1CDE SFDA 注射劑的無(wú)菌保證與工藝研究 2CDE SFDA 藥 品 管 理 法 與 藥 品 生 產(chǎn) 2001年2月28日修訂的藥品管理法第十條，經(jīng)修訂后明確要求：“藥品必須按照（原法規(guī)：工藝規(guī)程）國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝進(jìn)行生產(chǎn)，。改變影響藥品質(zhì)量的生產(chǎn)工藝的，必須報(bào)原批準(zhǔn)部門(mén)審核批準(zhǔn)?！鄙a(chǎn)工藝的源頭：藥品研發(fā)中經(jīng)工藝研究與驗(yàn)證獲得的申報(bào)工藝 3CDE SFDA 目 錄 4CDE SFDA不通過(guò)人體固有的保護(hù)屏障，直接進(jìn)入血液起效快、安全性要求高。無(wú)菌嚴(yán)格控制熱原及雜質(zhì) 5CDE SFDA 歷史的教訓(xùn)：1970-1975年，美國(guó)因輸液污染導(dǎo)致敗血癥400多起，但問(wèn)題產(chǎn)品全部通過(guò)了無(wú)菌檢查。2006年，安徽華源的“欣氟”事件：滅菌工藝與無(wú)菌檢查 6CDE SFDA 方法本身是否經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證05版藥典的新要求。檢測(cè)結(jié)果有無(wú)代表性。 抽檢，樣本數(shù)一般為20/批。 樣本數(shù)、污染率及通過(guò)無(wú)菌檢查（取不到污染樣）的概率遵循二項(xiàng)式定律（泊松分布）通過(guò)無(wú)菌檢查的概率P=(1-q)n式中：q為批產(chǎn)品污染率 n為樣本數(shù)無(wú) 菌 檢 查 的 局 限 性 7CDE SFDA 計(jì) 算 實(shí) 例假設(shè)當(dāng)某批藥品的實(shí) 際 染 菌 率 為 5%時(shí)，如果根據(jù)通常取樣的數(shù)量為20支，則該批藥品通過(guò)無(wú)菌檢查的概率 P=(1-q)n=（1-0.05）20 =0.359 即有35.9%的可能性，該批藥品將會(huì)被判定為無(wú)菌。 8CDE SFDA 無(wú)菌檢查特性數(shù)據(jù)表編號(hào)污染率通過(guò)無(wú)菌檢查的概率n=1 n=2 n=4 n=10 n=15 n=20 n=30001 5 95 90 81 60 46 362 10 90 81 66 35 21 123 15 85 72 52 20 9 44 20 80 64 41 11 4 15 77.64 22.36 56 0.1% 5%中國(guó)藥典現(xiàn)取樣數(shù)為：20，如污染率為5%，從曲線得，檢出概率為64%。 9CDE SFDA如 何 保 證 注 射 劑無(wú) 菌 合 格 呢 ？ 10CDE SFDA 質(zhì) 量 控 制 的 三 種 模 式 檢 驗(yàn) 控 制 質(zhì) 量（Quality by Test） 不夠全面 生 產(chǎn) 控 制 質(zhì) 量（Quality by Manufacture） 將質(zhì)控延伸到生產(chǎn)環(huán)節(jié) 設(shè) 計(jì) 控 制 質(zhì) 量（Quality by Design，QbD） 全方位的控制、發(fā)展的方向三者互為補(bǔ)充，后者包括前者 11CDE SFDA 保證注射劑無(wú)菌的措施研究階段 研究設(shè)計(jì)出符合無(wú)菌要求的產(chǎn)品（包括合適的劑型、滅菌工藝、包裝材料）前提與源頭生產(chǎn)階段 批產(chǎn)后應(yīng)嚴(yán)格按照研究驗(yàn)證后的工藝進(jìn)行生產(chǎn) 12CDE SFDA D值（微生物的耐熱參數(shù)）：在一定溫度下，將微生物殺滅90%所需的時(shí)間，以分鐘為單位。一般小于1分鐘。 F0值：產(chǎn)品在121下的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間。滅菌率L：某溫度下滅菌1分鐘所對(duì)應(yīng)的F0值。 13CDE SFDA Z=10時(shí)，不同溫度下的滅菌率和所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間溫 度 （ ） 滅 菌 率 L 滅 菌 時(shí) 間 （ 分 鐘 ）121 1.00 1.00120 0.794 1.259115 0.251 3.984110 0.079 12.600105 0.025 40.000100 0.008 125.00 14CDE SFDA 濕熱滅菌法：將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。