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1、 第 一 節(jié) 、 蛋 白 質(zhì) 的 基 本 組 成 單 位 第 二 節(jié) 、 蛋 白 質(zhì) 的 分 子 結(jié) 構(gòu) 第 三 節(jié) 、 蛋 白 質(zhì) 的 分 類 及 性 質(zhì) 第 四 節(jié) 、 核 酸 的 化 學(xué) 組 成 第 五 節(jié) 、 核 酸 分 子 的 結(jié) 構(gòu) 第 六 節(jié) 、 核 酸 的 理 化 性 質(zhì) 和 分 離 提 純 第 四 節(jié) 、 核 酸 的 化 學(xué) 組 成核 酸 (nucleic acid)是 由 堿 基 （ 嘌 呤 和 嘧 啶 ） 、 戊 糖和 磷 酸 組 成 的 高 分 子 物 質(zhì) ， 是 生 物 體 的 基 本 組 成 。 種 類 及 分 布DNA （ 脫 氧 核 糖 核 酸 ） ： 主 要

2、在 細(xì) 胞 核 中 ， 是 染 色體 的 主 要 成 分 。 此 外 在 線 粒 體 、 葉 綠 體 、 質(zhì) 粒 及細(xì) 胞 膜 上 . RNA（ 核 糖 核 酸 ） ： 細(xì) 胞 核 核 仁 ； 細(xì) 胞 質(zhì) 核 糖 體 及 上 清 液 中 核 酸核 苷 酸磷 酸 核 苷戊 糖 堿 基 水解核 酸 的 化 學(xué) 組 成除 含 C、 H、 O、 N外 ， 還 含 有 較 多 的 磷 和 少 量 的 硫 ， 含 磷 量 在 9 10 核 酸 是 一 種 線 形 多 聚 核 苷 酸(polynucleotide), 其 基 本結(jié) 構(gòu) 單 位 是 核 苷 酸(nucleotide)。 核 苷 酸 的 基本

3、結(jié) 構(gòu) 堿 基 是 一 類 含 氮 的 有 機 小 分 子 （ 五 種 ）n嘌 呤 (purine） ： 腺 嘌 呤 adenine (A)、 鳥 嘌 呤 guanine (G)n嘧 啶 (pyrimidine ） ： 胞 嘧 啶 cytosine (C)DNA/RNA、 尿 嘧 啶 uracil (U)RNA、 胸 腺 嘧 啶 thymine (T)DNAn構(gòu) 成 核 酸 的 五 種 堿 基 中 的 酮 基 和 氨 基 位 于 雜 環(huán) 上氮 原 子 鄰 位 ， 受 介 質(zhì) PH值 的 影 響 ， 形 成 酮 式 和 烯 醇式 ， 氨 基 或 亞 氨 基 互 變 異 構(gòu) 體 。一 、 堿 基

4、（ nitrogenous base） 腺 嘌 呤 鳥 嘌 呤尿 嘧 啶胞 嘧 啶 胸 腺 嘧 啶 OH O HOH HH HH HO 2 -脫氧核糖 O OHOH HH HH HO OH 核糖 二 、 戊 糖 （ pentose） 2-deoxy-D-riboseD-riboseOHO HOH HH HHHO 2 -脫氧核糖 O OHOH HH HH HO OH 核糖 三 、 核 苷 （ nucleoside） 核 苷 是 核 糖 與 堿 基 (嘌 呤 堿 或 嘧 啶 堿 )結(jié) 合 物 。 嘌 呤 核 苷 是 嘌 呤 的 第 9位 N與 核 糖 或 脫 氧 核 糖 第 1位 碳 連 接 ；

