例按展開(kāi)劑極性排序，并對(duì)其規(guī)律做一些分析。以下的分析和介紹是總體描述性的，目的是快速、簡(jiǎn)便地選擇展開(kāi)劑。如果想了解展開(kāi)劑選擇的各種理論，請(qǐng)參考其他專(zhuān)著。 #TfaMVM E     選擇展開(kāi)劑，要依據(jù)溶劑極性和他們的混溶性，溶劑對(duì)被分析物的溶解性，以及被分析物的結(jié)構(gòu)。這里只討論藥典里通常使用的以硅膠為固定相主體的正相薄層，也不考慮板的活性。   列出溶劑極性參數(shù)表，方便以下比較展開(kāi)劑。環(huán)已烷 :-0.2、石油醚（類(lèi)，3060）、石油醚（類(lèi)，6090）、正已烷:0.0、甲苯:2.4、二甲苯:2.5、苯:2.7、二氯甲烷:3.1、異丙醇:3.9、正丁醇:3.9、四氫呋喃:4.0、氯仿:4.1、乙醇:4.3、乙酸乙酯:4.4、甲醇:5.1、丙酮:5.1、乙腈:5.8、乙酸:6.0、水:10.2 1 。    關(guān)于溶劑混溶性，一般根據(jù)相似相溶原則，需要注意，極性相差大的不混溶，比如正己烷與甲醇。多元展開(kāi)劑，主體的兩種溶劑不能混溶，就需要通過(guò)第三種溶劑來(lái)調(diào)和。比如：石油醚、正庚烷、正已烷、戊烷、環(huán)已烷和甲醇、水之類(lèi)的。      一般正相色譜，固定相為極性，被分析物質(zhì)的極性越大，需要極性更大的展開(kāi)劑。    了解被分析物的極性可以通過(guò)分析其結(jié)構(gòu)獲得，很難獲得它的極性指數(shù)。物質(zhì)分子化學(xué)結(jié)構(gòu)中，通常由較極性部分和非極性部分兩部分。例如下面以苯丙烷為極性小部分，隨著極性基團(tuán)部分的增加，總體的極性就增加，展開(kāi)劑極性也增加了。      ， 依次為肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、綠原酸。   相應(yīng)展開(kāi)劑分別為：正己烷乙醚冰醋酸 (5:5:0.1)、苯冰醋酸甲醇(30:1:3)、氯仿甲醇甲酸（9:1: 0.5）、石油醚乙酸乙酯甲酸（3:6: 1）、醋酸丁酯甲酸水(7:2.5:2.5)。（由于薄層板、比移值不同的原因，展開(kāi)劑極性比較是相對(duì)的，并非絕對(duì)的后者大于前者）。     現(xiàn)在最重要的問(wèn)題是，不同化合物，怎么定它的極性，又用什么標(biāo)準(zhǔn)來(lái)定它對(duì)應(yīng)的展開(kāi)劑呢？以下分開(kāi)討論不同化合物極性情況及其對(duì)應(yīng)的展開(kāi)劑。    首先是極性較小的揮發(fā)性物質(zhì)。比如：冰片：石油醚 (3060)醋酸乙酯(17:3)、厚樸酚：苯醋酸乙酯(9:1.5)、-香附酮：苯醋酯乙酯冰醋酸(92:5:5)、丹皮酚：環(huán)己烷醋酸乙酯(3:1)，這類(lèi)化合物，以石油醚、正構(gòu)烷和苯為體積百分?jǐn)?shù)比較大的溶劑，通常起溶解和分離化合物的作用，而用醋酸乙酯為調(diào)節(jié)Rf（比移值）的溶劑。為了減少拖尾之類(lèi)其他相似相溶原則以外的影響，適當(dāng)加入添加劑，如有機(jī)酸或者有機(jī)堿。      極性較小的不揮發(fā)性物質(zhì)。比如： -谷甾醇：環(huán)己烷醋酸乙酯甲醇(6:2.5:1)或者環(huán)己烷丙酮(5:2) 、熊果酸：甲苯醋酸乙酯冰醋酸(12:4:0.5)、齊墩果酸：氯仿甲醇(40:1)、豬去氧膽酸：氯仿乙醚冰醋酸(2:2:1)、大黃素：苯醋酸乙酯甲醇(15:2:0.2)或者苯乙醇 (8:1)、丹參酮A：苯-醋酸乙酯-甲酸(40:25:4) 、穿心蓮內(nèi)酯：氯仿-無(wú)水乙醇(9:1)、靛玉紅、靛藍(lán)氯仿乙醇(9:1)或者苯氯仿丙酮(5:4:1)。