第一篇專題十二教材基礎(chǔ)實驗考點(diǎn)33觀察類實驗和鑒定提取類實驗直擊考綱能獨(dú)立完成“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實驗，包括理解實驗?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用。靜悟提綱核心點(diǎn)撥欄目索引題組特訓(xùn)1.觀察類實驗操作流程模板觀察類實驗操作流程模板靜悟提綱2.鑒定類實驗的操作流程模板鑒定類實驗的操作流程模板1.觀察類實驗觀察類實驗核心點(diǎn)撥實驗名稱細(xì)胞的狀態(tài)觀察對象染色劑生物材料(及特殊要求)觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布死細(xì)胞DNA和RNA的分布吡羅紅甲基綠染色劑人的口腔上皮細(xì)胞DNA、RNA同時存在時染色劑要混合使用且現(xiàn)配現(xiàn)用觀察線粒體活細(xì)胞線粒體健那綠染液用生理鹽水配制健那綠染液，用顯微鏡觀察觀察細(xì)胞的減數(shù)分裂死細(xì)胞染色體無(為固定裝片)蝗蟲精母細(xì)胞低溫誘導(dǎo)染色體加倍死細(xì)胞改良苯酚品紅染液洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞染色前需漂洗干凈觀察細(xì)胞的有絲分裂死細(xì)胞龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞活或死細(xì)胞細(xì)胞無(無需染色)酵母菌細(xì)胞、水綿細(xì)胞、葉的保衛(wèi)細(xì)胞、魚的紅細(xì)胞等觀察葉綠體活細(xì)胞葉綠體蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻葉)觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原活細(xì)胞紫色中央液泡的大小和原生質(zhì)層的位置紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞2.鑒定提取類實驗鑒定提取類實驗實驗名稱試劑顏色生物材料備注淀粉的鑒定碘液藍(lán)色脫色的葉片等若材料有顏色，需先脫色還原糖的鑒定斐林試劑磚紅色沉淀蘋果或梨勻漿等現(xiàn)配現(xiàn)用、水浴加熱脂肪的鑒定蘇丹(或)染液橘黃(或紅)色花生種子切片(或勻漿)需用高倍鏡觀察(勻漿不需用高倍鏡觀察)蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑紫色豆?jié){、稀蛋清等先加A液，后加B液，搖勻使用綠葉中色素的提取和分離提取液：無水乙醇；分離液：層析液胡蘿卜素：橙黃色；葉黃素：黃色；葉綠素a：藍(lán)綠色；葉綠素b：黃綠色新鮮的綠葉(如菠菜葉)加入二氧化硅是為了研磨得更充分；碳酸鈣可防止在研磨中色素被破壞DNA的粗提取和鑒定二苯胺試劑藍(lán)色雞血細(xì)胞等沸水浴加熱5 min3.關(guān)注洋蔥在實驗中的關(guān)注洋蔥在實驗中的“一材多用一材多用”取材部位實驗名稱取材原因葉鱗片葉植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原外表皮細(xì)胞含紫色大液泡使用高倍顯微鏡觀察細(xì)胞的多樣性細(xì)胞較大，外表皮細(xì)胞有大液泡，內(nèi)表皮細(xì)胞有明顯的細(xì)胞核觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布內(nèi)表皮細(xì)胞近于無色管狀葉葉綠體中色素的提取和分離 根觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂材料易得，且分生區(qū)細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，染色體數(shù)目少，易于觀察低溫誘導(dǎo)植物染色體數(shù)目的變化材料易得，且低溫(4)下根尖也能分裂生長，誘導(dǎo)染色體變異率較高4.辨析有關(guān)顏色反應(yīng)類實驗的五種顏色辨析有關(guān)顏色反應(yīng)類實驗的五種顏色顏色原理紅還原糖斐林試劑 磚紅色沉淀脂肪蘇丹染液紅色RNA吡羅紅溶液紅色染色體(質(zhì))醋酸洋紅液紅色黃脂肪蘇丹染液橘黃色葉綠體中色素分離的濾紙條中：胡蘿卜素橙黃色，葉黃素黃色綠DNA甲基綠染液綠色線粒體健那綠染液藍(lán)綠色酒精橙色的重鉻酸鉀溶液 灰綠色葉綠體中色素分離的濾紙條中：葉綠素b黃綠色，葉綠素a藍(lán)綠色藍(lán)淀粉碘液藍(lán)色DNA二苯胺試劑 藍(lán)色紫染色體(質(zhì))龍膽紫溶液紫色蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色5.常用試劑的種類及作用常用試劑的種類及作用試劑體積分?jǐn)?shù)或質(zhì)量濃度作用原理相關(guān)實驗酒精50%洗去浮色(溶劑)脂肪的鑒定70%消毒微生物的培養(yǎng)95%解離觀察細(xì)胞的有絲分裂；低溫誘導(dǎo)染色體加倍100%溶解、提取色素葉綠體色素的提取和分離鹽酸5%營造酸性環(huán)境探究pH對酶活性的影響8%改變細(xì)胞膜通透性，使染色質(zhì)中DNA與蛋白質(zhì)分離觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布15%解離觀察細(xì)胞的有絲分裂；低溫誘導(dǎo)染色體加倍NaOH0.1 g/mL斐林試劑、雙縮脲試劑的成分檢測還原糖、蛋白質(zhì)5%營造堿性環(huán)境探究pH對酶活性的影響0.1%遇酚酞呈紫紅色探究細(xì)胞表面積與體積的關(guān)系CuSO40.05 g/mL斐林試劑的成分檢測還原糖0.01 g/mL雙縮脲試劑的成分檢測蛋白質(zhì)6.