5、嘧 啶 核 苷 是 嘧 啶 的 的 第 1位 N與 核 糖 或 脫 氧 核 糖 第1位 碳 連 接 ； NNNN NH2O HOH HH HHHO 腺 嘌 呤 脫 氧 核 苷 （ dA） 鳥 嘌 呤 脫 氧 核 苷 （ dG） NHNN O NH2NO HOH HH HHHO O HOH HH HHHO N NHO OH3C O HOH HH HHHO N NNH2 O 胞 嘧 啶 脫 氧 核 苷 （ dC) 胸 腺 嘧 啶 脫 氧 核 苷 (dT) NNNN NH 2O OHOH HH HHHO腺 嘌 呤 核 苷 (A) 鳥 嘌 呤 核 苷 (G ) NHNN O NH2NO OHOH HH

6、 HHHO NNH 2 ONO OHOH HH HHHO NHO ON O OHOH HH HHHO尿 嘧 啶 核 苷 （ U）胞 嘧 啶 核 苷 (C) 核 苷 ： 戊 糖 與 堿 基 縮 合 而 成 ， 并 以 糖 苷 鍵 相 連 接 。 糖 苷 鍵 ： 二 者 的 連 接 是 C-N鍵 ， 稱 N-糖 苷 鍵 。 nucleotide） 結(jié) 構(gòu) 與 命 名磷酸 堿基戊 糖 N N NNNH H NH NHOOO OHOH OHOHCH2P OHOO O 核 苷 酸 ：AMP、GMPCMP UMP脫 氧 核 苷 酸 ：dAMP,dGMP,dCMP,dTMP修 飾 核 苷 ： 如 5-甲 基

7、 胞 嘧 啶 ： m5dCMP。 核 苷 的 磷 酸 酯堿 基 連 接 （ 核 苷 鍵 ）脂 鍵 （ 對 DNA為 H ）核 糖 核 苷 酸 (2 、3和 5 位 )； 脫 氧 核 糖 核 苷 酸 （ 3和 5位 )。 八 種 核 苷 酸 如 下 表 所 示 RNA的 名 稱 為 某 （ 單 、 二 、 三 ） 苷 酸 ，DNA在 某 （ 單 、 二 、 三 ） 前 加 脫 氧 兩 字 。 如AMP稱 腺 苷 磷 酸 (或 腺 苷 酸 ） ， dAMP稱 為 脫 氧 腺苷 磷 酸 （ 脫 氧 腺 苷 酸 ） 。 稀 有 核 苷 酸 與 上 類 似 ； 腺 嘌 呤 A 鳥 嘌 呤 G 胞 嘧 啶

8、 C 尿 嘧 啶 U 胸 腺 嘧 啶 TRNA AMP G MP CMP UMP 未 發(fā) 現(xiàn)DNA dAMP dG MP dCMP 未 發(fā) 現(xiàn) dTMP 3 5 環(huán) 化 腺 苷 酸（ cAMP） 許 多 激 素 是 通 過 cAMP發(fā)揮 功 能 的 ， 所 以 它 被 稱為 激 素 作 用 的 第 二 信 使 ，激 素 是 第 一 信 使 。 一 、 DNA的 分 子 結(jié) 構(gòu)（ 一 ） 核 酸 的 一 級 結(jié) 構(gòu)核 酸 的 一 級 結(jié) 構(gòu) 是 指 單 核 苷 酸 之 間 的 連 接 方 式 。 DNA、 RNA都 是 由 許 多 核 苷 酸 通 過 3、 5磷 酸 二 酯鍵 將 前 一 個 核

9、 苷 酸 與 后 一 個 核 苷 酸 連 接 起 來 ， 形 成無 分 支 的 多 核 苷 酸 鏈 。 在 鏈 的 一 端 的 一 個 戊 糖 的 3位 上 OH是 游 離 存 在 的 ，另 一 端 的 戊 糖 其 5位 上 連 有 一 個 磷 酸 基 團 呈 單 磷 酸 酯狀 態(tài) ， 這 兩 個 末 端 分 別 稱 為 3末 端 及 5末 端 。第 五 節(jié) 核 酸 的 分 子 結(jié) 構(gòu) DNA一 級 結(jié) 構(gòu) 的 簡 寫 形 式 核 苷 酸 順 序 又 稱 堿 基 順 序 ， 是 蛋 白 質(zhì) 與 RNA結(jié)構(gòu) 的 生 物 語 言 。戊 糖P 5 3首 端 末 端PP P P PP 多 核 苷 酸