這類(lèi)物質(zhì)展開(kāi)劑極性比極性較小的揮發(fā)性物質(zhì)洗脫力強(qiáng)一些，因?yàn)檫@類(lèi)物質(zhì)極性小的母核大，而極性大的基團(tuán)通?？梢孕纬蓺滏I，比如羧酸、羥基。以上物質(zhì)，母核分子量減小、母核結(jié)構(gòu)中不飽和健的增加（尤其是出現(xiàn)苯環(huán)），極性基團(tuán)的增加，都使極性增加，展開(kāi)劑極性也增大。這個(gè)范圍內(nèi)的物質(zhì)很多，一般展開(kāi)劑大百分?jǐn)?shù)的溶劑可以從環(huán)己烷甲苯二甲苯苯氯仿的順序，按照極性要求選擇。這里注意，異丙醇、正丁醇極性指數(shù)也比較小，在這范圍的化合物很少用，因?yàn)檎承源?、展開(kāi)慢，造成斑點(diǎn)擴(kuò)散；另外，羥基的氫鍵作用力也有不利。調(diào)節(jié)Rf值的溶劑，從醋酸乙酯甲醇丙酮乙醇。揮發(fā)性物質(zhì)也有很多帶羰基、羥基的，但從它的揮發(fā)性就可以明白，分子間作用力不強(qiáng)，另外，母核與石油醚、正構(gòu)烷和苯的結(jié)構(gòu)差異小，估計(jì)更容易脫離硅膠吸附，更快進(jìn)入溶劑中，而不需要通過(guò)提高展開(kāi)劑的極性。    皂苷類(lèi)。人參皂苷：氯仿甲醇水 (65:35:10)10以下放置的下層溶液或正丁醇醋酸乙酯水(4:1:5)的上層溶液或氯仿醋酸乙酯甲醇水(15:40:22:10)10以下放置的下層溶液、芍藥苷：氯仿醋酸乙酯甲醇甲酸(40:5:10:0.2)、黃芩苷：醋酸乙酯丁酮醋酸水(10:7:5:3)、橙皮苷：苯醋酸乙酯甲酸水(1:12:2.5:3)的上層溶液、葛根素：氯仿甲醇水(14:5:0.5)、蘆?。捍姿嵋阴ゼ姿崴?8:1:1)。這類(lèi)物質(zhì)，由于存在糖的多羥基結(jié)構(gòu)，苷元的結(jié)構(gòu)影響變小。展開(kāi)劑中使用極性大的有機(jī)溶劑（氯仿、醋酸乙酯、甲醇、正丁醇）和水。乙酸和甲酸的使用，一方面增大展開(kāi)劑極性，另外也可以抑制硅膠羥基的作用，減少拖尾。由于混溶性和硅膠耐酸能力的限制，水和酸的使用是有限度的。      極性大的小分子有機(jī)酸。沒(méi)食子酸：氯仿醋酸乙酯甲酸 (5:4:1)、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、綠原酸、異綠原酸。這類(lèi)物質(zhì)多數(shù)是苯乙烯母核的，這個(gè)結(jié)構(gòu)的極性本身比較大，另外有酚羥基和羧酸基團(tuán)，個(gè)別有多羥基配基。皂苷的展開(kāi)劑差不多，極性大。注意甲酸通常指的是濃度85%左右的，含有水。      含氮有機(jī)物。鹽酸小檗堿：苯醋酸乙酯甲醇異丙醇濃氨試液(12：6：3：3：0.6)(氨蒸氣飽和) 或正丁醇冰醋酸-水(7:1:2)、麻黃堿：氯仿甲醇濃氨試液(20:5:0.5)或正丁醇冰醋酸水(8:2:1)、甘草酸銨：醋酸乙酯甲酸冰醋酸水(15:1:1:2)。由于NH2硅醇基的作用很強(qiáng)，在強(qiáng)極性展開(kāi)劑加有機(jī)酸、有機(jī)堿掃尾。對(duì)于極性化合物，使用正丁醇對(duì)斑點(diǎn)擴(kuò)散影響較小，因?yàn)榛衔锖凸枘z的作用強(qiáng)。 D B#kvL:     進(jìn)行薄層分析基本可以根據(jù)母核、基團(tuán)，選擇相似的化合物對(duì)號(hào)入座。當(dāng)然，具體的條件優(yōu)化則需要根據(jù)實(shí)際情況了。