免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀以及臨床應(yīng)用ppt課件
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免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀 以及臨床應(yīng)用,1,主要內(nèi)容,病理概述 病理科主要研究方法 免疫組化臨床應(yīng)用 免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀,2,病理概述,診斷病理學(xué)(diagnostic pathology):即外科病理學(xué)、人體病理學(xué),是病理學(xué)一分支,指臨床上由于診斷和治療的需要,對(duì)取自病人活體內(nèi)的病變組織、細(xì)胞,進(jìn)行病理診斷的一門(mén)醫(yī)療實(shí)踐科學(xué)。 研究對(duì)象:患者病變組織、細(xì)胞 研究目的:確診和治療疾病、提供判定療效和預(yù)后信息 研究方法:組織切片、細(xì)胞涂片 應(yīng)用技術(shù):HE、IHC、ISH、CISH、FISH…… 發(fā)展歷史:150年歷史,國(guó)內(nèi)不到100年歷史。,3,與傳統(tǒng)IVD的區(qū)別,研究對(duì)象不同 血液,尿液等 VS 細(xì)胞和組織 取材過(guò)程不同 病理通常通過(guò)手術(shù)方式獲取樣本 結(jié)果判斷方法不同 病理不能通過(guò)機(jī)器直接得到標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果,4,主要內(nèi)容,病理概述 病理科主要研究方法 免疫組化臨床應(yīng)用 免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀,5,H.E.染色: 蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。 蘇木精染液為堿性 ,使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色。 伊紅為酸性染料 ,使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。 HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。,6,免疫組化 免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry),IHC;基本原理—抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。 主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理切片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。 在常規(guī)腫瘤病理診斷中,有時(shí)單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷,需要IHC進(jìn)行確診。 免疫組化具有特異性強(qiáng)、敏感性高、定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合等特點(diǎn)。,7,原位雜交 (in situ hybridization, ISH) 是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過(guò)程。 原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。 按標(biāo)記類型可分為DNA-DNA,DNA-RNA,RNA-RNA,熒光原位雜交技術(shù)(fluorescence in situ hybridization, FISH) 將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報(bào)告分子如生物素、地高辛,可利用該報(bào)告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng),經(jīng)熒光檢測(cè)體系在鏡下對(duì)待測(cè)DNA進(jìn)行定性、定量或相對(duì)定位分析。,8,9,特殊染色 為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過(guò)程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)、病變及病原體等,需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行染色。 包括:膠原纖維染色(Masson等)、網(wǎng)狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色(磷鎢酸蘇木素)、脂肪染色(蘇丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。,10,主要內(nèi)容,病理概述 病理科主要研究方法 免疫組化臨床應(yīng)用 免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀,11,免疫組化的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面: ⑴惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷; ⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位; ⑶對(duì)某類腫瘤進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型; ⑷軟組織腫瘤的治療一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類,因其種類多、組織形態(tài)相像,,12,有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源,應(yīng)用多種標(biāo)志物進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織腫瘤的診斷是不可缺少的; ⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶,有助于臨床治療方案的確定,包括手術(shù)范圍的確定。 ⑹為臨床提供治療方案的選擇。,13,小B細(xì)胞淋巴瘤免疫組化特點(diǎn),14,乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌免疫組化分子分型 與治療預(yù)后關(guān)系,15,16,,cerBb-2,CD20,ER,CK,17,主要內(nèi)容,病理概述 病理科主要研究方法 免疫組化臨床應(yīng)用 免疫組化技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀,18,,,,,1天,4小時(shí),1天,1塊組織從取材到最終出報(bào)告至少需3天時(shí)間,19,目前病理診斷的瓶頸,市場(chǎng)需求的病理診斷,手工操作,自動(dòng)化操作,時(shí)間和試劑不能精確控制,影響結(jié)果。,產(chǎn)出率低、醫(yī)院和病理醫(yī)生收益低,操作復(fù)雜,技術(shù)含量高,對(duì)醫(yī)生要求高。,完全手工操作耗時(shí)耗力。,結(jié)果準(zhǔn)確,操作簡(jiǎn)便,快速診斷,節(jié)約成本,,20,免疫組化主要玩家,國(guó)際:羅氏、萊卡、DAKO 占據(jù)國(guó)內(nèi)絕大部分免疫組化自動(dòng)化市場(chǎng) 主要問(wèn)題:價(jià)格高,基層醫(yī)院無(wú)法承受,21,免疫組化主要玩家,國(guó)內(nèi):試劑有一定積累,儀器剛剛起步,質(zhì)量和穩(wěn)定性不行 邁新:試劑研發(fā)歷史最長(zhǎng),有試劑優(yōu)勢(shì);儀器近年推出。 基因:有試劑,有一款半自動(dòng)免疫組化 中杉:有試劑無(wú)機(jī)器 深達(dá):剛推出機(jī)器,效果未知,22,達(dá)盟全自動(dòng)免疫組化,核心專利技術(shù),使清洗更加徹底,染色效果更有保障; 核心專利技術(shù),提高試劑使用效率,最小試劑使用量80ul 更多人性化設(shè)計(jì)和本地快捷服務(wù),醫(yī)生使用更加順心,23,試劑情況,輔助試劑,包括抗原修復(fù)液,脫蠟液,清洗液,酒精等; 二抗系統(tǒng):包括有DAB以及蘇木素等,核心是二抗本身。 一抗種類繁多,國(guó)內(nèi)已經(jīng)備案的有200種之多。,24,試劑情況,25,謝謝大家!,26,- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問(wèn)題本站不予受理。
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