10、鏈 的 表 達 方 式 （ 二 ） DNA的 空 間 結(jié) 構(gòu) 1、 DNA的 二 級 結(jié) 構(gòu)DNA雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 模 型 的 要 點 (1) DNA分 子 是 由 兩 條 反 平 行 的 多 聚 脫 氧 核 苷 酸鏈 ， 繞 同 一 中 心 軸 盤 旋 形 成 的 右 手 螺 旋 結(jié) 構(gòu) ； (2) 每 條 主 鏈 由 脫 氧 核 糖 與 磷 酸 通 過 3、 5磷 酸二 酯 鍵 連 接 而 成 ， 并 位 于 螺 旋 外 側(cè) 。 堿 基 位 于 螺旋 內(nèi) 側(cè) ， 堿 基 平 面 與 螺 旋 中 心 軸 垂 直 。 螺 旋 表 面有 兩 條 螺 旋 形 的 凹 槽 大 溝 和 小 溝 。

11、(3) 雙 螺 旋 的 直 徑 是 2nm， 沿 中 心 軸 ， 每一 個 螺 旋 周 期 有 10個 核 苷 酸 對 ， 螺 距 是3.4nm， 堿 基 對 之 間 的 距 離 為 0.34nm。 (4) 兩 鏈 間 的 堿 基 以 氫 鍵 互 相 配 對 。 A與T配 有 兩 個 氫 鍵 ， G與 C配 有 三 個 氫 鍵 。 DNA分 子 所 含 嘌 呤 堿 基 的 總 數(shù) 等 于 嘧 啶 堿基 的 總 數(shù) (即 A+G=T+C) 堿 基 當(dāng) 量 定律 。 DNA堿 基 組 成 的 Chargaff規(guī) 則（ 1950年 ）（ 1） 腺 嘌 呤 和 胸 腺 嘧 啶 的 摩 爾 數(shù) 相 等

12、， 即A T （ 2） 鳥 嘌 呤 和 胞 嘧 啶 的 摩 爾 數(shù) 也 相 等 ， 即 G C （ 3） 含 氨 基 的 堿 基 (腺 嘌 呤 和 胞 嘧 啶 )總 數(shù) 等 于 含酮 基 的 堿 基 (鳥 嘌 呤 和 胸 腺 嘧 啶 )總 數(shù) ， 即 A+C=G+T （ 4） 嘌 呤 的 總 數(shù) 等 于 嘧 啶 的 總 數(shù) ， 即 A+ G= C+ T 所 有 DNA中 堿 基 組 成 必 定 是 A=T， G=C這 一 規(guī) 律 暗 示A與 T, G與 C相 互 配 對 的 可 能 性 ， 為 Watson和 Crick提 出 DNA雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 提 供 了 重 要 根 據(jù) 。 A.DN

13、A堿 基 互 補 原 則腺 嘌 呤 胸 腺 嘧 啶鳥 嘌 呤胞 嘧 啶 DNA 一 股 的 核 苷 酸 序 列 與 另 一 股 的 序 列 互 補 （ A-T、G-C） 。 二 級 結(jié) 構(gòu) B型 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 大 部 分 DNA 所 具 有 的 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) ， 亦 稱 為 B 型 1.反 向 、 平 行 、 右 手 螺 旋2.鏈 間 堿 基 配 對 相 連3.每 10個 堿 基 對 螺 旋 上 升 一周4.一 條 鏈 為 主 動 鏈 ， 另 一 條為 被 動 鏈 ； 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 的 穩(wěn) 定 因 素 DNA雙 螺 旋 在 生 理 狀 態(tài) 下 十 分 穩(wěn) 定 ， 結(jié) 構(gòu) 不