遇到較困難的分離，需要使用到設(shè)計(jì)優(yōu)化方法的，已經(jīng)不屬于本文討論范圍了。關(guān)于展開(kāi)劑：分離的樣品酸性比較大，一般在展開(kāi)劑中加酸加甲酸是因?yàn)樵摌悠肥撬嵝缘?，加酸的量和該物質(zhì)的酸性成正比關(guān)系，加水可能是因?yàn)槟愕臉悠肥擒疹?lèi)的用酸水做一下緩沖，目的就是讓斑點(diǎn)圓滑，不脫尾，展距良好。飽和也非常重要，邊緣效應(yīng)很?chē)?yán)重的不妨用下端浸在展開(kāi)劑中的濾紙貼在展開(kāi)缸的內(nèi)壁，這樣飽和效果會(huì)好一些1)在層析缸口涂適量凡士林，增加密封性；2)以展開(kāi)劑邊緣效應(yīng)的大小，確定展開(kāi)劑平衡時(shí)間的長(zhǎng)短，一般平衡時(shí)間在30分鐘即可。有機(jī)溶劑的極性，甲醇>氯仿，因此在氯仿：甲醇：氨水 （10:1:0.6）這個(gè)展開(kāi)劑中，如果極性略大，可適當(dāng)降低甲醇比例；如極性太小，可適當(dāng)增大甲醇比例。氯仿：甲醇：氨水 10:1:0.6 和20：2：1.2 極性肯定是相同的，這有問(wèn)題嗎？另外還有一個(gè)問(wèn)題，這個(gè)展開(kāi)劑中，甲醇用量較小，而甲醇又易揮發(fā)，容易產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，要特別注意展開(kāi)劑的平衡和層析缸的密封。不同的展開(kāi)系統(tǒng)意思是其中至少應(yīng)該有一種溶劑不同（最好是不同分類(lèi)組的溶劑），而不是比例不同。或者使用不同的固定相。關(guān)于展開(kāi)：TLC中樣品拖尾現(xiàn)象是什么原因?該如何解決?2.TLC中樣品跑成幾乎為一條線,斑點(diǎn)沒(méi)有清晰的分離,想請(qǐng)教一下這是什么原因造成的?一般情況下該如何解決?造成問(wèn)題1的原因基本相同：a、對(duì)于一些具有酸堿性的化學(xué)成分，在溶液中部分電離，事實(shí)上展開(kāi)時(shí)存在分子、離子兩種狀態(tài)，以中性的有機(jī)試劑展開(kāi)必然會(huì)出現(xiàn)兩種層析行為，造成脫尾甚至是一條線。b、展開(kāi)劑選擇不當(dāng)c、點(diǎn)樣量過(guò)大，樣品超載解決辦法：a、在展開(kāi)劑中加幾滴甲酸或冰醋酸；b、展開(kāi)時(shí)以氨水飽和c、減少點(diǎn)樣量d、參考文獻(xiàn)，調(diào)整展開(kāi)劑種類(lèi)、比例我想問(wèn)問(wèn)，關(guān)于TLC二次展開(kāi)，是在第一次展開(kāi)顯色后再在繼續(xù)第二次展開(kāi)，還是在第一次展開(kāi)后，換另一種展開(kāi)劑接著展開(kāi)啊？請(qǐng)哪位大俠指點(diǎn)一下關(guān)于TLC的二次展開(kāi)。二次展開(kāi)是依據(jù)樣品定的，但肯定要在第一次展開(kāi)后，將板晾干或吹干，再放入另一種展開(kāi)劑中展開(kāi)，有的樣品二次展開(kāi)還要換展開(kāi)方向，和原方向垂直。所以要以實(shí)際分離樣品需要而定。一般是因?yàn)闃悠烦煞侄啵瑯O性差別有的大，有的關(guān)于顯色：在工作中研究過(guò)用硫酸乙醇顯色作定量分析的品種，但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，后改用不加CMC輔的水板來(lái)作，就不會(huì)有烘糊現(xiàn)象，故也可推論CMC易于與硫酸起糊化反應(yīng)。