專題八 主攻點之（一）一、選擇題1(2019南京六校聯(lián)考)用限制酶EcoR、Kpn和二者的混合物分別降解一個1 000 bp(1 bp即1個堿基對)的DNA分子，對降解產物分別進行凝膠電泳，在電場的作用下，降解產物分開，凝膠電泳結果如圖所示。該DNA分子的酶切圖譜(單位：bp)正確的是()解析：選C根據(jù)電泳圖可知Kpn 切割只得到1種DNA片段，判斷該DNA分子是環(huán)狀，且該DNA分子上只有1個Kpn 切點。EcoR 切割得到2種DNA片段，說明該DNA分子上有兩個EcoR 切點。據(jù)此分析選項中的酶切圖譜，只有C項符合。2中華鱘是地球上最古老的脊椎動物，被稱為“活化石”。研究者試圖通過蛋白質工程改造中華鱘體內的某些蛋白質，使其更加適應現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列說法錯誤的是()A該工程可以定向改變蛋白質分子的結構B改造蛋白質是通過改造基因結構而實現(xiàn)的C改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘仍是同一物種D改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質解析：選D蛋白質工程通過對基因進行人工合成或修飾，最終定向改變蛋白質分子的結構；改造后的中華鱘遺傳物質變化不大，和現(xiàn)有中華鱘不存在生殖隔離，仍是同一物種；改造后的中華鱘含有控制新蛋白質合成的基因，所以后代具有改造的蛋白質。3農桿菌中的Ti質粒是植物基因工程中常用的運載體，下列相關敘述正確的是()ATi質粒是能夠自主復制的單鏈DNABTi質粒中磷酸基團都與兩個脫氧核糖相連接C重組Ti質粒的受體細胞只能是植物愈傷組織細胞DTi質粒上的基因可全部整合到受體細胞染色體上解析：選BTi質粒是能夠自主復制的環(huán)形雙鏈DNA分子，其分子內部的磷酸基團都與兩個脫氧核糖相連接。重組Ti質粒的受體細胞可以是植物愈傷組織細胞，也可以是其他的植物細胞，如植物的受精卵細胞。農桿菌有Ti質粒，Ti質粒上有一段TDNA，目的基因需插入Ti質粒上的TDNA中形成重組質粒載體，再導入農桿菌，然后讓含重組質粒載體的農桿菌侵染植物，只有Ti質粒上的TDNA片段(內有目的基因)而不是Ti質粒上的全部基因整合到受體細胞染色體上。4下列關于人胰島素基因表達載體的敘述，正確的是()A表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA逆轉錄獲得B表達載體的復制和胰島素基因的表達均始于復制原(起)點C借助抗生素抗性基因可以將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D表達載體中的啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉錄中起作用解析：選C 胰島素基因在人體肝細胞中不表達，所以從肝細胞中不能提取到胰島素基因轉錄成的mRNA；基因的表達始于啟動子，基因的復制始于復制原點；抗生素抗性基因作為標記基因，可以將含胰島素基因的受體細胞篩選出來；啟動子是轉錄的起點，終止密碼子是翻譯的終點。5(2019無錫一模)下列關于細胞工程的敘述，正確的是( )A組織培養(yǎng)中的材料和用具都要經滅菌處理，全程需無菌操作B利用發(fā)酵罐大量生產細胞代謝產物，體現(xiàn)了細胞的全能性C體細胞核移植過程中，目前常采用將供體細胞注入去核卵母細胞的技術D動物細胞懸液制備過程中，用胃蛋白酶處理時要注意控制時間解析：選C組織培養(yǎng)中的材料要經消毒處理，用具經滅菌處理，全程需無菌操作；利用發(fā)酵罐大量生產細胞代謝產物，沒有發(fā)育成完整個體，不能體現(xiàn)細胞的全能性；體細胞核移植過程中，常將供體細胞注入去核卵母細胞；動物細胞懸液制備過程中，用胰蛋白酶處理時要注意控制時間。6植物細胞工程作為一門新興的生物技術，被廣泛應用于社會生產，下列說法錯誤的是()A人工種子是用人工薄膜為種皮包被植物愈傷組織形成的B植物微型繁殖運用了植物組織培養(yǎng)技術，可快速繁殖良種植物C作物脫毒常選取植物的莖尖，因為該處病毒較少或無病毒D植物細胞融合中常用的融合手段有離心、振動、電激和PEG法解析：選A人工種子常使用人工薄膜作為種皮包被胚狀體。