14、發(fā) 生 變 化 。 提 問 ： 起 穩(wěn) 定 作 用 的 有 哪 些 力 呢 ？答 案 ： 疏 水 作 用 力 （ 又 稱 堿 基 堆 積 力 ） 氫 鍵 范 德 華 力 穩(wěn) 定 DNA雙 螺 旋 的 力 堿 基 堆 積 力 (每 條 鏈 上 相 鄰 堿 基 平 面 之 間 的 疏 水 作 用 ) 堿 基 間 的 氫 鍵 A-DNA B-DNA(右 旋 DNA) C-DNA Z-DNA(左 旋 DNA)DNA雙 螺 旋 的 種 類 DNA雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 模 型 不 同 型 的 DNA 不 同 型 的 DNAA型 B型 Z型螺 旋 右 手 右 手 左 手直 徑 26 20 18 每 圈 核 苷

15、 酸 數(shù) 11 10.5 12堿 基 間 距 離 2.6 3.4 3.7 堿 基 傾 斜 角 度 20 6 7糖 構(gòu) 象 C-3內(nèi) 折 C-2內(nèi) 折 對 嘧 啶 C-2內(nèi) 折對 嘌 呤 C-3內(nèi) 折糖 苷 鍵 構(gòu) 象 反 式 反 式 對 嘧 啶 反 式 對 嘌 呤 順 式 2、 DNA的 三 級 結(jié) 構(gòu)（ 1） DNA的 三 級 結(jié) 構(gòu) 是 指 雙 螺 旋 DNA的 扭 曲 或 再 螺 旋 。如 開 環(huán) 形 -由 直 鏈 雙 螺 旋 DNA分 子 兩 端 連 接 而 成 ， 其 中一 條 鏈 留 有 一 個 小 缺 口 。閉 環(huán) 超 螺 旋 形 -是 雙 鏈 環(huán) 形 DNA扭 曲 成 麻 花

16、狀 。發(fā) 夾 形 -DNA變 性 后 在 反 相 重 復(fù) 序 列 時 ， 可 形 成 發(fā) 夾 形 。（ 2） DNA也 可 聚 合 成 二 聚 體 和 三 聚 體 。 二 、 RNA（ 核 糖 核 酸 ） 天 然 RNA是 單 鏈 線 形 分 子 ， 只 有 局 部 區(qū) 域 為雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 。 rRNA (Ribosomal RNAs ， 核 糖 體 RNA)， 占 80%以 上 ：與 蛋 白 質(zhì) 構(gòu) 成 核 糖 體 ， 催 化 肽 鍵 的 形 成 mRNA (Messenger RNAs ， 信 使 RNA) ， 占 5%： 是 以DNA為 模 板 合 成 的 ， 又 是 合 成 蛋

17、白 質(zhì) 的 模 板 tRNA (Transfer RNAs ， 轉(zhuǎn) 運 RNA)， 占 15%： 在 蛋 白質(zhì) 合 成 中 轉(zhuǎn) 運 氨 基 酸 和 識 別 密 碼 子 RNA的 結(jié) 構(gòu)（ 一 ） RNA的 一 級 結(jié) 構(gòu) (以 mRNA為 例 )RNA分 子 的 基 本 結(jié) 構(gòu) 是 一 條 線 性 的 多 核 苷 酸 鏈 ，由 四 種 核 糖 核 苷 酸 以 3 ， 5 -磷 酸 二 酯 鍵 連接 而 成 。1、 原 核 mRNA的 一 級 結(jié) 構(gòu) 的 特 點 在 5 末 端 和 3 末 端 無 特 殊 結(jié) 構(gòu) ， 原 核mRNA一 般 為 多 順 反 子 。順 反 子 是 指 mRNA上 對