感覺(jué)輔水板關(guān)鍵是硅膠G與水的比例要達(dá)1：3.5左右，而且研磨后要盡快涂布，不能易于凝固而難于涂布，我是百思不得其解，難道CMC還有類(lèi)似穩(wěn)定劑的作用2. “0.5%的板加熱時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)黑”，是在層析完，顯色后吧，我也遇到過(guò)同樣的情況，這只有嚴(yán)格控制加熱顯色的時(shí)間。這個(gè)問(wèn)題應(yīng)該是這樣回答：但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是溫度高于100度時(shí)，若改用不加CMC輔的水板來(lái)作，就不會(huì)有烘糊現(xiàn)象，但不加CMC輔的板又太軟，點(diǎn)樣時(shí)容易點(diǎn)出洞，有個(gè)好辦法是將CMC的濃度調(diào)至0.1%，這樣就不易烘黑的。不信你試試，我們這邊藥檢所都這樣做的3. 關(guān)于薄層板加熱變黑的問(wèn)題，其實(shí)很容易解決：當(dāng)噴完顯色劑后不用在放烘箱里烘了，可以用電吹風(fēng)在板子背面吹吹就能顯色了我們實(shí)驗(yàn)室里一般都采用此法，簡(jiǎn)便、快潔如果一非想使用烘箱烘的話(huà)，一定要用帶玻璃窗的，當(dāng)看到顯色了就取出，不然不好控制顯色時(shí)間，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，容易碳化變黑4各位樓主真是經(jīng)驗(yàn)豐富，我鋪的0.5%的板加熱時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)黑，有什么好著嗎？根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，薄層版變黑與CMCNa的濃度過(guò)大有關(guān)，如果你留意的話(huà)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)顯色劑中有濃硫酸時(shí)，加熱時(shí)間稍長(zhǎng)就會(huì)變黑（其他顯色劑是沒(méi)事的），我老師說(shuō)這是因?yàn)闈饬蛩岚袰MCNa炭化了，其實(shí)color=blue=這種情況你只要適當(dāng)降低CMC-Na的濃度/color就可以了，當(dāng)然如果不加CMC-Na的話(huà)容易把板弄破。一般我都是顯色后用電吹風(fēng)吹的，要均勻吹，電吹風(fēng)離板的距離要遠(yuǎn)些，防止部分會(huì)黑。另還要注意顯色劑，如果顯色劑中含有硫酸，加熱時(shí)間一定要掌握好，不可太長(zhǎng)。5CP2000中277頁(yè)蘇氨酸的TLC的其它氨基酸檢查似乎有問(wèn)題: .以"正丁醇丁酮濃氨溶液水"為展開(kāi)劑, 展開(kāi)后,晾干,噴以茚三酮的丙酮溶液(1-50),.茚三酮與濃氨溶液起顯色反應(yīng), 弄得整塊板都有色,茚三酮氧化蘇氨酸后再與釋放出的氨氣起反應(yīng)生成的點(diǎn)在整塊板中尚能看到,其它氨基酸就別想看了.   氨基酸類(lèi)的薄層鑒別過(guò)程中，顯色前先將展完的板子在烘箱內(nèi)烘一段時(shí)間，從而確保展開(kāi)劑揮干凈，效果不錯(cuò)關(guān)于裂板：板子會(huì)裂口，一則可能是因?yàn)楣枘z的比例太大，二則可能是，板子要在常溫下晾干后，再在烘箱中活化。如果鋪完不久就在較高溫度下，裂口的幾率就比較高的?！傲栏傻陌遄臃旁诤嫦淅镌趺慈蚜?，有什么方法可以避免板子炸裂。” 你的板沒(méi)有完全干透，表面看是干了，但是最中間的沒(méi)有干，所以你直接放入105度的烘箱烘，當(dāng)然會(huì)炸裂了，所以應(yīng)該先用低溫大約40度左右烘30分鐘左右，再用105度活化，就可以解決這個(gè)問(wèn)題了。