ICS67.040C 53DB34安徽省地方標準DB 34/ T XXXX2020代替DB 34/T 1769-2012 復(fù)合食品包裝材料中二氨基甲苯類物質(zhì)遷移量的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法Determination of migration of diaminotoluenes in composite food packaging materials by UPLC-MS/MS method點擊此處添加與國際標準一致性程度的標識2020 - XX - XX發(fā)布2020 - XX - XX實施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB34/ T XXXX2020前言本標準按照GB/T 1.1的規(guī)則編寫。本標準代替DB 34/T 1769-2012復(fù)合食品包裝袋中2,4-二氨基甲苯的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法。本標準與DB 34/T 1769-2012相比，主要變化如下：標準名稱修改為“復(fù)合食品包裝材料中二氨基甲苯類物質(zhì)遷移量的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法”；修改了遷移實驗條件；采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法替代了原標準中的氣相色譜-質(zhì)譜法。本標準由安徽省食品質(zhì)量安全檢驗方法標準化技術(shù)委員會提出。本標準由安徽省食品質(zhì)量安全檢驗方法標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位：安徽省食品藥品檢驗研究院（安徽國家農(nóng)副加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心）、安徽省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、安徽國科檢測科技有限公司。本標準主要起草人：8復(fù)合食品包裝材料中二氨基甲苯類物質(zhì)遷移量的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法1 范圍本標準規(guī)定了復(fù)合食品包裝袋（膜）中2,4-二氨基甲苯、2,5-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯和2,3-二氨基甲苯遷移量的測定方法。本標準適用于復(fù)合食品包裝袋（膜）中2,4-二氨基甲苯、2,5-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯和2,3-二氨基甲苯遷移量的測定。2 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB 5009.156 食品安全國家標準 食品接觸材料及制品遷移試驗預(yù)處理方法通則GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 原理試樣中2,4-二氨基甲苯類物質(zhì)用4乙酸溶液浸出，待浸出液冷卻，調(diào)pH為7.08.0后，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定，內(nèi)標法定量。4 試劑和材料除非另有說明，本文件所用試劑均為分析純，水為GB/T 6682 規(guī)定的一級水。4.1 試劑4.1.1 甲醇（CH3OH，CAS：67-56-1）：色譜純。4.1.2 甲酸（HCOOH，CAS：64-18-6）：色譜純。4.1.3 甲酸銨（HCOONH4，CAS：540-69-2）：色譜純。4.1.4 冰乙酸（CH3COOH，CAS：64-19-7）。4.1.5 氨水（NH3H2O，CAS：1336-21-6）。4.2 溶液配制4.2.1 甲酸銨溶液（6 mmol/L）：稱取0.378 g甲酸銨，用水稀釋至1 L，再用甲酸（4.1.2）調(diào)節(jié)pH至4.5，搖勻。4.2.2 乙酸溶液（4）：稱取40 g冰乙酸溶于960 mL水中。4.3 標準品二氨基甲苯類物質(zhì)的標準品，參見附錄A，純度98。4.4 標準溶液配制4.4.1 標準儲備液（100 mg/L）：準確稱取2,4-二氨基甲苯、2,5-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯和2,3-二氨基甲苯各5 mg（精確至0.1 mg），分別置于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為100 mg/L的標準儲備液，18避光保存，有效期3個月。