18、 應(yīng) 于 DNA上 一 個 完 整 基因 的 一 段 核 苷 酸 序 列 。 在 mRNA分 子 內(nèi) 部 ， 每 一 個 順 反 子 的 編 碼 區(qū) 是 從 起 始密 碼 (AUG)開 始 ， 到 終 止 密 碼 (UAG)為 止 。 各 個 順 反子 的 編 碼 區(qū) 之 間 、 5 端 的 第 一 個 順 反 子 的 編 碼 區(qū)之 前 以 及 3 端 的 最 后 一 個 順 反 子 編 碼 區(qū) 之 后 ， 都含 有 一 段 非 編 碼 區(qū) 。 2、 真 核 mRNA的 一 級 結(jié) 構(gòu) 的 特 點 真 核 的 mRNA一 般 為 單 順 反 子 ， 即 一 條 mRNA鏈 只 翻 譯 產(chǎn) 生

19、一 條 多 肽 鏈 。其 結(jié) 構(gòu) 模 式 為 5 -帽 子 -5 非 編 碼 區(qū) -編 碼 區(qū) -3 非 編 碼 區(qū)-多 聚 A多 聚 腺 苷 酸 （ 多 聚 A)尾 的 作 用 是 延 長 mRNA的 壽命 ， 從 而 可 以 增 加 蛋 白 質(zhì) 合 成 的 數(shù) 量 。 此 外 ，還 有 助 于 mRNA穿 過 核 膜 ， 進 入 細(xì) 胞 質(zhì) 執(zhí) 行 其模 板 功 能 5-帽 子 結(jié) 構(gòu)5 ， 5 -磷 酸 二 酯 鍵 ， 有 抗 5 -核 酸 外 切酶 的 降 解 作 用 ， 在 蛋 白 質(zhì) 合 成 過 程 中 ， 有 助于 核 糖 體 對 mRNA的 識 別 和 結(jié) 合 。 （ 二 ）

20、RNA的 空 間 結(jié) 構(gòu) (以 tRNA為 例 )1、 RNA的 二 級 結(jié) 構(gòu) 是 指 單 鏈 RNA分 子 自 身 回 折 ， 鏈內(nèi) 的 互 補 堿 基 配 對 ， 形 成 局 部 雙 螺 旋 區(qū) ， 未 配 對的 部 分 則 形 成 突 環(huán) 相 間 分 布 成 花 形 結(jié) 構(gòu) 。局 部 雙 螺 旋 回 折 產(chǎn) 生 莖 環(huán) 結(jié) 構(gòu) （ stem-loop） ， 即 二 級 結(jié) 構(gòu) 。 tRNA的 二 級 結(jié) 構(gòu) 呈 三 葉 草 形三 葉 草 形 結(jié) 構(gòu) 由 氨 基 酸 臂 、 二 氫尿 嘧 啶 環(huán) 、 反 密 碼 環(huán) 、 額 外 環(huán) 和TC環(huán) 等 5個 部 分 組 成 tRNA的 結(jié) 構(gòu)

21、特 點 ： （ 1） 、 分 子 量 在 25kd左 右 ， 由 70 90個 核苷 酸 組 成 ， 沉 降 系 數(shù) 在 4S左 右 ； （ 2） 、 堿 基 組 成 中 有 較 多 的 稀 有 堿 基 ； （ 3） 、 3 末 端 都 為 CpCpAOH用 來 接 受 活化 的 氨 基 酸 。 所 以 這 個 末 端 稱 接 受末 端 ； （ 4） 、 5 末 端 大 多 為 pG,也 有 pC的 ； （ 5） 、 tRNA的 二 級 結(jié) 構(gòu) 都 呈 三 葉 草 形 。 雙螺 旋 區(qū) 構(gòu) 成 了 葉 柄 ， 突 環(huán) 區(qū) 好 象 是三 葉 草 形 的 三 片 小 葉 。 tRNA的 二 級 結(jié)

