,兩個核苷酸之間的_,作用 部位,攜帶目的基因進入 _,拼接DNA 片段，形成_,切割_ 和載體,作用,載體,DNA 連接酶,限制酶,目的基因,重組DNA,受體細胞,磷酸二酯鍵,質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒等,E·coli DNA 連接酶、T4 DNA 連接酶,EcoR 限制酶 Sma 限制酶,常用類型,能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制 有多個_ _ 具有特殊的_ _,E·coli DNA 連接酶只能連接 _ T4 DNA 連接酶能連接_ _和平末端,識別雙鏈DNA 分子的某種_ _ 在特定位點上切割,作用特點(條件),載體,DNA 連接酶,限制酶,特定核苷酸,序列,黏性末端,限制酶切割,位點,黏性末,端,標記基,因,目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合，然后在_ _作用下延伸,PCR技術(shù)擴增,以RNA為模板，在 作用下人工合成,反轉(zhuǎn)錄法,已知核苷酸序列的 ，直接利用DNA合成儀用化學方法合成，不需要模板,化學合成,人工合成,從自然界已有的物種中分離，如從_ 中獲取,直接分離,具體操作,方法,基因文庫,較小基因,逆轉(zhuǎn)錄酶,DNA聚合,酶,原核細胞,_,受精卵、體細胞,受體 細胞,_法(用Ca2處理),_技術(shù),_法、 基因槍法、_ _法,常用 方法,微生物細胞,動物細胞,植物細胞,花粉,管通道,顯微注射,感受態(tài)細胞,受精卵,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化,過程,動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織,植物幼嫩部位,取材,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),項目,蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn) 皮膚移植材料的培育 檢測有毒物質(zhì) 生理、病理、藥理學的研究,植株快速繁殖 脫毒植株的培養(yǎng) 人工種子 生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等 轉(zhuǎn)基因植物的培育,應(yīng)用,無菌、無毒 營養(yǎng)，血清等 溫度和pH 氣體環(huán)境：O2、CO2,無菌 營養(yǎng) 適宜條件,條件,新的細胞，不形成個體，不體現(xiàn)全能性,獲得植株個體，可以體現(xiàn)全能性,結(jié)果,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),項目,過程,細胞膜的_,細胞膜的 _、細胞的_,原理,動物細胞融合,植物體細胞雜交,流動性,流動性,全能性,突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能,克服了遠緣雜交的_ _，獲得雜種植株,意義,雜交細胞,雜種植株,結(jié)果,除物理法和化學法外還可以用_誘導(dǎo),物理法：離心、電激、振動； 化學法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo),融合方法,_或膠原蛋白酶,纖維素酶和_,相關(guān)酶,動物細胞融合,植物體細胞雜交,果膠酶,胰蛋白酶,滅活的病毒,不親,和性,