4.4.2 混合標準系列中間液：精密量取標準儲備液（4.4.1）各1mL，置于10 mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，配制成10 mg/L混合標準中間液，再用水逐級稀釋成20、50、100、200、500、1000、2000 g/L的混合標準系列中間液，4以下避光保存，有效期1個月。4.4.3 同位素內(nèi)標儲備液（100 mg/L）：稱取10.0 mg（精確至0.1 mg）2,4-TDA-d3標準品，置于100 mL棕色容量瓶，用甲醇溶解并稀釋至刻度，配成濃度為100 mg/L的儲備液，18避光保存，有效期3個月。4.4.4 同位素內(nèi)標中間液：精確量取100 L同位素內(nèi)標儲備液（4.4.3），用水定容至10 mL，配成1 mg/L的內(nèi)標工作溶液，4以下避光保存，有效期1個月。4.4.5 混合標準工作液：分別量取100 L混合標準系列中間液（4.4.2），加入100 L同位素內(nèi)標中間液（4.4.4），使用空白樣品基質(zhì)定容至10 mL，配成0.2、0.5、1、2、5、10、20 g/L混合標準系列工作曲線溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。5 儀器和設(shè)備5.1 液相色譜三重四級桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配電噴霧（ESI）離子源。5.2 電子天平：感量0.1 mg和0.01 g。5.3 pH計：精度為0.1。5.4 電熱恒溫箱。5.5 渦旋振蕩器。5.6 遷移測試池。6 分析步驟6.1 試樣制備將食品包裝膜、袋用清水沖洗至無污物，淋干，取面積大于遷移測試池密封區(qū)域的試樣，裝入預(yù)先已達到試驗溫度的遷移測試池中，按2 mL/cm2計算，加入預(yù)先已達到試驗溫度的乙酸溶液（4.2.2），擰緊加注口螺絲?；虬凑誈B 5009.156的要求進行遷移試驗。6.2 遷移試驗當樣品的使用溫度低于60 時，將6.1裝有樣品的遷移測試池，置于預(yù)先調(diào)至60 2 的電熱恒溫箱里，恒溫2 h，取出，將浸泡液轉(zhuǎn)移至燒杯中，冷卻至室溫，備用。當樣品使用溫度為60 120 時，將6.1裝有樣品的遷移測試池，置于預(yù)先調(diào)至120 3 的電熱恒溫箱里，恒溫40 min，取出，將浸泡液轉(zhuǎn)移至燒杯中，冷卻至室溫，備用。準確吸取10 mL上述遷移試驗浸泡液于50 mL離心管中，加入100 L 1 mg/L內(nèi)標標準溶液（4.4.4），渦旋混勻，用氨水調(diào)pH為7.08.0，經(jīng)0.22 m有機濾膜后，待LC-MS/MS分析。6.3 儀器參考條件6.3.1 超高效液相色譜條件a) 色譜柱：Phenyl柱(2.150 mm，1.7 m)，或性能相當者；b) 流動相：6 mmol/L甲酸銨溶液（A相），甲醇（B相），梯度洗脫程序見表1；c) 流速：0.3 mL/min；d) 進樣體積：5 L；e) 柱溫：35 。表1 梯度洗脫程序（VA+VB）時間/min流動相VA流動相VB09820.509822.509554.0080205.0020806.0010906.019827.009826.3.2 質(zhì)譜參考條件a) 離子源：ESI離子源；b) 掃描方式：正離子掃描；c) 毛細管電壓：3000 V；d) 離子源溫度：230 ；e) 干燥氣流速：18 L/min；f) 霧化氣壓力：35 psi；g) 鞘氣溫度：335；h) 鞘氣流速：11 L/min；i) 碰撞氣流速：0.15 mL/min；j) 噴嘴電壓：500 V；k) 多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），監(jiān)測條件見表2。表2 多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）條件序號中文名稱定量離子對m/z碰撞能量V定性離子對m/z碰撞能量V12,4-二氨基甲苯123.1/106.115123.1/108.1123.1/77.1183222,5-二氨基甲苯123.1/108.123123.1/106.1123.1/77.1173232,6-二氨基甲苯123.1/106.115123.1/108.1123.1/77.1183243,4-二氨基甲苯123.1/106.115123.1/79.2123.1/77.1223252,3-二氨基甲苯123.1/106.115123.1/79.2123.1/77.1223262,4-二氨基甲苯-d3126.1/108.123126.1/109.1176.4 定性與定量6.4.1 定性測定被測試樣中待測化合物的色譜峰的保留時間與相應(yīng)標準色譜圖的保留時間相比較，相對誤差應(yīng)在2.5之內(nèi)。