關(guān)于活化出現(xiàn)裂板、爆板的問(wèn)題。我從沒(méi)有遇上過(guò)?；罨沂沁@樣處理不要等到溫度達(dá)到100度，而是設(shè)好溫度后就將板子放在干燥箱，然后再通電加熱，達(dá)到最高溫度后停留5分鐘左右即可。這樣水分是慢慢由內(nèi)而外散發(fā)，而不是由外向內(nèi)散發(fā)，避免了表面成膜，里面還在散發(fā)水氣，豈有不裂、不爆的道理！。關(guān)于點(diǎn)樣：1. 點(diǎn)樣我本人沒(méi)有什么技巧，導(dǎo)師教了我一招挺好用，寫(xiě)出來(lái)大家分享，就是在點(diǎn)樣時(shí)食指放在點(diǎn)樣管的上端，當(dāng)點(diǎn)樣管的下端與硅膠板接觸的瞬間輕輕松動(dòng)上端的食指，溶液自然從點(diǎn)樣管出來(lái)，迅速提起點(diǎn)樣管，就這樣反復(fù)操作點(diǎn)出的斑點(diǎn)既小又均勻。但要提出樣品溶液不能太濃，濃度太大，點(diǎn)下的樣品不能被硅膠很好的吸收，不利于分離。2. 關(guān)于點(diǎn)樣，我上學(xué)的時(shí)候，老師用比較便宜的進(jìn)樣器（大約10幾塊錢(qián)吧，10l即可），將針尖打磨圓滑，老師好像是用銼一點(diǎn)一點(diǎn)銼的，這樣點(diǎn)樣的時(shí)候樣品溶液不容易沿針尖上行（甲醇溶液都這樣），并且針尖不會(huì)刺破已經(jīng)鋪好的薄層板。現(xiàn)在，我和師兄都是實(shí)行的這個(gè)辦法，還是比較實(shí)用的，點(diǎn)樣量可以精確到0.5µl。當(dāng)然，點(diǎn)樣的時(shí)候手不能抖動(dòng)，動(dòng)作要輕，這些要領(lǐng)在于意會(huì)，逐漸鍛煉，相信你會(huì)體會(huì)到其中的快感。3. 要磨平微量進(jìn)樣器的針尖，簡(jiǎn)單的方法就是，在展缸的蓋子上輕磨（當(dāng)然是靠近中間部分），就很快能解決問(wèn)題 ，且很平滑。薄層色譜小知識(shí)1、 怎樣提高點(diǎn)樣效率?    點(diǎn)樣是造成TLC定量誤差的主要來(lái)源。實(shí)驗(yàn)證明：定量毛細(xì)管更適合較小體積的點(diǎn)樣；微量注射器更適合較大體積的點(diǎn)樣。這主要是因?yàn)槲⒘孔⑸淦魇苄馀?、溶液回爬現(xiàn)象的影響較大。為避免不同定量毛細(xì)管間的點(diǎn)樣誤差、建議一塊薄層板上最好用同一只定量毛細(xì)管。但應(yīng)注意更換樣品時(shí)，應(yīng)將毛細(xì)管用超聲波或不同極性溶劑清洗干凈。在制備樣品時(shí)，溶樣溶劑黏度不能過(guò)高，以便于點(diǎn)樣；溶劑沸點(diǎn)過(guò)低則進(jìn)樣體積易變，過(guò)高則會(huì)改變展開(kāi)劑組成；對(duì)樣品溶解度過(guò)高會(huì)使樣點(diǎn)發(fā)生空心現(xiàn)象；常用的溶劑為甲醇、乙醇、丙酮。經(jīng)典TLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑3mm點(diǎn)間距1-2cm 底邊距1.5cm；HPLC樣點(diǎn)原點(diǎn)一般為直徑1mm點(diǎn)間距5mm 底邊距1cm。   2、展開(kāi)劑的選擇     TLC與HPLC相比，一個(gè)突出的優(yōu)點(diǎn)就是流動(dòng)相的選擇具有更大的靈活性。流動(dòng)相的選擇的目的是使絕大部分樣品的RF值位于0.1-0.7之間并達(dá)到較好的分離，與此對(duì)應(yīng)的是流動(dòng)相要有適當(dāng)?shù)膹?qiáng)度和組成。