濕熱滅菌法通常分為過(guò)度殺滅法和殘存概率法兩種。 15CDE SFDA 過(guò)度殺滅法F0不低于12適用于熱穩(wěn)定性好的產(chǎn)品以徹底殺滅任何污染的微生物為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌的手段無(wú)菌保證值不小于6 16CDE SFDA 殘存概率法滅菌過(guò)程8 F012分鐘適用于熱穩(wěn)定性不很好的產(chǎn)品通過(guò)控制工藝過(guò)程的微生物污染和滅菌工藝參數(shù)使產(chǎn)品無(wú)菌無(wú)菌保證值不小于6 17CDE SFDA 其它濕熱滅菌工藝 F0值低于8的滅菌工藝熱穩(wěn)定性很差的產(chǎn)品以無(wú)菌生產(chǎn)工藝為基礎(chǔ)，滅菌是提高無(wú)菌保證水平的輔助手段不計(jì)算F0值，污染概率不大于0.1%除血液制品外，發(fā)達(dá)國(guó)家的大容量注射劑很少采用此類(lèi)工藝小容量注射劑也較少采用 18CDE SFDA SAL （無(wú)菌保證水平） ：產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負(fù)對(duì)數(shù)。國(guó)際上規(guī)定，濕熱滅菌法的SAL不得低于6。 SAL F0/D121lgN0 N0：滅菌前的染菌量 SAL除了和F0 有關(guān)，還與染菌量（N0）及所染菌的耐熱參數(shù)（D121）有關(guān)。 19CDE SFDA F0和SAL的關(guān)系： F0=8 N0=100 SAL 8/1lg100 =6 D121=1時(shí) 注意：污染菌在不同的產(chǎn)品中的耐熱性可能不同，故驗(yàn)證時(shí)應(yīng)采用實(shí)際的藥液。 eg: 嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規(guī)D值在1.5-3.0分鐘）在復(fù)方氨基酸注射液中的D值為0.8分鐘左右，在30的葡萄糖溶液中的D值為2.2分鐘。 20CDE SFDA 無(wú)菌保證水平應(yīng)用實(shí)例1假定N0為100cfu/瓶，D值為1分鐘，要達(dá)到SAL不小于6，滅菌F0值應(yīng)達(dá)到多少？相當(dāng)于115 下滅菌多少分鐘？F0=（SALlgN0）D =（6+ lg100）1= 8分鐘。換算成115 下的F0 /L115=8/0.25=32分鐘。殘存概率法有效的基礎(chǔ)： N0100， D 1。 21CDE SFDA 某輸液采用110，30分鐘的滅菌程序，起始污染微生物仍為100cfu/瓶，D值為0.5分鐘，經(jīng)計(jì)算此時(shí)的無(wú)菌保證值和殘存微生物污染的概率為：SAL= F0/D - lgN0 = L110t /D - lg100 = 0.0830/0.5-2 = 2.8殘存微生物的概率為10-2.80.158通過(guò)無(wú)菌檢查的概率為(1-0.158)20=96.9%。無(wú)菌檢查的結(jié)果不能保證產(chǎn)品的SAL符合要求（ 6）。無(wú)菌保證水平應(yīng)用實(shí)例2 22CDE SFDA無(wú)菌保證理化指標(biāo) 滅菌和化學(xué)指標(biāo)的平衡點(diǎn)？ 23CDE SFDA 工藝選擇的考慮要點(diǎn)無(wú)菌產(chǎn)品必須達(dá)到規(guī)定的無(wú)菌保證水平。不得以理化性質(zhì)等硬指標(biāo)來(lái)壓無(wú)菌的軟指標(biāo)?？勺罱K滅菌產(chǎn)品一定要首選最終滅菌方式，以保證產(chǎn)品的無(wú)菌特性。無(wú)菌制造工藝的基本特征是：低安全+高成本。應(yīng)盡可能避免采用。當(dāng)滅菌可能會(huì)造成副產(chǎn)物等問(wèn)題時(shí)，盡可能從工藝上創(chuàng)造條件，使滅菌成為可行。 24CDE SFDA 國(guó) 食 藥 監(jiān) 注 20087號(hào) 通 知 08年1月10日國(guó)家局發(fā)布了化學(xué)藥品注射劑基本技術(shù)要求。國(guó)家局已受理但尚未批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑應(yīng)參照技術(shù)要求進(jìn)行研究。已經(jīng)批準(zhǔn)注冊(cè)的化學(xué)藥品注射劑也應(yīng)參照技術(shù)要求進(jìn)行相關(guān)研究（完善滅菌工藝等），并在申報(bào)再注冊(cè)時(shí)提供相關(guān)研究資料。 