,便于重組DNA的鑒定和選擇,具有特殊的標(biāo)記基因,可攜帶多個或多種外源基因,有一個至多個限制酶切割位點(diǎn),目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴(kuò)大,穩(wěn)定并能復(fù)制,目的,條件,Ca2處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷?受精卵)顯微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動物,將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的染色體 DNA上表達(dá),轉(zhuǎn)化 過程,原核細(xì)胞,受精卵,體細(xì)胞,受體細(xì)胞,感受態(tài)細(xì)胞法,顯微注射技術(shù),農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,常用方法,微生物細(xì)胞,動物細(xì)胞,植物細(xì)胞,生物種類,定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品,定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì),實(shí)質(zhì),獲取目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測與鑒定,預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推測應(yīng)有的氨基酸序列找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列,過程,區(qū) 別,基因工程,蛋白質(zhì)工程,項(xiàng)目,區(qū) 別,蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程 基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造,聯(lián)系,只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì),可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì),結(jié)果,基因工程,蛋白質(zhì)工程,項(xiàng)目,過程是逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶催化,從過程cDNA中獲取所需要的目的基因，根據(jù)基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置或基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來獲取，不需要用解旋酶，也不需要PCR,過程應(yīng)用CaCl2溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞,過程鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞可利用DNA分子雜交技術(shù)。,過程中通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得的目的基因，可用于基因工程，但該目的基因不存在內(nèi)含子和非編碼序列，因此不能用于比目魚的基因組測序,將多個抗凍基因編碼區(qū)相連形成的能表達(dá)的新基因可能不再是抗凍基因,利用農(nóng)桿菌的目的是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，而不是篩選重組質(zhì)粒,應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測受體細(xì)胞中是否成功導(dǎo)入了目的基因，但不能檢測目的基因是否完全表達(dá)。,