在相同實驗條件下進行樣品測定，如果檢出的色譜峰的保留時間與標準色譜峰一致，且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中待測化合物的定性離子和定量離子的豐度比與質(zhì)量濃度相當?shù)幕|(zhì)標準溶液相比，其允許偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在待測化合物。表3 定性測定時相對離子豐度的最大允許偏差單位為相對離子豐度502050（含）1020（含）10允許相對偏差202530506.4.2 定量測定內(nèi)標法定量：用混合標準工作曲線（4.4.5）分別進樣，以待測化合物和內(nèi)標化合物的峰面積比為縱坐標，待測化合物和內(nèi)標化合物的濃度比為橫坐標，繪制標準工作曲線。 2,4-二氨基甲苯-d3作為2,4-二氨基甲苯、2,5-二氨基甲苯、2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯和2,3-二氨基甲苯的內(nèi)標使用。在上述儀器條件下，各化合物的總離子流色譜圖及提取離子色譜圖見附錄B。6.4.3 試樣溶液的測定將混合標準工作溶液和試樣溶液依次注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，保留時間和定性離子定性，測得定量離子峰面積，樣品試液中待測物的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測的定量測定線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍時應(yīng)根據(jù)測定濃度進行適當稀釋后再進行分析。6.5 平行試驗按6.16.4的規(guī)定對同一試樣進行平行試驗測定。6.6 空白試驗除不加樣品外，按6.16.4的規(guī)定進行平行操作。7 分析結(jié)果的表述試樣中待測物的含量按式（1）計算： X=（-0）V1V21000 （1）X 試樣中待測物的含量，單位為毫克每升（mg/L）； 由標準曲線求得試樣溶液中待測物的濃度，單位為微克每升（g/L）；0 空白溶液中待測物的濃度，單位為微克每升（g/L）；V1試液體積，單位為毫升（mL）；V2最終定容體積，單位為毫升（mL）；1000換算系數(shù)；計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。8 靈敏度方法的檢出限：2,4-二氨基甲苯為0.25 g/L，2,5-二氨基甲苯為1.0 g/L，2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯、2,3-二氨基甲苯為0.5 g/L。方法的定量限：2,4-二氨基甲苯為0.5 g/L，2,5-二氨基甲苯為2.0 g/L，2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯、2,3-二氨基甲苯為1.0 g/L。9 準確度2,4-二氨基甲苯在0.5 g/L10 g/L 添加濃度的回收率為78%105%；2,5-二氨基甲苯在2.0 g/L20 g/L添加濃度的回收率為70%92%、2,6-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯、2,3-二氨基甲苯在1.0 g/L10 g/L 添加濃度的回收率為70%106%。10 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的20 %。AA附錄A （資料性附錄）化合物相關(guān)信息表A.1 化合物中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量序號中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量12,4-二氨基甲苯（2,4-TDA）2,4-Diaminotoluene95-80-7C7H10N2122.1722,5-二氨基甲苯（2,5-TDA）2,5-Diaminotoluene95-70-5C7H10N2122.1732,6-二氨基甲苯（2,6-TDA）2,6-Diaminotoluene823-40-5C7H10N2122.1743,4-二氨基甲苯（3,4-TDA）3,4-Diaminotoluene496-72-0C7H10N2122.1752,3-二氨基甲苯（2,3-TDA）2,3-Diaminotoluene2687-25-4C7H10N2122.1762,4-二氨基甲苯-d3（2,4-TDA- d3）2,4-Diaminotoluene-d371111-08-5C7H7D3N2125.19BB附錄B （資料性附錄）化合物標準溶液的色譜圖圖B.1 總離子流色譜圖圖B.1 混合標準溶液（2.0 g/L）的總離子流色譜圖注： 化合物按照保留時間依次為： 2,5-二氨基甲苯、 2,6-二氨基甲苯、2,4-二氨基甲苯、3,4-二氨基甲苯和 2,3-二氨基甲苯圖B.2 特征離子質(zhì)量色譜圖 圖B.2 混合標準溶液及內(nèi)標標準溶液的特征離子質(zhì)量色譜圖（2.0 g/L）_