22、 構(gòu) 都 呈 三 葉 草 形 。 雙 螺 旋 區(qū) 構(gòu) 成了 葉 柄 ， 突 環(huán) 區(qū) 好 像 是 三 葉 草 的 三 片 小 葉 。 由 于 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 所 占 比 例 甚 高 ， tRNA的 二 級 結(jié)構(gòu) 十 分 穩(wěn) 定 。 三 葉 草 形 結(jié) 構(gòu) 由 氨 基 酸 臂 、 二 氫 尿 嘧 啶 環(huán) 、 反密 碼 環(huán) 、 額 外 環(huán) 和 T C環(huán) 等 5個 部 分 組 成 。 （ 1） 、 氨 基 酸 臂 （ amino acid arm） 由 7對 堿 基 組成 ， 富 含 鳥 嘌 呤 ， 末 端 為 CCA， 接 受 活 化 的 氨 基 酸 。 （ 2） 、 二 氫 尿 嘧 啶 環(huán) (

23、dihydrouridine loop)由 8一12個 核 苷 酸 組 成 ， 具 有 兩 個 二 氫 尿 嘧 啶 ， 故 得 名 。 通過 由 3 4對 堿 基 組 成 的 雙 螺 旋 區(qū) (也 稱 二 氫 尿 嘧 啶 臂 )與 tRNA分 子 的 其 余 部 分 相 連 。 （ 3） 、 反 密 碼 環(huán) (anticodon loop)由 7個 核 苷 酸 組成 。 環(huán) 中 部 為 反 密 碼 子 ， 由 3個 堿 基 組 成 。 次 黃 嘌 呤核 苷 酸 (也 稱 肌 苷 酸 ， 縮 寫 成 I)常 出 現(xiàn) 于 反 密 碼 子 中 。反 密 碼 環(huán) 通 過 由 5對 堿 基 組 成 的

24、雙 螺 旋 區(qū) (反 密 碼 臂 )與 tRNA的 其 余 部 分 相 連 。 反 密 碼 子 可 識 別 信 使 RNA的密 碼 子 。 （ 4） 額 外 環(huán) （ extra loop ） 由 3一 18個 核 苷 酸組 成 。 不 同 的 tRNA具 有 不 同 大 小 的 額 外 環(huán) ， 所 以是 tRNA分 類 的 重 要 指 標(biāo) 。 （ 5） 假 尿 嘧 啶 核 苷 胸 腺 嘧 啶 核 糖 核 苷 環(huán) (T C環(huán) )由 7個 核 苷 酸 組 成 ， 通 過 由 5對 堿 基 組 成 的 雙螺 旋 區(qū) (T C臂 )與 tRNA的 其 余 部 分 相 連 。 除 個 別例 外 ， 幾

25、乎 所 有 tRNA在 此 環(huán) 中 都 含 有 T C 。 2、 tRNA的 三 級 結(jié) 構(gòu) RNA的 二 級 花 形 結(jié) 構(gòu) 在 細(xì) 胞 中 進 一 步 回 折 扭 曲 ，使 分 子 內(nèi) 部 的 自 由 能 達 到 最 小 ， 在 二 級 結(jié) 構(gòu) 中 突環(huán) 上 未 配 對 的 堿 基 由 于 RNA鏈 的 再 度 扭 曲 與 另 一突 環(huán) 上 的 未 配 對 堿 基 相 遇 ， 形 成 新 的 氫 鍵 配 對 關(guān)系 ， 其 結(jié) 果 是 平 面 花 形 結(jié) 構(gòu) 變 成 立 體 花 形 結(jié) 構(gòu) 。 RNA的 三 級 結(jié) 構(gòu)莖 環(huán) 結(jié) 構(gòu) 間 的 相 互 作 用 形 成 三 級 結(jié) 構(gòu) 。 第 六

26、 節(jié) 、 核 酸 的 性 質(zhì)一 、 一 般 理 化 性 質(zhì)1、 兩 性 電 解 質(zhì) ：2、 溶 解 性 ： 微 溶 于 水 ， 不 溶 于 一 般 有 機 試 劑 （ 乙 醇 沉 淀 核 酸 ） ， 鈉 鹽 易 溶 于 水 。3、 粘 度 高 ： 一 般 DNA比 RNA粘 度 高 。4、 水 解 性 ： 可 被 酸 、 堿 或 酶 水 解 ， DNA比 RNA對 稀 堿 穩(wěn) 定 。5、 顏 色 反 應(yīng) ：1） 核 糖 與 濃 鹽 酸 和 苔 酚 藍(lán) 共 熱 呈 綠 色 ， 在 670nm處 可測 RNA；2） 2-脫 氧 核 糖 與 酸 和 二 苯 胺 共 熱 呈 藍(lán) 紫 色 ， 在 595