流動(dòng)相強(qiáng)度越大，溶質(zhì)RF值越大，但很可能降低分離能力；另外單一溶劑很難分離較復(fù)雜的混合物，根據(jù)相似相溶原理，要使用多元溶劑體系。一般展開(kāi)劑體系選擇如下：根據(jù)分離樣品性質(zhì)、薄層色譜板性質(zhì)選擇一個(gè)二元溶劑體系，通過(guò)調(diào)節(jié)溶劑比例以尋求適合RF值，適合的RF值找到后，再尋求極性參數(shù)相同的二元溶劑體系兩個(gè)，以這三個(gè)組成為三點(diǎn)組成一個(gè)三角形，則可看到：三角形頂點(diǎn)是二元體系，邊是三元體系，三角形內(nèi)是四元體系，并且極性一致，可根據(jù)幾何原理得出任一點(diǎn)組成。這種方法較為直觀，也較簡(jiǎn)單。   3、TLC的通用顯色方法     理想的顯色希望靈敏度高、斑點(diǎn)顏色穩(wěn)定、斑點(diǎn)與背景間的對(duì)比度好、斑點(diǎn)的大小及顏色的深度與物質(zhì)的量成正比。在樣品組成并不完全已知的情況下，通用顯色方法顯得成尤為重要。通用顯色法主要有：   （1）、紫外照射法：方便，不破壞樣品；   （2）、碘蒸氣法：通用性強(qiáng)，與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨(dú)使用；   （3）、熒光試劑：制造熒光背景，使原來(lái)紫外下無(wú)熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì)更明顯；   （4）、硫酸溶液：對(duì)絕大多數(shù)有機(jī)物有效，但有破壞性。· 展開(kāi)劑 PE(60-90)EtAc/PE=1:2EtAc/PE/AcOH=15:5:1EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:1:1:18年來(lái)我用這四種體系,沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)什么問(wèn)題.我一直在用的是乙酸乙酯：環(huán)已烷，不斷調(diào)節(jié)比例，直到有滿(mǎn)意的Rf值，有拖尾時(shí)可能要加酸或堿，我一般乙酸和三乙胺。我用了好幾年了，都還好。不妨一試！極性小的用+/系統(tǒng)極性較大的用甲醇：氯仿系統(tǒng)極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統(tǒng)拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸甲醇：氯仿對(duì)于胺類(lèi)比較好 氯仿：甲醇9：1是比較常用的方法我常用的展開(kāi)劑有：氯仿/甲醇；環(huán)已烷/丙酮；醋酸乙酯/石油醚；甲醇/吡啶/水酸用BTOH：HAc：H2O=2：1：1 很好用的。二氯甲烷：甲醇，調(diào)節(jié)不同的配比基本解決大多數(shù)問(wèn)題根據(jù)化合物的極性選擇合適的展開(kāi)劑，極性大的可滴加少量水，酸堿化合物會(huì)拖尾，酸性化合物可在展開(kāi)劑中加少量乙酸，堿性的加少量三乙胺，會(huì)減少拖尾。前面的一些帖子中提到在分離堿性化合物時(shí)可以在展開(kāi)劑中加入少量三乙胺，這樣確實(shí)會(huì)達(dá)到分離效果，但在柱層析時(shí)需要注意，當(dāng)你的洗脫劑含有二氯甲烷或氯仿時(shí)經(jīng)常會(huì)分到三乙胺的鹽酸鹽，因?yàn)橐话愕亩燃淄榛蚵确轮卸己猩倭康柠}酸，三乙胺的鹽酸鹽為無(wú)色針狀結(jié)晶，很漂亮，經(jīng)常會(huì)誤以為是分到的單體。切忌！  9教學(xué)d