常見疑難辨析常見疑難辨析(1)在觀察類實驗中低倍鏡和高倍鏡的使用情況如何？除觀察類實驗外，還有什么實驗中也用到了顯微鏡呢？提示提示觀察類實驗中除了“觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原”使用低倍鏡即可外，其余均需要使用高倍顯微鏡；還有“脂肪的切片法定”“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”也用到了顯微鏡。(2)“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”實驗中能否選用哺乳動物的成熟紅細(xì)胞？為什么？提示提示不能。因為哺乳動物的成熟紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，幾乎不含有DNA和RNA。(3)能否用觀察葉綠體的材料來觀察線粒體？為什么？提示提示不能。因為葉綠體中的色素的顏色會掩蓋線粒體被健那綠染色后的顏色變化。(4)在“觀察細(xì)胞的有絲分裂”實驗中為什么應(yīng)注意觀察呈正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞？提示提示呈正方形的根尖分生區(qū)細(xì)胞分裂旺盛，而呈長方形的細(xì)胞可能是伸長區(qū)或成熟區(qū)的細(xì)胞，沒有分裂能力。(5)在觀察減數(shù)分裂實驗中為什么不宜選擇動物的卵巢或植物的雌蕊？提示提示因為雄配子的產(chǎn)生數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于雌配子，更易觀察到減數(shù)分裂。(6)選用菠菜葉觀察葉綠體時，為什么要取稍帶些葉肉細(xì)胞的下表皮？提示提示因為靠近下表皮的葉肉細(xì)胞中的葉綠體較大而數(shù)目較少。(7)為什么應(yīng)選取成熟的植物細(xì)胞觀察質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗？提示提示因其含有中央大液泡，易于發(fā)生質(zhì)壁分離與復(fù)原的實驗現(xiàn)象。(8)斐林試劑能否用于蛋白質(zhì)的鑒定？為什么？提示提示不能，因為用于蛋白質(zhì)鑒定的雙縮脲試劑B液是0.01 g/mL的CuSO4溶液，兩種試劑的本質(zhì)不同。斐林試劑的本質(zhì)是新制的Cu(OH)2，故應(yīng)將甲液和乙液等量混勻后使用，而雙縮脲試劑的本質(zhì)是堿性條件下的Cu2，故應(yīng)先加A液1 mL造成堿性環(huán)境，再加B液4滴搖勻使用。(9)脂肪的鑒定是否一定要借助顯微鏡？提示提示不一定，因為脂肪的鑒定有兩個方案，可磨碎后在試管內(nèi)鑒定，肉眼觀察即可，也可做切片借助顯微鏡觀察。(10)綠葉中色素的提取和分離有何區(qū)別？提示提示前者用無水乙醇提取法，原理是色素能夠溶于有機(jī)溶劑無水乙醇中；而后者用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，溶解度高的色素隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散得快，反之?dāng)U散得慢。題組一觀察類實驗題組一觀察類實驗1.(2018濱海新區(qū)模擬)洋蔥是常用的生物學(xué)實驗材料。下列有關(guān)實驗中不能達(dá)到預(yù)期目的的是A.用洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮作實驗材料，觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布B.用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離C.用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，觀察細(xì)胞中的線粒體D.用洋蔥根尖作為實驗材料，觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細(xì)胞123456答案解析題組特訓(xùn)解析解析洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮有細(xì)胞核，無紫色的大液泡，不影響顏色，可以作實驗材料，觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布，A正確；紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，觀察原生質(zhì)層的變化較容易，可以作為實驗材料，觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離，B正確；觀察細(xì)胞中的線粒體，需要染色，紫色洋蔥鱗片葉外表皮含有紫色的大液泡，影響觀察效果，故觀察細(xì)胞中的線粒體不能用紫色洋蔥鱗片葉外表皮作為實驗材料，C錯誤；洋蔥根尖具有分生組織，能進(jìn)行細(xì)胞分裂，可以作為觀察染色體數(shù)目發(fā)生改變的細(xì)胞的實驗材料，D正確。