27、nm處 可測 DNA。二 種 反 應(yīng) 可 作 定 性 試 驗 ， 定 量 試 驗 靈 敏 度 低 、 準(zhǔn) 確 性 差 ，但 快 、 簡 便 。 二 、 紫 外 吸 收 性 質(zhì) 堿 基 具 共 軛 雙 鍵 強 烈 吸 收 260-290nm波 段紫 外 光 ， 最 大 吸 收 峰 在 260nm附 近 。 應(yīng) 用 ：1、 不 同 核 苷 酸 有 不 同 吸 收 特 性 ， 可 用 紫 外 分 光 光 度 計進 行 定 性 、 定 量 測 定 。 1 OD相 當(dāng) 于 ： 50g/ml DNA 40g/ml RNA 20g/ml Nt(核 苷 酸 ） 2、 確 定 所 提 取 的 核 酸 是 否 純

28、 品 。 1） DNA： 1.8 純 品 OD260/OD290 1.8 RNA 污 染 1.8 pro 污 染 2） RNA： OD260/OD290 2.0 純 品 3、 紫 外 可 使 相 鄰 T T間 形 成 共 價 結(jié) 合 的 胸 腺嘧 啶 二 聚 體 ， 引 起 基 因 突 變 。A = TC = GT = AT = A A = TC = GT AT A 三 、 核 酸 結(jié) 構(gòu) 的 穩(wěn) 定 性1、 堿 基 堆 積 力 ： 雙 螺 旋 內(nèi) 部 堿 基 形 成 的 疏 水 區(qū) ；2、 堿 基 間 的 氫 鍵 ：3、 磷 酸 基 與 介 質(zhì) 中 陽 離 子 形 成 的 離 子 鍵4、 范

29、 德 華 力 。 四 、 核 酸 的 變 性1、 變 性 的 概 念1） 現(xiàn) 象 ： 雙 螺 旋 DNA和 具 雙 螺 旋 區(qū) 的 RNA氫 鍵 斷 裂 ， 空 間 結(jié) 構(gòu) 被 破 壞 ， 形 成 單 鏈 無規(guī) 則 線 團 狀 的 過 程 。 四 、 核 酸 的 性 質(zhì) 2） 結(jié) 果 ： A、 增 色 效 應(yīng) ： 260nm紫 外 吸 收 增 加 ； B、 粘 度 下 降 、 浮 力 密 度 上 升 ； C、 生 物 學(xué) 性 能 部 分 或 全 部 喪 失 。3） 引 起 變 性 的 因 素 ： 溫 度 、 pH、 尿 素 、 甲 醛 等 。 2、 熱 變 性 與 TmTm： 在 熱 變 性

30、中 ， 紫外 吸 收 增 加 的 中 點值 所 對 應(yīng) 的 溫 度 ，稱 該 DNA的 熔 解 溫度 （ melting temperature,Tm);又 稱 熱 解 鏈 溫 度 。 四 、 核 酸 的 性 質(zhì) 3、 影 響 Tm的 因 素 ：1） DNA的 均 一 性 ；2） G-C含 量 ： Tm與G-C含 量 成 正 比 。3） 介 質(zhì) 中 的 離 子 強度 ： 離 子 強 度 低 ，Tm低 ， 熔 解 溫 度 范圍 窄 。 五 、 核 酸 的 復(fù) 性概 念 ： 變 性 DNA在 適 當(dāng) 條 件 下 （ 緩 慢 降 溫 ） ， 可 使 兩 條 彼 此 分 開 的 鏈 重 新 締 合 成