7下列關于植物組織培養(yǎng)及其應用的敘述，正確的是()A離體的植物組織、器官必須經過滅菌才能接種到組織培養(yǎng)基中B以植物芽尖為材料通過組織培養(yǎng)可以獲得抗毒新品種C生長素、細胞分裂素的調節(jié)作用在組織培養(yǎng)中非常重要D以人工膜包裹植物愈傷組織和營養(yǎng)物質可制得人工種子解析：選C離體的植物組織、器官必須經過消毒(滅菌會殺死植物組織和器官)才能接種到組織培養(yǎng)基中；以芽尖為材料通過組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗，但不屬于新品種，抗病毒的新品種需通過轉基因技術獲得；生長素、細胞分裂素調節(jié)作用在組織培養(yǎng)中非常重要；以人工膜包裹胚狀體和營養(yǎng)物質可制得人工種子。8(2019江蘇四校調研)細胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關鍵。下列選擇不合理的是( )A選擇高度分化的動物體細胞進行培養(yǎng)有利于獲得大量細胞B選擇胚胎細胞作為核供體進行核移植可提高克隆動物的成功率C選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗D選擇植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得優(yōu)質的突變體解析：選A高度分化的動物體細胞分裂能力弱，應選用胚胎細胞或幼齡動物細胞進行培養(yǎng)；胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性更容易；植物莖尖的病毒極少甚至無病毒，由其培養(yǎng)成的植株可不帶病毒；植物組織培養(yǎng)的愈傷組織細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，易受到環(huán)境影響而發(fā)生基因突變。9(多選)利用基因工程技術生產羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如下圖所示，下列有關敘述正確的是()A過程需使用逆轉錄酶B過程利用PCR擴增CarE基因需使用解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶C過程可用NaCl溶液處理大腸桿菌，使之成為感受態(tài)細胞D過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體細胞解析：選AD利用PCR擴增基因時，通過高溫使DNA解旋，不需要解旋酶，但需要耐高溫的DNA聚合酶；用CaCl2溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。10(2019揚州一模，多選)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，有關說法錯誤的是( )A過程常用滅活的病毒，不可用聚乙二醇B過程篩選出的雜交瘤細胞都能產生抗HCG抗體C過程以抗HCG單克隆抗體為抗原進行檢測D過程需要添加抗生素等物質，以防止病毒污染解析：選ABD過程常用滅活的病毒，也可用聚乙二醇；過程篩選出的雜交瘤細胞都能產生抗體，但不一定是抗HCG的抗體；過程以抗HCG單克隆抗體為抗原進行抗原抗體檢測；抗生素是防止細菌污染的，不能防止病毒污染。二、非選擇題11(2019全國卷)植物組織培養(yǎng)技術在科學研究和生產實踐中得到了廣泛的應用?；卮鹣铝袉栴}：(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術的特點有_(答出2點即可)。(2)通過組織培養(yǎng)技術，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是_。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質，因此應含有植物激素、_和_等幾類物質。(3)用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的_進行組織培養(yǎng)。(4)植物組織培養(yǎng)技術可與基因工程技術相結合獲得轉基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是_(用流程圖表示)。解析：(1)植物微型繁殖屬于植物組織培養(yǎng)技術，其特點是能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快等。