25CDE SFDA 劑型選擇的合理性要權(quán)衡考慮各劑型的無(wú)菌保證水平、雜質(zhì)的控制水平、工藝的可行性、臨床使用的方便等。首先要考慮被選劑型可采用的滅菌工藝的無(wú)菌保證水平的高低。原則上首選劑型應(yīng)能采用終端滅菌工藝，并保證SAL不小于6。對(duì)于有充分的依據(jù)證明不適宜采用終端滅菌工藝且臨床必需注射給藥的品種，可考慮選擇采用無(wú)菌生產(chǎn)工藝的劑型。通常無(wú)菌生產(chǎn)工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑。 26CDE SFDA 輸液產(chǎn)品滅菌工藝的選擇原則 應(yīng)采取終端滅菌工藝，建議首選過(guò)度殺滅法（F012）。例如：氯化鈉大輸液。如產(chǎn)品不能耐受，可采用殘存概率法(8F012)，但均應(yīng)保證產(chǎn)品滅菌后的SAL不小于6。采用其它F0值小于8的終端滅菌條件的工藝，原則上不予認(rèn)可。如產(chǎn)品不能耐受終端滅菌工藝條件，應(yīng)盡量?jī)?yōu)化處方工藝，以改善制劑的耐熱性。如確實(shí)無(wú)法耐受，則應(yīng)考慮選擇其他劑型，而非大容量注射劑。 27CDE SFDA 工 藝 驗(yàn) 證 要 求主要包括以下試驗(yàn)：滅菌前微生物污染水平測(cè)定，包括滅菌前產(chǎn)品中的污染菌及其耐熱性；熱穿透試驗(yàn)；微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)：生物指示劑的耐熱性及數(shù)量應(yīng)對(duì)滅菌工藝構(gòu)成必要的挑戰(zhàn)。過(guò)度殺滅法（F012）不要求此項(xiàng)驗(yàn)證 28CDE SFDA 粉 針 劑 的 工 藝 與 驗(yàn) 證粉針劑的無(wú)菌保證水平應(yīng)能保證SAL不大于10-3。常規(guī)的工藝驗(yàn)證試驗(yàn)包括：培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)：至少在線灌裝三批，每批的批量詳見(jiàn)附表，每瓶產(chǎn)品均應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌檢查。除菌過(guò)濾系統(tǒng)適應(yīng)性驗(yàn)證：包括過(guò)濾系統(tǒng)相容性測(cè)試、過(guò)濾前后濾膜完整性測(cè)試，必要時(shí)尚需進(jìn)行濾膜的微生物截留量測(cè)試。 29CDE SFDA 附表：培養(yǎng)基灌裝試驗(yàn)的批量與判斷合格的標(biāo)準(zhǔn)批量（瓶）3000 4750 6300 7760允許染菌的數(shù)量（瓶）0 1 2 3 30CDE SFDA 小 容 量 注 射 劑 的 工 藝 與 驗(yàn) 證應(yīng)首選終端滅菌工藝，相關(guān)技術(shù)要求同大容量注射劑。如有充分的依據(jù)證明不能采用終端滅菌工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，可考慮采用無(wú)菌生產(chǎn)工藝，相關(guān)技術(shù)要求同凍干粉針劑。 31CDE SFDA歐盟1999年8月正式開(kāi)始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹(shù)決策樹(shù)的作用是在考慮各種復(fù)雜因素的情況下，輔助選擇最佳的滅菌方法 歐 盟 滅 菌 方 法 選 擇 的 決 策 樹(shù) 32CDE SFDA 33CDE SFDA決策樹(shù)越往下，風(fēng)險(xiǎn)越大需要提供的研究與驗(yàn)證的證據(jù)也越多 34CDE SFDA 工藝選擇的基本原則:無(wú)菌產(chǎn)品應(yīng)在灌裝到最終容器后進(jìn)行最終滅菌（首選）如因產(chǎn)品對(duì)熱不穩(wěn)定不能進(jìn)行最終滅菌時(shí)，可采用最終滅菌方法的替代方法-過(guò)濾除菌和/或無(wú)菌生產(chǎn)工藝（退而求其次） 35CDE SFDA 劑型選擇不合理無(wú)菌保證工藝選擇不合理無(wú)菌保證工藝研究不夠全面與細(xì)致驗(yàn)證不充分或未經(jīng)驗(yàn)證 36CDE SFDA無(wú)菌檢查是有局限性的。質(zhì)量源于設(shè)計(jì)、過(guò)程控制質(zhì)量對(duì)于保證注射劑的無(wú)菌至關(guān)重要。 37CDE SFDA