31、 雙 螺 旋 結(jié) 構(gòu) 的 過 程 。 復(fù) 性 后 ， 許 多 物 化 性 質(zhì) 可 得 到 恢 復(fù) ， 生 物 學(xué) 活 性 部 分 恢 復(fù) 。影 響 因 素 ： 溫 度 、 DNA片 段 大 小 、 DNA濃 度 、 堿 基 重 復(fù) 序 列 多 少 、 離 子 濃 度 。四 、 核 酸 的 性 質(zhì) DNA變 性 與 復(fù) 性 六 、 核 酸 的 提 取方 法 ： 先 破 碎 細(xì) 胞 ， 提 取 核 蛋 白 ； 再 使 核 酸與 蛋 白 質(zhì) 分 離 ； 最 后 沉 淀 核 酸 ， 進 行 純 化 。 1、 蛋 白 質(zhì) 作 為 生 物 功 能 的 主 要 載 體 ， 承 擔(dān) 著 哪 些 主 要 生物

32、學(xué) 功 能 ？2、 蛋 白 質(zhì) 這 個 重 要 的 生 物 大 分 子 的 化 學(xué) 組 成 是 什 么 ？ 其基 本 組 成 單 位 在 結(jié) 構(gòu) 和 性 質(zhì) 上 有 何 特 點 ？3、 蛋 白 質(zhì) 的 基 本 組 成 單 位 -氨 基 酸 是 如 何 形 成 大 分 子蛋 白 質(zhì) 的 ？ 蛋 白 質(zhì) 生 物 大 分 子 的 空 間 結(jié) 構(gòu) 是 如 何 來 描述 的 ？4、 為 什 么 要 了 解 蛋 白 質(zhì) 的 空 間 結(jié) 構(gòu) ？ 蛋 白 質(zhì) 的 結(jié) 構(gòu) 與 功能 之 間 有 何 關(guān) 系 ？ 決 定 蛋 白 質(zhì) 結(jié) 構(gòu) 的 因 素 是 什 么 ？課 后 思 考 1、 組 成 蛋 白 質(zhì) 的 氨

33、 基 酸 的 結(jié) 構(gòu) 是 如 何 影 響 蛋 白 質(zhì) 的 ？2、 氨 基 酸 除 了 作 為 蛋 白 質(zhì) 的 基 本 組 成 單 位 ， 它 還 有 那些 其 他 功 能 ？3、 什 么 是 肽 ？ 它 們 有 那 些 功 能 ？4、 在 蛋 白 質(zhì) 的 結(jié) 構(gòu) 中 什 么 類 型 的 鍵 是 最 重 要 的 ？5、 蛋 白 質(zhì) 結(jié) 構(gòu) 的 四 個 水 平 是 什 么 ？6、 在 生 物 體 中 蛋 白 質(zhì) 有 那 些 功 能 ？7、 什 么 是 蛋 白 質(zhì) 的 變 性 ？ 它 們 是 如 何 發(fā) 生 的 ？8、 纖 維 蛋 白 有 那 些 典 型 的 獨 特 性 質(zhì) ？9、 球 蛋 白 在

34、生 物 體 中 有 那 些 類 型 的 作 用10、 什 么 是 變 構(gòu) 調(diào) 節(jié) ？本 章 的 知 識 點 1： 1、 核 酸 的 種 類 、 基 本 組 成 單 位 是 什 么 ？ RNA的 三 種 主 要 形 式 是 什 么 ？ 它 們 分 別 承 擔(dān)什 么 樣 的 生 物 功 能 ？2、 DNA的 結(jié) 構(gòu) 是 如 何 發(fā) 現(xiàn) 的 ？ Watson 和Crick運 用 什 么 信 息 決 定 了 DNA的 結(jié) 構(gòu) ？3、 DNA和 RNA的 一 級 結(jié) 構(gòu) 和 二 級 結(jié) 構(gòu) 分 別 有何 特 征 ？4、 什 么 是 DNA的 變 性 和 復(fù) 性 ？ 有 何 特 征 ？本 章 的 知 識 點 2：