(2)人工種皮具備透氣性，使胚狀體易獲得氧氣，有利于胚狀體進行呼吸作用。植物的生長需要有機物和無機物等營養(yǎng)，人工胚乳中應含有植物激素、礦質元素和糖等物質，這些物質都是胚狀體生長所必需的。(3)植物的莖尖含病毒極少，適合用其進行組織培養(yǎng)獲得脫毒苗。(4)植物組織培養(yǎng)中主要包含脫分化和再分化兩個過程，結合基因工程，培育轉基因植株的過程為：含目的基因的細胞愈傷組織小植株。答案：(1)能保持植物原有的遺傳特性，繁殖速度快(2)有利于胚狀體進行呼吸作用礦質元素糖(3)莖尖(4)含目的基因的細胞愈傷組織小植株12(2019蘇州一模)逆轉錄病毒載體是目前應用較多的動物基因工程載體之一。運用逆轉錄病毒載體可以將外源基因插入受體細胞染色體，使外源基因隨染色體DNA一起復制和表達。研究發(fā)現(xiàn)逆轉錄病毒基因組的核心部分包括三個基因：Gag基因(編碼病毒的核心蛋白)、pol基因(編碼逆轉錄酶)、env基因(編碼病毒的表面糖蛋白)。位于這些基因的兩端有LTR序列(含有啟動子、調節(jié)基因等)，控制著逆轉錄基因組核心基因的表達及轉移。下圖是構建逆轉錄病毒載體及用于培育轉基因小鼠的過程?；卮鹣铝袉栴}：(1)逆轉錄病毒主要組成物質有_。 (2)催化過程的酶是_，過程中需要的工具酶分別是_，過程常用的導入方法是_。 (3)過程中，外源基因一定要插入病毒DNA的LTR序列中的啟動子后，其主要目的是_。 (4) 過程中，導入病毒蛋白編碼基因(Gag、pol和env)的目的是_。(5) 如利用牛乳腺生物反應器生產人胰島素，則應在構建基因表達載體時，使目的基因與_等調控組件重組在一起，一般導入牛_細胞中，最終牛的乳汁中就含有人胰島素。 解析：(1) 逆轉錄病毒是RNA病毒，主要組成物質是RNA和蛋白質。(2) 過程是逆轉錄，需要逆轉錄酶催化，過程需要限制酶切割DNA，過程需要DNA連接酶將目的基因插入LTR序列中，過程是將目的基因導入動物細胞，常用顯微注射法。(3) 外源基因插入病毒DNA的LTR序列中的啟動子后，可以控制外源基因的表達與轉移。(4) 導入病毒蛋白編碼基因(Gag、pol和env)可以編碼病毒的核心蛋白、逆轉錄酶和病毒的表面糖蛋白的合成，組成病毒的蛋白質。(5) 利用牛乳腺生物反應器生產人胰島素，構建基因表達載體時應使目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起，才能使目的基因隨乳腺蛋白基因的轉錄而正常轉錄，由于受精卵全能性最高，導入的受體細胞一般為牛受精卵。答案：(1) RNA和蛋白質(2) 逆轉錄酶限制酶和DNA連接酶顯微注射法(3) 控制外源基因的表達與轉移(4) 合成組成病毒的蛋白質(5) 乳腺蛋白基因的啟動子受精卵13RTPCR是將RNA逆轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增反應相結合的技術，具體過程如圖所示：(1)過程需要加入緩沖液、原料、_、_和引物A等。(2)進行過程前首先要將反應體系的溫度升高到95 ，其目的是_，該反應體系中所用的Taq酶至少應能耐受_高溫。(3)過程擬對單鏈cDNA進行n次循環(huán)的擴增，理論上至少需要_個引物B。(4)利用RTPCR技術獲取的目的基因_(填“能”或“不能”)在物種之間交流；該技術還可用于對某些微量RNA病毒的檢測，可提高檢測的靈敏度，原因是_。(5)RTPCR過程中主要借助對_的控制，影響酶的活性，從而使得化學反應有序高效地進行。解析：(1)過程是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉錄，需要加入緩沖液、原料、RNA提取物、逆轉錄酶和引物A等。(2)進行過程前首先要將反應體系的溫度升高到95 ，其目的是讓逆轉錄酶變性失活、使mRNAcDNA雜合雙鏈解開，該反應體系中所用的Taq酶至少應能耐受95 高溫。(3)過程擬對單鏈cDNA進行n次循環(huán)的擴增，理論上至少需要2n1個引物B。(4)利用RTPCR技術獲取的目的基因能在物種之間交流；該技術還可用于對某些微量RNA病毒的檢測，可提高檢測的靈敏度，原因是增加了待測RNA逆轉錄產生的DNA的數(shù)量(或濃度)，便于檢測。(5)RTPCR過程中主要借助對溫度的控制，影響酶的活性，從而使得化學反應有序高效地進行。答案：(1)RNA提取物逆轉錄酶(2)讓逆轉錄酶變性失活、使mRNAcDNA雜合雙鏈解開(答出一點即可)95(3)2n1(4)能增加了待測RNA逆轉錄產生的DNA的數(shù)量(或濃度)，便于檢測(5)溫度6