123456答案解析1234562.(2018榆林一模)下列用顯微鏡觀察的實驗中，細(xì)胞不需要染色的是A.觀察DNA和RNA在口腔上皮細(xì)胞中的分布B.觀察口腔上皮細(xì)胞中的線粒體C.觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂D.觀察洋蔥表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原解析解析觀察DNA和RNA在口腔上皮細(xì)胞中的分布，需要用吡羅紅甲基綠染色劑染色，A錯誤；觀察口腔上皮細(xì)胞中的線粒體，需要用健那綠染液染色，B錯誤；觀察洋蔥根尖細(xì)胞的有絲分裂，需要用龍膽紫溶液或者醋酸洋紅液使得染色體著色，C錯誤；觀察洋蔥表皮細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原，由于洋蔥表皮細(xì)胞的液泡有色素，因此不需要染色，可直接觀察，D正確。1234563.(2018保定期末)只有在保持細(xì)胞活性的條件下，才能顯示細(xì)胞中某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的實驗是A.蘇丹染色觀察花生種子子葉細(xì)胞中的脂肪B.健那綠染色觀察動物細(xì)胞的線粒體C.龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的有絲分裂D.用甲基綠、吡羅紅染液染色觀察動物細(xì)胞中的DNA和RNA的分布答案解析123456解析解析觀察花生子葉中脂肪時，無需保持細(xì)胞活性，A錯誤；健那綠是活性染料，因此只有在保持細(xì)胞活性的條件下才能觀察到線粒體被染成藍(lán)綠色，B正確；觀察細(xì)胞有絲分裂實驗，解離時已經(jīng)用鹽酸和酒精將細(xì)胞殺死，C錯誤；觀察DNA和RNA在細(xì)胞內(nèi)的分布實驗中，已經(jīng)用鹽酸將細(xì)胞殺死，使細(xì)胞膜喪失選擇透過性，D錯誤。123456題組二鑒定提取類實驗題組二鑒定提取類實驗4.(2018廣東模擬)下列有關(guān)組織細(xì)胞中化合物鑒定實驗的敘述，正確的是A.蛋白酶和蛋白質(zhì)的混合溶液中加入雙縮脲試劑后，會產(chǎn)生紫色反應(yīng)B.將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)無色，水浴加熱后有磚紅色沉 淀生成C.觀察DNA與RNA在細(xì)胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于DNA與吡 羅紅結(jié)合D.酵母菌進(jìn)行有氧呼吸和無氧呼吸的產(chǎn)物都能用酸性重鉻酸鉀溶液來鑒定123456答案解析解析解析蛋白酶本身就是蛋白質(zhì)，因此用雙縮脲試劑鑒定會產(chǎn)生紫色反應(yīng)，A正確；斐林試劑本身具有藍(lán)色，因此將斐林試劑加入果糖溶液中后，溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，B錯誤；觀察DNA與RNA在細(xì)胞中分布的實驗中，用鹽酸處理有利于DNA與甲基綠結(jié)合，C錯誤；酸性重鉻酸鉀溶液只能用于鑒定酒精，酵母菌有氧呼吸不產(chǎn)生酒精，D錯誤。1234565.(2018旌陽區(qū)校級模擬)以下關(guān)于實驗步驟的敘述(試劑、藥品的濃度和用量符合要求)，正確的是A.鑒定蛋白質(zhì)：豆?jié){CuSO4溶液NaOH溶液觀察顏色變化B.鑒定還原糖：蘋果勻漿CuSO4溶液NaOH溶液水浴加熱觀察顏 色變化C.提取綠葉中的色素：剪碎綠葉SiO2CaCO3無水乙醇研磨過濾D.觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布：制片解離漂洗染色顯微鏡 觀察答案解析123456解析解析蛋白質(zhì)的鑒定應(yīng)先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液，A錯誤；用斐林試劑鑒定還原糖時，應(yīng)將NaOH溶液和CuSO4溶液等量混合使用，B錯誤；提取綠葉中的色素的流程為剪碎綠葉SiO2CaCO3無水乙醇研磨過濾，C正確；觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布：取口腔上皮細(xì)胞涂片烘干水解沖洗涂片染色觀察，D錯誤。1234566.(2017石家莊期末)現(xiàn)提供可配制斐林試劑的溶液：甲液(0.1 gmL1的NaOH溶液)、乙液(0.05 gmL1的CuSO4溶液)以及蒸餾水，如果充分利用上述試劑及必需的實驗用具，可靈活性地鑒別出下列哪些物質(zhì)葡萄糖蔗糖胃蛋白酶RNAA.只有 B.和C.和 D.、和123456答案解析解析解析葡萄糖是還原糖，可以用斐林試劑鑒定，所以用上述試劑可以檢測，正確；蔗糖是非還原糖，不能用斐林試劑鑒定，錯誤；胃蛋白酶是蛋白質(zhì)，可以用雙縮脲試劑鑒定，可以用上述試劑鑒定，但使用時需要將斐林試劑的乙液稀釋為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01 gmL1，正確；以上試劑只能鑒定還原糖和蛋白質(zhì)，而不能鑒定RNA，錯誤。123456